詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1,、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2,、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,,其濃度為200 U/L,,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,,100 U/L,,50 U/L,25 U/L,,12.5 U/L,,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,其余濃度以此類推,。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml。
4,、 檢測稀釋液A:1×10ml,。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1 mL | FS-P013318 |
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標(biāo)記6個離心管,,分別為7,,6,5,,4,,3,2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。 5. 換槍頭,,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用。 6. 換槍頭,,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用。 | 二,、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,,必須設(shè)置N+2個提取, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),, 一個是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC,。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL,。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三,、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),,則標(biāo)記N+9個PCR管,,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照,。如果做2-3次重復(fù),,則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù),。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片,、SNP檢測,、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片,、表達(dá)譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE,、SILAC,、iTRAQ、TMT,、Label-free,、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot,、Co-ip EMSA、CHIP,、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色,、組織切片,、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS,、LC-MS,、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型,、動物模型構(gòu)建
DAT ELISA Kit 大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Multi-class antibodies: 48T
TFPI/LACI 組織因子途徑抑制劑抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GNRPX/PLEKHJ1 鳥核苷結(jié)合蛋白X抗體 0.2ml
DPD(Mouse deoxypyridinoline) ELISA Kit 小鼠脫氧酚/脫氧啉 96T
FAD24 脂肪細(xì)胞分化因子24 0.2ml
BNC2 性核蛋白2(鋅指蛋白basonuclin2)抗體 0.2ml
TFPI/LACI 組織因子途徑抑制劑抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
CK-HMW(Human cytokeratin High Molecular Weight) ELISA Kit 人高分子量細(xì)胞角蛋白Multi-class antibodies: 48T
phospho-HDAC8(Ser39) 磷化組蛋白去乙?;?抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MK1/MAPKK1/MKK1 MK1/MAPKK1抗體(N-端) 0.1ml
ADA(Human adenosine deaminase) ELISA Kit 人腺苷脫 96T
RASGEF1A 鳥核苷交換因子rasgef1a抗體 0.2ml
C1orf198 1號染色體開放閱讀框198抗體 0.2ml
phospho-HDAC8(Ser39) 磷化組蛋白去乙酰化8抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit human sIgA/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
GPRASP2 G蛋白偶聯(lián)受體GPRSP2蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ALS2CR8 肌側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體 0.2ml
KGFR/FGFR2/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記角質(zhì)形成細(xì)胞生長因子受體/成纖維細(xì)胞生長因子受體2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
Shrimp tropomyosin /FITC 熒光標(biāo)記南美白對蝦過敏原蛋白(蝦原肌球蛋白)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
植物專用蛋白酶抑制劑混合液,,100X小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)elisa檢測試劑盒
小鼠腎損傷分子1(KIM-1)elisa檢測試劑盒
小鼠白三烯C4(LTC4)elisa檢測試劑盒
小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂A2(Lp-PL-A2)elisa檢測試劑盒
小鼠功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)elisa檢測試劑盒
小鼠基質(zhì)金屬蛋白2(MMP-2)elisa檢測試劑盒
小鼠Na-K-ATP(ATPase)elisa檢測試劑盒
小鼠球蛋白G1(IgG1)elisa檢測試劑盒
小鼠巨噬炎性蛋白5(MIP-5)elisa檢測試劑盒
小鼠粒趨化蛋白2(GCP-2)elisa檢測試劑盒
小鼠結(jié)合珠蛋白(HP)elisa檢測試劑盒
小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)elisa檢測試劑盒
小鼠脂聯(lián)受體1(ADIPOR1)elisa檢測試劑盒
小鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)elisa檢測試劑盒
小鼠血紅氧合2(HO-2)elisa檢測試劑盒
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋,。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀,?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘,。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用,。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,,測定RNA溶液 濃度和純度,。