詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產品貨號:FS-P013565
產品規(guī)格:50次
產品分類:純化試劑盒
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一,、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設計,。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP,、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二,、操作步驟 1.在冰浴中,,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min,。 3.結束反應,,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測,。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,,各區(qū)實驗服,、儀器,、耗材應獨立使用,不能混用,;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作,;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,,且完成實驗后立即上機檢測,;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰,、陽性對照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心,。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),,并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,,應避免裸手直接接觸PCR反應管,,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置,;不同批號試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None,。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄,。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設置標準品孔和樣本孔,,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,;空白孔不加,。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A,、B各50μL,,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,,15min內,,在450nm波長處測定各孔的OD值。
Human omentin ELISA Kit 人網(wǎng)膜Multi-class antibodies: 48T
SMHC/Myosin 平滑肌肌球蛋白重鏈抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
Methylase ELISA Kit 大鼠甲基化 96T
NME6 P53誘導細胞凋亡抑制蛋白α抗體 0.2ml
beta-Amyloid (1-42) β淀粉樣肽(1-42)抗體 0.1ml
SMHC/Myosin 平滑肌肌球蛋白重鏈抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
HBsAg(Human hepatitis B virus surface antigen) ELISA Kit 人乙型肝炎表面抗原Multi-class antibodies: 48T
IL-1RA 白介-1受體拮抗劑抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LHR/CGR 促黃體生成受體抗體 0.1ml
HGH(Human growth hormone) ELISA KIT 人生長 96T
Proinsulin 胰島原抗體 0.1ml
C11orf53 11號染色體開放閱讀框53抗體 0.2ml
IL-1RA 白介-1受體拮抗劑抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Donkey Goat IgG/Cy7 Cy7標記的驢抗羊IgG 0.1ml
GLI4 轉錄因子Gli4/鋅指蛋白gli4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASB5 含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族5抗體 0.2ml
HSP-90 Alpha/FITC 熒光標記熱休克蛋白90α抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
PIWIL1/FITC 熒光標記piwi樣1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
腺病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒50次O1群霍亂弧菌種屬: Vibrio│cholerae O1提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: O1/eltor 小川(Ogawa)培養(yǎng)基: CM0116生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
斯氏分枝桿菌種屬: Mycobacterium│szulgai提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 國際標準菌種,供菌型檢定用培養(yǎng)基: CM0125生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
橢圓釀酒酵母種屬: SaccharomycescervisiaeHansenvar.ellipsoideus(Hansen)Dekker安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 葡萄酒用菌培養(yǎng)基: 13生長條件: 25-28℃
萊氏曼氏乳桿菌種屬: Lactobacillus leichmannii提供形式: 凍干粉安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 用于維生B12鈷胺,,鈷胺測定法,,食品檢測,制藥和個人護理培養(yǎng)基: MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g,,牛肉粉 8.0g,,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,,硫鎂 0.2 g,乙鈉 5.0 g,,檸檬三銨 2.0 g,,氫二鉀 2.0 g,硫錳 0.05 g,,吐溫80 1.0 g,,蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2,。121℃,,15min。生長條件: 37℃,,微好氧或厭氧
CXC趨化因子受體7(CXCR7)ELISA試劑盒化 PT3-甲硫基丁 96%乙膽固酯(>96%,BR)
CXC趨化因子受體4(CXCR4)ELISA試劑盒化 SP2-甲基-3-甲硫基呋喃 98%硬脂膽固酯(>98%,BR)
CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒化 分析標準品,,99.98%2-甲基四-3-酮 98%重(>98%,BR)
CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA試劑盒化 分析標準品,K(99.97%)/Cl(100.00%)5-甲基糠 98%鉻粒(>99%,,BR)
CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒化 ≥99.99% metals basis3-巰基-2-丁酮 98%鉻粉(>99%,,BR)
CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒化 分子生物學, ≥99.5%2-巰基-3-丁,異構體混合物 ≥97%, FG化鉻六(>98%,BR)
COP9結構光形態(tài)發(fā)生同源物亞基2(擬南芥)(COPS2)ELISA試劑盒化 培養(yǎng), ≥99.5%3-甲硫基 99%硫鉻十二
c-myc癌基因產物(c-myc)ELISA試劑盒化 ≥99.995% metals basis3-巰基-2-戊酮 95%硫鉻(>98%,BR)
c-Jun氨基末端激/應急激活的蛋白(JNK/SAPK)ELISA試劑盒化溶液 3.3mol/L(3.3N)甲基(2-甲基-3-呋喃基)二硫 ≥98%, FG三氧化鉻(>99%,BR)
CDCP1(CDCP1)ELISA試劑盒化溶液 3mol/L(3N)2-甲基四氫噻吩-3-酮 97%性紅B
CD8分子(CD8)ELISA試劑盒5-乙?;绶?2- 98%3-甲硫基己乙酯 97%直接黃12
CD82分子(CD82)ELISA試劑盒4-氨基鹽鹽 97%丁甲硫酯 98%肉桂酰(>98%,,BR)
CD73分子(CD73)ELISA試劑盒鄰氨基鹽鹽 95% 麥芽酚脂 98%
CD6分子(CD6)ELISA試劑盒4-氨基頻哪酯 98%2-甲基-4-基-1,3-氧硫雜環(huán)己 98%檸檬(>95%,Pract Grade)
CD68分子(CD68)ELISA試劑盒2-氨基頻哪酯,97%4-甲基辛 98%檸(>98%,BR)
CD63分子(CD63)ELISA試劑盒6-溴吡啶-3- 97%糠甲酯 99%2--4--a-L-巖糖苷(>98%,BR)