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詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1,、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2,、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,，其濃度為200 U/L,，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L,，100 U/L,，50 U/L，25 U/L,，12.5 U/L,，6.25 U/L，3.12 U/L,，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可,，其余濃度以此類推,。
3,、 樣品稀釋液：1×20ml,。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml,。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
50次 | FS-P013514 |
使用方法：
一,、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例） 1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）,。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照,。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,，分別為7，6,，5,，4，3,，2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭,，下同）。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,，充分震蕩1分鐘,，得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。 5. 換槍頭,，在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘,，得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用。 6. 換槍頭,，在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用,。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。 | 二,、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品，必須設(shè)置N+2個(gè)提取,， 多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照）,， 一個(gè)是NC（樣品制備陰性對(duì)照）。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)（濃度為1×10E4 拷貝/μL,，10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝）或第5號(hào)（濃度為1×10E5 拷貝/μL,，10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC,。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL,。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三,、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系,，在樣品制備室進(jìn)行） 10. 如果只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照，6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍,。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加）
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片,、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè),、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片,、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE,、SILAC、iTRAQ,、TMT,、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè)：DNA/RNA提取,、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè)：Western blot、Co-ip EMSA,、CHIP,、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè)：HE染色,、特殊染色,、組織切片、免疫組化,、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS,、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞,、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
Phospho-Stathmin (Ser16) /FITC 熒光標(biāo)記磷化原癌基因蛋白18抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
SP-B/FITC 熒光標(biāo)記肺表面活性蛋白B抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AIMP2 AIMP2抗體 0.2ml
Rabbit Guinea pig IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
phospho-GATA4 (Ser262) 磷化GATA結(jié)合蛋白4抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
SP-B/FITC 熒光標(biāo)記肺表面活性蛋白B抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
GABA(Human Gamma-aminobutyric acid) ELISA Kit 人γ氨基丁Multi-class antibodies： 48T
MMP-7 基質(zhì)金屬蛋白-7抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IQCD IQCD蛋白抗體 0.2ml
Human typhus antibody ELISA Kit 人抗斑疹傷寒抗體 96T
PRPH2 外周蛋白2抗體 0.2ml
phospho-beta Catenin (Ser33) 磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體 0.1ml
MMP-7 基質(zhì)金屬蛋白-7抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit Mink IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
GABA A receptor pi G基丁受體pi/GABAA Rπ抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARIP2a 激活受體2A抗體 0.2ml
IGFBP-3/FITC 熒光標(biāo)記胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MK IgM/APC APC標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml
PMP2 /FITC 熒光標(biāo)記周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
曲霉屬通用PCR試劑盒50次白黃鏈霉菌種屬: Streptomycesalboflavus(WaksmanetCurtis)WaksmanetHenrici安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 12生長(zhǎng)條件: 28℃
黃色長(zhǎng)孢鏈霉菌種屬: StreptomyceslongisporoflavusKrass安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 12生長(zhǎng)條件: 28℃
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
苜蓿根瘤菌種屬: RhizobiummelilotiDangeard安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 肥料培養(yǎng)基: 9生長(zhǎng)條件: 25℃
肺炎衣原體抗原(Cpn)ELISA試劑盒D-蛋氨 99%霉酚嗎啉乙酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,，≥98%聚乙二8000
肺炎衣原體抗體IgM(Cpn-IgM)ELISA試劑盒L-正纈氨 99%新橙皮苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,，≥97%化鋰(分子生物學(xué)級(jí))
肺炎衣原體抗體IgA(Cpn-IgA)ELISA試劑盒L-正亮氨 99%新芒果苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%硫亞鐵銨六
肺炎衣原體抗體(Cpn-Ab)ELISA試劑盒D-鳥(niǎo)氨鹽鹽 99%蕓香柚皮苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,，≥98%紅四氮唑
肺特異性X蛋白(LUNX)ELISA試劑盒L-鳥(niǎo)氨鹽鹽 98%補(bǔ)骨脂 分析標(biāo)準(zhǔn)品,，≥98%磺甲氧噠
肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒L-氨叔丁酯鹽鹽 99%補(bǔ)骨脂 98%磺甲氧噠(標(biāo)準(zhǔn)品)
肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒DL-氨 >98.0%(HPLC)枸橘苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%TCEP,；三-(2-甲酰乙基)膦鹽鹽
肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒L-氨甲酯鹽鹽 98%苦鬼臼 分析標(biāo)準(zhǔn)品,，≥98%N，N-二甲酰(分子生物學(xué)級(jí))
肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒D-氨 98%原薯蕷皂苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%硫代硫鈉五(AR)
肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒D-脯氨 99%槲皮苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,，≥98%化鈉(AR)
肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒D-絲氨甲酯鹽鹽 98%金絲桃苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,，≥98%可溶性淀粉
肺表面活性蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒D-絲氨 98.5%槲皮 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98.5%硫脲
肺癌標(biāo)志物DR-70(DR-70TM)ELISA試劑盒DL-絲氨 98%槲皮 97%化鈷六(分子生物學(xué)級(jí))
腓骨蛋白2(FBLN2)ELISA試劑盒L-絲氨甲酯鹽鹽 98%吳茱萸次 分析標(biāo)準(zhǔn)品,，≥98%化鈷六(AR)
肥胖抑制(Obestatin)ELISA試劑盒D-蘇氨 99%吳茱萸次 98%酚,酚
肥大類胰蛋白(MCT)ELISA試劑盒D-色氨甲酯鹽鹽 98%迷迭香 分析標(biāo)準(zhǔn)品,，≥97%異戊
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,，15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,，中間層以及無(wú)色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后,，于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,，每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,，使其*溶解,，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度,。
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