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武漢凱氏定氮儀JTKDN-C蛋白質(zhì)測(cè)定儀凱氏定氮儀實(shí)驗(yàn)精度的影響因素

　　凱氏定氮儀是一款自動(dòng)加酸加堿加稀釋液的蒸餾裝置，滴定過程是需要手動(dòng)完成,，并通過人工計(jì)算氮含量的凱氏定氮儀器,。凱氏定氮儀適用于食品、飲料,、,、農(nóng)林漁業(yè)、礦山,、化工等生產(chǎn)企業(yè),，以及高等院校、科研院所,、環(huán)境監(jiān)測(cè),、土肥站、農(nóng)機(jī)站,、質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)等科研檢測(cè)單位對(duì)食品,、乳制品、天然橡膠,、乳膠,、種子、土壤,、植株,、飼料、礦石,、污泥及化學(xué)沉淀物等樣品中對(duì)蛋白質(zhì)含量的智能化測(cè)定,。

　　凱氏定氮儀采用國際廣泛認(rèn)可的食品蛋白質(zhì)含量檢測(cè)方法—凱氏定氮法,。凱氏定氮儀是分析有機(jī)化合物含氮量的常用方法，其原理是首先將含氮有機(jī)物與濃硫酸共熱,，經(jīng)一系列的分解,、碳化和氧化還原反應(yīng)等復(fù)雜過程，zui后有機(jī)氮轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)氮硫酸銨,，這一過程稱為有機(jī)物的消化,。消化完成后，將消化液轉(zhuǎn)入凱氏定氮儀反應(yīng)室,，加入過量的濃氫氧化鈉,，將NH4+轉(zhuǎn)變成NH3，通過蒸餾把NH3驅(qū)入過量的硼酸溶液接受瓶?jī)?nèi),，硼酸接受氨后,，形成四硼酸銨，凱氏定氮儀然后用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定,，直到硼酸溶液恢復(fù)原來的氫離子濃度,。因此凱氏定氮法必須分三步進(jìn)行，分別為：消化,、蒸餾和吸收,、滴定。

　　凱氏定氮儀可檢測(cè)谷物,、食品、飼料,、水,、土壤、淤泥,、沉淀物和化學(xué)品中的氮和蛋白質(zhì),，因此也被稱為蛋白質(zhì)測(cè)定儀。凱氏定氮儀作為測(cè)定蛋白質(zhì)儀器,，廣泛應(yīng)用于乳與乳制品中蛋白質(zhì)的含量的測(cè)定,。凱氏定氮儀具有高靈敏度，分析速度快,，應(yīng)用范圍廣,，所需試樣少，設(shè)備和操作比較簡(jiǎn)單等特點(diǎn),。凱氏定氮儀是目前使用zui廣泛測(cè)定乳與乳制品中蛋白質(zhì)的儀器,。

武漢凱氏定氮儀JTKDN-C蛋白質(zhì)測(cè)定儀技術(shù)參數(shù):

1.測(cè)定品種：糧食、食品,、乳制品,、飲料,、土肥、飼料及其他農(nóng)副產(chǎn)品
2.測(cè)定范圍：0.1-200㎎氮,，含氮量0.05%-95%
3.回收率：100±0.5%（相對(duì)誤差,，包括消化過程）；
4.蒸餾速度：＜5分鐘/樣品
5.冷卻水消耗：2L/分鐘
6.重復(fù)率：相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差<±1%
7.功率：800W
8.供水：水壓大于0.15MPa水溫小于20度
9.外形尺寸：380*330*740mm
10.重量：28Kg

