詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1,、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2,、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,,其濃度為200 U/L,,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,,100 U/L,,50 U/L,,25 U/L,12.5 U/L,,6.25 U/L,,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,其余濃度以此類推,。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml。
4,、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml,。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
50次 | FS-P013409 |
使用方法:
一,、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照,。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,,分別為7,,6,5,,4,,3,2,。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。 5. 換槍頭,,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用,。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,,充分震蕩1分鐘,,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用。 | 二,、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),, 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照),。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,,以此作為PC。另外用水作為NC,。如果每次制備需要200μL樣品,,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒,。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),,則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),,則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍,。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片,、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè),、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片,、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE,、SILAC,、iTRAQ、TMT,、Label-free,、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot,、Co-ip EMSA、CHIP,、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色,、組織切片,、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS,、LC-MS,、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型,、動(dòng)物模型構(gòu)建
BACE2 ELISA Kit 大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解2Multi-class antibodies: 48T
Synapsin I 神經(jīng)突觸1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
BJP(Human Bence-Jones protein) ELISA Kit 人本周蛋白 96T
NEU4 神經(jīng)4抗體 0.2ml
BHLHB9/p60TRP p60TRP蛋白抗體 0.1ml
Synapsin I 神經(jīng)突觸1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
TNF- Alpha(Human Tumor necrosis factor Alpha) ELISA KIT 人壞死因子αMulti-class antibodies: 48T
GLI1 下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Goat IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 2ml
b-FABP(Human brain fatty acid binding protein) ELISA Kit 人腦型脂肪結(jié)合蛋白 96T
Rab17 RAS癌基因相關(guān)蛋白R(shí)AB17抗體 0.2ml
phospho-CASC3(Tyr181) 磷化易感候選基因3抗體 0.1ml
GLI1 下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit mouse Kappa light chain/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
GANP 中心相關(guān)核蛋白MCM3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANP32C 致瘤磷蛋白32相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
IL-22R/IL22RA1/FITC 熒光標(biāo)記白介-22受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗人IgG 0.3ml
Resistin/FITC 熒光標(biāo)記抵抗抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
柑橘潰瘍病菌PCR試劑盒蠟狀芽孢桿菌種屬: Bacillus│cereus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 266生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
產(chǎn)氣腸桿菌種屬: Enterobacter│aerogenes提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
柱孢犁頭霉根狀變種種屬: Absidia│cylindrospora var. rhizomorpha提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
?;さ鞍?/span>(ASP)ELISA試劑盒鹽普魯卡因 分析標(biāo)準(zhǔn)品黃 GR(劇品)西平
纖維母生長(zhǎng)因子受體1癌基因伴侶(FGFR1OP)ELISA試劑盒溴 分析標(biāo)準(zhǔn)品過(guò)氧乙 AR,18-20%卡平(標(biāo)準(zhǔn)品)
纖維母表面抗原(FSP)ELISA試劑盒D-氨基葡萄糖-6-硫鹽 99%過(guò)氧乙 21-25%卡鉑
纖維連接相關(guān)抗原(FRA)ELISA試劑盒根皮苷,二 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%過(guò)氧乙 26-30%卡鉑(標(biāo)準(zhǔn)品)
纖維連接蛋白(FN)ELISA試劑盒三(基)伍甲基環(huán)戊二烯基釕(II)六氟 96%過(guò)氧乙 31-35%硫長(zhǎng)春新/硫基長(zhǎng)春
纖維介蛋白(fgl2)ELISA試劑盒聚乙烯 18-88 Mw ~130,000過(guò)氧乙 36-40%硫長(zhǎng)春新/硫基長(zhǎng)春(標(biāo)準(zhǔn)品)
纖維膠凝蛋白3(FCN3)ELISA試劑盒聚乙烯 20-98 Mw ~125,000過(guò)氧乙 41-45%帕唑帕尼
纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒聚乙烯 4-98 Mw ~27,000過(guò)氧乙 46-50%非洛地平/非地平
纖維蛋白原α鏈(FGA)ELISA試劑盒五 99%,用于植物培養(yǎng)過(guò)氧乙 高純度,,醫(yī)用級(jí),,5%(1Gal/PE)非洛地平(標(biāo)準(zhǔn)品)
纖維蛋白原(Fb)ELISA試劑盒五標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.1mg/ml過(guò)氧乙 15-17%6-硫鳥(niǎo)(進(jìn)分)
纖維蛋白溶(PL/Fbn)ELISA試劑盒五 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%發(fā)煙硫 AR6-硫鳥(niǎo)
纖維蛋白(Fibrin)ELISA試劑盒五標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=2%發(fā)煙硫 65%6-硫鳥(niǎo)(標(biāo)準(zhǔn)品)
纖調(diào)蛋白(FMOD)ELISA試劑盒五標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=2%結(jié)晶四化錫 AR,99.0% 維A;全反式維A;維生A;視黃
纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒五 97%結(jié)晶四化錫 99.995% metals basis維A;(標(biāo)準(zhǔn)品)
纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒硫奎尼丁 USP級(jí)硫脲 AR,,99%卡莫司汀/卡氮芥
纖溶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒2-喹喔啉羧 97%硫脲 CP,,98%卡莫司汀/卡氮芥(標(biāo)準(zhǔn)品)
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解,。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋,。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%,。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,,于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),,清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,,使其*溶解,,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零,。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度,。