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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：鼠疫耶爾森氏菌染料法PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013518
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一,、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有,，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA,，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二,、操作步驟 1．在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油,。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次,，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油,；否則，直接取5-10μl電泳檢測,。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服,、儀器,、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用,；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作,；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測,；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),，并單獨(dú)存放,。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記,。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄,。
LAP18/stathmin/FITC 熒光標(biāo)記白血病相關(guān)蛋白18/癌蛋白18抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
SPARC/FITC 熒光標(biāo)記富含半胱的性分泌蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AIMP3/p18 抑癌蛋白AIMP3抗體 0.2ml
Rabbit Guinea pig IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
GATA6 GATA結(jié)合蛋白6抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
SPARC/FITC 熒光標(biāo)記富含半胱的性分泌蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
EPO(Human Erythropoietin) ELISA Kit 人紅細(xì)胞生成Multi-class antibodies： 48T
Integrin Alpha X/CD11c 整合αX抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh KIAA1576/VAT1L 囊泡胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1家族蛋白抗體 0.2ml
Cox V-IgG(Human Coxsackie virus IgG) ELISA Kit 人柯薩奇病毒IgG 96T
Protor-1 癌抑制基因Protor1抗體 0.1ml
Phospho-CDK9 (Thr29) 磷化周期依賴性激9抗體 0.1ml
Integrin Alpha X/CD11c 整合αX抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit Mink IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
G3BP2 G3BP2蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARL11 ADP核糖基化因子樣11抗體 0.2ml
phospho-IGF1 Receptor (Tyr1161) /FITC 熒光標(biāo)記磷化胰島樣生長因子1受體抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MK IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml
PLGF/FITC 熒光標(biāo)記胎盤生長因子抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
鼠疫耶爾森氏菌染料法PCR試劑盒50次側(cè)耳種屬: Pleurotus│lampas提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,；礦物油法；定期移植法
淺紫鏈霉菌種屬: Streptomyces│violascens分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0038生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
玫瑰新鞘氨醇菌種屬: Novosphingobium│rosa提供形式: 凍干物模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株,，用于分類學(xué)研究,。培養(yǎng)基: 468生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法,；真空冷凍干燥法
芽孢桿菌種屬: Bacillus atrophaeus提供形式: 凍干管,，斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 指示菌。培養(yǎng)基: 蛋白胨 5.0g,，牛肉浸取物 3.0g,，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g,，蒸餾 1.0L,，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,，則有利于產(chǎn)生芽孢,。傳代方法: ①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,，掰斷,，用200μL無菌或培養(yǎng)基充分溶解，平板涂布,，活化培養(yǎng),。
②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒,，后用無菌接種鏟切塊,，挑取接入平板或斜面,，培養(yǎng)。生長條件: 30℃,，好氧存儲條件: 2-8℃冷藏,，凍干管10年以上，斜面1-3個(gè)月,。
多球蛋白受體(poly-IgR)ELISA試劑盒硒粉 99.9% metals basis,200目對叔丁 95%吐溫80(化學(xué)純)
多聚血清蛋白(PHSA)ELISA試劑盒二氧化硒 AR,，99%乙酰 98%吐溫80(藥用級)
多聚腺苷二核糖聚合(PARP)ELISA試劑盒碲 99.99% metals basis乙酰 CP,97%吐溫80(培養(yǎng)級)
多聚ADP核糖聚合(PARP)ELISA試劑盒4-二甲氨基吡啶 99%乙基乙二酰酯 98%亞鐵(AR)
多功能蛋白聚糖(VS)ELISA試劑盒N-羥基鄰二甲酰亞 98%草酰 98%葡萄糖(AR)
多功能蛋白聚糖(versican)ELISA試劑盒2-巰基-5-甲基-1,3,4-噻二唑 99%氧化 AR,99.0% (劇品)PF-562271
多巴色異構(gòu)(DT)ELISA試劑盒2-巰基并咪唑 98%氧化 電子級（劇品）海藻鈉
多巴脫羧(DDC)ELISA試劑盒鄰二甲酰亞 99%度米芬 97%鈉
多巴-β羥化(DBH)ELISA試劑盒異硫酯 98%環(huán)胞霉A 98%膠原I型(sigma)
多巴D2受體(D2R)ELISA試劑盒異硫酯 99%, 蛋白測序級2,3-二甲氧基甲 99%膠原II型(sigma)
多巴D1受體(D1R)ELISA試劑盒異硫酯 99%,用于HPLC標(biāo)記3,4-二甲氧基甲 99%膠原IV型(sigma)
多巴(DA)ELISA試劑盒疊氮鈉 AR,99%（劇品）2,4-二羥基甲 98%鉬鈉二(AR)
對氧-3(PON3)ELISA試劑盒2,3,5-三酚 98%3,4-二羥基甲 98%對氨基甲(AR)
對氧(PON)ELISA試劑盒三乙二乙 85%3,4-二羥基甲 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99%對氨基甲(標(biāo)準(zhǔn)品)
對稱二甲基精氨(SMDA)ELISA試劑盒內(nèi)消旋-2,3-二巰基丁二 98%異香蘭 97%硅鎂（高純）
對氨基甲(PABA)ELISA試劑盒0.983-甲氧基甲 CP,98.0% L-抗壞血鈉
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL,；空白孔不加,。
4.除空白孔外,，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5.棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,，15min內(nèi),，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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