凱氏定氮儀操作步驟：
（一）消化
1,、準(zhǔn)備6個(gè)凱氏燒瓶，標(biāo)號(hào),。1,、2、3號(hào)燒瓶中分別加入適當(dāng)濃度的蛋白溶液1.0mL,，樣品要加到燒瓶底部,，切勿沾在瓶口及瓶頸上。再依次加入硫酸鉀-硫酸銅接觸劑0.3g,，濃硫酸2.0mL,，30%過氧化氫1.0mL。4,、5,、6號(hào)燒瓶作為空白對(duì)照，用以測(cè)定試劑中可能含有的微量含氮物質(zhì),，對(duì)樣品測(cè)定進(jìn)行校正,。4、5,、6號(hào)燒瓶中加入蒸餾水1.0mL代替樣液,，其余所加試劑與1、2,、3號(hào)燒瓶相同,。
2、將加好試劑的各燒瓶放置消化架上,，接好抽氣裝置,。先用微火加熱煮沸，此時(shí)燒瓶?jī)?nèi)物質(zhì)炭化變黑,，并產(chǎn)生大量泡沫,，務(wù)必注意防止氣泡沖出管口。待泡沫消失停止產(chǎn)生后,，加大火力,，保持瓶?jī)?nèi)液體微沸，至溶液澄清后,，再繼續(xù)加熱使消化液微沸15min,。在消化過程中要隨時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)燒瓶,，以使內(nèi)壁粘著物質(zhì)均能流入底部，以保證樣品*消化,。消化時(shí)放出的氣體內(nèi)含SO2,，具有強(qiáng)烈刺激性，因此自始自終應(yīng)打開抽水泵將氣體抽入自來水排出,。整個(gè)消化過程均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,。消化*后，關(guān)閉火焰,，使燒瓶冷卻至室溫,。
（二）蒸餾和吸收
蒸餾和吸收是在微量凱氏定氮儀內(nèi)進(jìn)行的。凱氏定氮蒸餾裝置種類甚多,，大體上都由蒸氣發(fā)生,、氨的蒸餾和氨的吸收三部分組成。
1,、儀器的洗滌
儀器安裝前,，各部件需經(jīng)一般方法洗滌干凈，所用橡皮管,、塞須浸在10%NaOH溶液中,，煮約10min，水洗,、水煮10min,，再水洗數(shù)次，然后安裝并固定在一只鐵架臺(tái)上,。
儀器使用前,，微量全部管道都須經(jīng)水蒸氣洗滌，以除去管道內(nèi)可能殘留的氨,，正在使用的儀器，每次測(cè)樣前,，蒸氣洗滌5min即可,。較長(zhǎng)時(shí)間未使用的儀器，重復(fù)蒸氣洗滌,，不得少于三次,，并檢查儀器是否正常。仔細(xì)檢查各個(gè)連接處,，保證不漏氣,。
首先在蒸氣發(fā)生器中加約2/3體積蒸餾水，加入數(shù)滴硫酸使其保持酸性,，以避免水中的氨被蒸出而影響結(jié)果,，并放入少許沸石（或毛細(xì)管等）,，以防爆沸。沿小玻杯壁加入蒸餾水約20mL讓水經(jīng)插管流入反應(yīng)室,，但玻杯內(nèi)的水不要放光,，塞上棒狀玻塞，保持水封,，防止漏氣,。蒸氣發(fā)生后，立即關(guān)閉廢液排放管上的開關(guān),，使蒸氣只能進(jìn)入反應(yīng)室,，導(dǎo)致反應(yīng)室內(nèi)的水迅速沸騰，蒸出蒸氣由反應(yīng)室上端口通過定氮球進(jìn)入冷凝管冷卻,，在冷凝管下端放置一個(gè)錐形瓶接收冷凝水,。從定氮球發(fā)燙開始計(jì)時(shí)，連續(xù)蒸煮5min,，然后移開煤氣燈,。沖洗完畢，夾緊蒸氣發(fā)生器與收集器之間的連接橡膠管,，由于氣體冷卻壓力降低,，反應(yīng)室內(nèi)廢液自動(dòng)抽到反應(yīng)室外殼中，打開廢液排出口夾子放出廢液,。如此清洗2～3次,，再在冷凝管下?lián)Q放一個(gè)盛有硼酸-指示劑混合液的錐形瓶使冷凝管下口*浸沒在溶液中，蒸餾1～2min,，觀察錐形瓶?jī)?nèi)的溶液是否變色,。如不變色，表示蒸餾裝置內(nèi)部已洗干凈,。移去錐形瓶,，再蒸餾1～2min，用蒸餾水沖洗冷凝器下口,，關(guān)閉煤氣燈,，儀器即可供測(cè)樣品使用。