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NGS在病原微生物檢測(cè)中的應(yīng)用背景相關(guān)由病原微生物引起的感染性疾病是臨床面臨的常見的疾病之一,，并且隨著人群結(jié)構(gòu)變化,、環(huán)境污染以及藥物濫用等因素的影響，病原體呈現(xiàn)多樣化和復(fù)雜化的趨勢(shì),，逐步威脅人類健康,。隨著測(cè)序技術(shù)的飛速發(fā)展，NGS已逐步應(yīng)用于感染性疾病的診斷,、治療和監(jiān)測(cè),，在病原微生物鑒定、分型,、耐藥突變檢測(cè)及新型病原體鑒定方面有其*的優(yōu)勢(shì),。病原微生物檢測(cè)現(xiàn)狀快速準(zhǔn)確的診斷可以對(duì)病情進(jìn)行監(jiān)控，提供有效治療,，控制疾病的蔓延,。目前常用的病原微生物分子檢測(cè)方法主要有：PCR技術(shù)（包括常規(guī)PCR以及qPC
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RT-qPCR需要注意的那些事,，你都了解嗎,？在RT-qPCR實(shí)驗(yàn)中不論是實(shí)驗(yàn)小白還是老司機(jī)，都會(huì)遇到各種不同的實(shí)驗(yàn)問題,。解決問題不僅要浪費(fèi)額外的樣品和試劑,，還要占用大量的時(shí)間一遍遍的重復(fù)和分析，真是被實(shí)驗(yàn)折磨得焦頭爛額,。那實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)該注意哪些細(xì)節(jié)呢,？小翊精心為大家總結(jié)了RT-qPCR實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng),，希望助小伙伴們一臂之力。RT-qPCR實(shí)驗(yàn)包括RNA提取與質(zhì)量評(píng)估,，逆轉(zhuǎn)錄和qPCR三大步驟，每個(gè)步驟都有很多注意事項(xiàng),，才能做出可靠的數(shù)據(jù),。下面由小翊給您詳細(xì)介紹。RNA質(zhì)量評(píng)估在RT-qPCR實(shí)驗(yàn)
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膠原酶——?jiǎng)游锝M織消化利器圖1：膠原酶產(chǎn)品介紹膠原酶（Collagenase）是一類能夠特異性的識(shí)別Pro-X-Gly-Pro序列（該序列高頻率出現(xiàn)在膠原中，很少發(fā)現(xiàn)于其他蛋白中）,，并切割該序列中的中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之間的肽鍵的肽鏈內(nèi)切酶,，且能夠水解結(jié)締組織中的膠原蛋白。許多蛋白酶都能水解單鏈和變性的膠原多肽,，但膠原酶是唯——種可以降解具有三股超螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維的蛋白酶,，其廣泛存在結(jié)締組織內(nèi)，其中有效的膠原酶是由厭氧細(xì)菌溶組織梭菌（Clostridiumhistolytic
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如何完成一次又經(jīng)濟(jì)的Tunel檢測(cè)
如何完成一次又經(jīng)濟(jì)的Tunel檢測(cè),？——YeasenTUNELdetectionKit讓“美”原位呈現(xiàn)通過TdT轉(zhuǎn)移酶將Fluorescein-dUTP結(jié)合到有缺口的DNA上是檢測(cè)細(xì)胞凋亡的常用方法之一,，如Roche提供的InSituCellDeathKit正是基于這個(gè)原理。產(chǎn)品中的TdT轉(zhuǎn)移酶活性直接影響到標(biāo)記的效率,。翊圣生物立足于酶制劑生產(chǎn),，力求開發(fā)以酶制劑為基礎(chǔ)的產(chǎn)品，推出三款熒光素（AlexaFluor640,，AlexaFluor488,，F(xiàn)ITC）標(biāo)記的Tunel檢測(cè)試劑，在滿足客戶對(duì)產(chǎn) -
細(xì)胞污染全攻略（含防、治妙招）我擦……細(xì)胞又污染了,！咋整,，快崩潰了！,！Whocanhelpme!?。【?，小翊來幫您,！專治各種細(xì)胞疑難雜癥，小翊送你完整攻略,。攻略一：了解細(xì)胞污染古人云：知己知彼方可百戰(zhàn)百勝,，因此了解細(xì)胞污染是非常重要的,。常見的污染類型有細(xì)菌污染、真菌污染,、支原體污染,、原蟲污染、黑膠蟲污染,、病毒污染以及非同種細(xì)胞污染,。1、細(xì)菌：細(xì)菌在普通倒置顯微鏡高倍鏡下大多可見,，根據(jù)感染細(xì)菌種類不同,，呈現(xiàn)不同的外形。其培養(yǎng)基一般會(huì)變渾濁,、變黃較快,，對(duì)細(xì)胞生狀態(tài)影響明顯。圖1：細(xì)胞受到細(xì)菌污染
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Clodronate Liposomes體內(nèi)巨噬細(xì)胞清除利器
ClodronateLiposomes體內(nèi)巨噬細(xì)胞清除利器-,、迅捷、持久——,、迅捷,、持久去除巨噬細(xì)胞（depletionofmacrophages）是研究巨噬細(xì)胞功能的重要方法。荷蘭阿姆斯特丹VrijeUniversity的NicovanRooijen教授開發(fā)的一款ClodronateLiposomes,，可以利用巨噬細(xì)胞的內(nèi)吞機(jī)制,，將膜不通透性的氯磷酸（clodronate）帶入細(xì)胞內(nèi)，氯磷酸被釋放,，當(dāng)達(dá)到一定的濃度時(shí)可引發(fā)巨噬細(xì)胞的凋亡,，從而達(dá)到去除巨噬細(xì)胞的目的。作用原理兩親性磷脂分子在水中 -
qPCR常見問題及解決方案對(duì)于從事分子生物學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)猿來說,，RT-qPCR實(shí)驗(yàn)可謂是老生常談了,。看似風(fēng)平浪靜,，只需“RNA提取-反轉(zhuǎn)錄-熒光定量”這些按部就班的操作,，實(shí)則險(xiǎn)象環(huán)生，一丁點(diǎn)的出錯(cuò)都有可能讓我們懷疑人生,。即便如此,，在CNS的召喚下我們?nèi)耘f一遍遍的重復(fù)、重復(fù),、再重復(fù),。小翊深有體會(huì)，為此嘔心瀝血整理出來常用的SYBRGreen染料法RT-qPCR實(shí)驗(yàn)的幾個(gè)常見問題,，并給出了可能的原因和解決方案,，希望大家能夠順利度過RT-qPCR大關(guān),。RT-qPCR實(shí)驗(yàn)中，大家或多或少會(huì)遇到擴(kuò)增曲線異常
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免疫球蛋白G（IgG）——模擬抗體活性,，神似抗體結(jié)構(gòu)免疫球蛋白免疫球蛋白（Ig）指具有抗體（Ab）活性或化學(xué)結(jié)構(gòu),，與抗體分子相似的球蛋白。免疫球蛋白是由兩條相同的輕鏈和兩條相同的重鏈通過鏈間二硫鍵連接而成的四肽鏈結(jié)構(gòu),。免疫球蛋白分為五類,，即免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）,、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白D（IgD）和免疫球蛋白E（IgE）,。圖1五類免疫球蛋白結(jié)構(gòu)示意圖IgG簡(jiǎn)介免疫球蛋白G（ImmunoglobulinG,，IgG）是血清中免疫球蛋白主成分，約占血清中免疫球蛋白總
