詳細介紹
組成及試劑配制:
1,、酶標板:一塊(96孔)
2,、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,,其濃度為200 U/L,,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,,100 U/L,,50 U/L,,25 U/L,12.5 U/L,,6.25 U/L,,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,其余濃度以此類推,。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml。
4,、 檢測稀釋液A:1×10ml,。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T 0.2PCR管 | FS-02R6426 |
使用方法:
一,、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照,。 2. 標記6個離心管,分別為7,,6,,5,,4,,3,2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。 5. 換槍頭,,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照,。放冰上待用,。 6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用,。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用。 | 二,、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品,,必須設(shè)置N+2個提取, 多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),, 一個是NC(樣品制備陰性對照),。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,,以此作為PC。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品,,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒,。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,,在樣品制備室進行) 10. 如果只做1次重復(fù),,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,,1個用于PCR陰性對照,,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),,則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍,。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片,、SNP檢測、DNA甲基化檢測,、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片,、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE,、SILAC,、iTRAQ、TMT,、Label-free,、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot,、Co-ip EMSA、CHIP,、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色,、組織切片,、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS,、LC-MS,、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型,、動物模型構(gòu)建
MIP-1 Alpha/FITC 熒光標記巨噬細胞炎癥因子1α抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
TNF- Alpha /HRP 辣根過氧化物標記壞死因子抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ACBD4 ?;鵄結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 0.2ml
Rabbit Avidin/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗親和 0.1ml
GPR101 G蛋白偶聯(lián)受體101抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Avidin/FITC FITC標記的兔抗親和 0.1ml
TNF- Alpha /HRP 辣根過氧化物標記壞死因子抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
OVA sIgE(Human ovalbumin specific IgE) ELISA Kit 人卵清蛋白特異性IgEMulti-class antibodies: 48T
IGF II/IGF2 胰島樣生長因子-II抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAGEL2 黑色瘤抗原樣基因2抗體 0.2ml
Human Resistin ELISA KIT 人抵抗 96T
RERG Ras相關(guān)雌調(diào)節(jié)生長抑制蛋白 0.2ml
CD3E CD3/CD3-ε 抗體 0.1ml
IGF II/IGF2 胰島樣生長因子-II抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit Guinea pig IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
GPR71 G蛋白偶聯(lián)受體71抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AGFG2 HIV-1病毒復(fù)制結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
LDL-R/FITC 熒光標記低密度脂蛋白受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgG/AP 性磷(AP)標記的兔抗羊IgG 0.1ml
SSTR1/FITC 熒光標記生長抑受體1(SSTR1)抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
花生源性成分核酸檢測試劑盒48T0.2PCR管豬抗原6復(fù)合物基因座A(Ly6a)elisa檢測試劑盒
豬胃動蛋白1(GKN1)elisa檢測試劑盒
豬成纖維生長因子4(FGF4)elisa檢測試劑盒
豬轉(zhuǎn)甲狀腺蛋白(TTR)elisa檢測試劑盒
豬胱天蛋白9(CASP9)elisa檢測試劑盒
豬β2糖蛋白(β2-GP)elisa檢測試劑盒
豬腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化(TACE)elisa檢測試劑盒
猴軸突生長誘向因子4(Ntn4)elisa檢測試劑盒
猴白分化抗原CD97(CD97)elisa檢測試劑盒
猴促甲狀腺胚胎因子(TEF)elisa檢測試劑盒
猴血管緊張III(ANG III)elisa檢測試劑盒
猴骨保護(OPG)elisa檢測試劑盒
豬單氧化(MAO)elisa檢測試劑盒
豬間變性瘤(ALK)elisa檢測試劑盒
猴非神經(jīng)元性烯醇化(NNE)elisa檢測試劑盒
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無色水相上層,。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊,。
④RNA清洗 移去上清液,,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀,?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,,使其*溶解,,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度,。