轉(zhuǎn)基因品系玉米MON809染料法qPCR試劑盒注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間,；4．循環(huán)次數(shù),；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理,；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué),；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件,。

服務(wù)流程：
1,、根據(jù)客戶提供的基因序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針（染料法只需設(shè)計(jì)引物）
2、抽提DNA,、RNA,，并對(duì)RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄
3、實(shí)時(shí)熒光定量PCR
4,、提供完整的實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告(檢測(cè)數(shù)據(jù),、溶解曲線、擴(kuò)增曲線)
5,、返還樣品（引物,、RNA和cDNA）
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參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因品系玉米MON809染料法qPCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
使用方法:
一,、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）,。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）,。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7,，6,，5，4,，3,，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,，*用帶芯槍頭,，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL,，試劑盒提供),，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用,。
4. 換槍頭,，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),，充分震蕩 1 分鐘,，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用,。
5. 換槍頭,，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘,，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品,。放冰上待用,。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容,。
8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,，多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管,、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三,、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系,，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線,。如果做定性分析,，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照,。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),，避免長時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感,，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,，有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A,、B液時(shí),，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,，密封保存,，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,，使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng),，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝,；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒,。
組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-12）活性比色法定量　GDA (Guanine deaminase) 　1 Kit

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-12）活性比色法定量　GP2 (Pancreatic secretory granule membrane major glycoprotein GP2) 　100 ul

細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-13）活性熒光定量　GNL3 (Guanine nucleotide-binding protein-like 3) 　20 ul

組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-13）活性熒光定量　GPM6B (Neuronal membrane glycoprotein M6-b) 　100 ul

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-13）活性熒光定量　COLGALT2 (Procollagen galactosyltransferase 2) 　100 ul

細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-13）活性比色法定量　GPIHBP1 (Glycosylphosphatidylinositol-anchored high density lipoprotein-binding protein 1) 　100 ul

組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-13）活性比色法定量　GNL3L (Guanine nucleotide-binding protein-like 3-like protein) 　20 ul

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-13）活性比色法定量　GMPR2 (GMP reductase 2) 　100 ul

細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-14）活性熒光定量　PIGR(Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) 　100 ul

組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-14）活性熒光定量　TCN2(Transcobalamin-2) 　100 ul

體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-14）活性熒光定量　GLG1 (Golgi apparatus protein 1) 　100 ul

基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）明膠酶譜法（gelatin-zymography）電泳分析（MMP2/9）　GIN1 (Gypsy retrotransposon integrase-like protein 1) 　100 ul

基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）酪蛋白酶譜法（casein-zymography）電泳分析（MMP1/3/7/12/13）　GCA(Grancalcin) 　100 ul

基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）膠原蛋白酶譜法（collagen-zymography）電泳分析（MMP1/13）　H2AFX(Histone H2AX) 　1 Kit

基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）羧甲基轉(zhuǎn)鐵蛋白（CM transferrin -zymography電泳分析（MMP7）　GLCE (D-glucuronyl C5-epimerase) 　100 ul

細(xì)胞/組織蛋白（基質(zhì)金屬蛋白酶）樣品制備　LGALSL (Galectin-related protein) 　100 ul
轉(zhuǎn)基因品系玉米MON809染料法qPCR試劑盒Penicillium│variabile Sopp分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Cedecea│sp.分離基物: 土壤/森林樹下土提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 近海細(xì)菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Aspergillus cristatus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0016生長條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Pichia│pastoris提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 表達(dá),、分泌磷脂酶培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法,；真空冷凍干燥法；礦物油法

Fomitopsis│rosea (Alb. & Schwein.) P. Karst.分離基物: 子實(shí)體提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Listeria│monocytogenes分離基物: 病死豬腦提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究 教學(xué)用于病原菌目的基因檢測(cè)培養(yǎng)基: 396生長條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法;

Alphaherpesvirinae│Pseudorabies virus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 0生長條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;

Micromonospora│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0039生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Bacillus│idriensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 831生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法