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精品│翌圣ZymeEditor打造超高文庫轉(zhuǎn)化率T4 DNA Ligase
建庫作為NGS測序的核心步驟,,直接影響測序質(zhì)量,文庫轉(zhuǎn)化率是評估文庫質(zhì)量的重要指標(biāo),高的文庫轉(zhuǎn)化率一定程度上意味著文庫豐富度、測序數(shù)據(jù)均一性更好。常規(guī)T4DNALigase催化DNA的3’-OH和接頭的5’-磷酸基團(tuán)之間形成磷酸二酯鍵完成接頭連接,但此過程中會出現(xiàn)片段自連,從而減低文庫轉(zhuǎn)化率,,影響文庫豐富度與測序質(zhì)量。翌圣ZymeEditor™酶改造平臺對T4DNALigase進(jìn)行定向改造獲得Hieff®5'AppT4DNALigase(Cat#14960ES),,該突變體只能以預(yù)苷化接頭為底物進(jìn) -
Laminin 521 - 干細(xì)胞培養(yǎng)常用的細(xì)胞外基質(zhì)
干細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)胞外基質(zhì)人類多能干細(xì)胞(hPSC)在無飼養(yǎng)層培養(yǎng)體系下需要額外添加細(xì)胞外基質(zhì)才能貼壁生長,。hPSC細(xì)胞培養(yǎng)在最初的實(shí)驗(yàn)都是在基質(zhì)膠(Matrigel)上進(jìn)行的,基質(zhì)膠是一種從小鼠EHS腫瘤中提取的基底膜制劑,,基質(zhì)膠hPSC維持培養(yǎng)基中能有效地支持hESC的長期增殖,,但它是來自小鼠的復(fù)雜蛋白混合物,容易引起培養(yǎng)體系變異,。由于基質(zhì)膠的變異性和異種性,,使其在再生醫(yī)學(xué)應(yīng)用中的使用復(fù)雜化。研究發(fā)現(xiàn)膠原蛋白IV(CollagenIV),、纖連蛋白(Fibronectin,,F(xiàn)N)、層粘連蛋白(La -
酶聯(lián)免疫吸附測定,,又稱酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),,即ELISA,是酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用的技術(shù),。1971年Engvall等人發(fā)表了使用ELISA定量測定IgG的文章,,將1966年用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測定方法。ELISA的原理ELISA原理是將抗原或抗體包被在固相載體上,,利用抗原抗體特異性結(jié)合,,檢測過程中,通常使用洗板的方式去除非結(jié)合物,,最終酶促反應(yīng)后的底物的顏色,,對樣本中蛋白進(jìn)行定性與定量,。ELISA常見主要試劑1.抗體:單抗特異性強(qiáng),多抗結(jié)合性高,,試劑盒需要高效的配對。2.
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精品推薦|高靈敏ssDNA qubit定量產(chǎn)品助力核酸檢測更精準(zhǔn)
精品推薦|高靈敏ssDNAqubit定量產(chǎn)品助力核酸檢測更精準(zhǔn)核酸質(zhì)控作為分子生物學(xué)最基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)之一,,核酸定量的準(zhǔn)確與否直接決定著下游實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,。目前市面上用的核酸定量方法主要是紫外光吸收法和Qubit熒光染料法。紫外光吸收法利用分光光度計(jì)測定260nm處的吸光度,,對DNA和RNA進(jìn)行定量,。與此同時(shí),還能通過計(jì)算OD260/OD280估計(jì)核酸的純度,,但檢測數(shù)值極易受到其他污染物(如游離核苷酸,、鹽和有機(jī)化合物)的影響。Qubit熒光染料法利用熒光染料特異地與雙鏈DNA,、單鏈DNA,、RNA或蛋白質(zhì)相 -
讓RNA建庫,,像RT-PCR實(shí)驗(yàn)一樣操作簡單
讓RNA建庫,,像RT-PCR實(shí)驗(yàn)一樣操作簡單時(shí)代在發(fā)展,科學(xué)在進(jìn)步,。高通量測序技術(shù)已經(jīng)走進(jìn)越來越多的課題組,,RNA-seq也不再高冷而神秘,已經(jīng)作為常規(guī)的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)在各大期刊內(nèi),。但是,,是否仍然有人看到RNA-seq就頭大、就畏懼,,就覺得特別難呢,?預(yù)混版RNA建庫試劑盒,解決了您的實(shí)驗(yàn)問題,。試劑組分通過提前預(yù)混,,精簡組分,操作時(shí),,再也不用擔(dān)心試劑漏加,;樣本多時(shí),再也不用擔(dān)心預(yù)配置試劑少了,;實(shí)驗(yàn)上,,再也不用擔(dān)心加錯組分了!圖:預(yù)混版與非預(yù)混版的試劑差異讓RNA建庫,,像RT-PCR實(shí)驗(yàn)一樣簡單,,是怎 -
新品 | HEK293殘留DNA片段分析Kit,,輕松實(shí)現(xiàn)HCD片段大小質(zhì)控
HEK293細(xì)胞應(yīng)用及其殘留DNA質(zhì)控HEK293細(xì)胞是一種人胚腎細(xì)胞系,,因其對生長和培養(yǎng)環(huán)境要求不高、易于轉(zhuǎn)染,,以及相比于常用的CHO細(xì)胞翻譯后修飾(PTM)能力更為強(qiáng)大的特點(diǎn),,目前在工業(yè)內(nèi)也被廣泛用于抗體蛋白生產(chǎn)、疫苗中的病毒樣顆粒生產(chǎn),、細(xì)胞和基因治療中的病毒載體生產(chǎn)等領(lǐng)域,。但也有實(shí)驗(yàn)證明,HEK293注入裸鼠中可成瘤,,所以HEK293宿主細(xì)胞殘留成分是生物制品質(zhì)量控制中一個重要環(huán)節(jié),,需要被控制在可接受的水平。嚴(yán)格的純化工藝可以去除一部分宿主細(xì)胞DNA(HCD)等殘留雜質(zhì)成分,,但產(chǎn)品中仍然可 -
環(huán)狀RNA研究利器—RNase R,,助力環(huán)狀RNA加速發(fā)展!
近年來,,mRNA疫苗/藥物逐漸走入大眾的視野,。mRNA疫苗/藥物具有設(shè)計(jì)快速、成本低和易于規(guī)?;a(chǎn)的優(yōu)點(diǎn),,但由于mRNA本身易降解,目前主要通過加帽加尾的方式提高mRNA制劑的穩(wěn)定性,,并輔助mRNA的翻譯,。近年來,研究者們在多種生物中發(fā)現(xiàn)了一種新型RNA——環(huán)狀RNA(circularRNA,circRNA),,此類RNA呈共價(jià)閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu),,不易被核酸外切酶降解,較mRNA更加穩(wěn)定,,且可以實(shí)現(xiàn)非帽依賴蛋白質(zhì)翻譯,。因此circRNA的發(fā)現(xiàn)為開發(fā)新一代生產(chǎn)工藝更簡單、穩(wěn)定性更好和時(shí)效更長的RNA疫苗 -
類器官培養(yǎng)產(chǎn)品匯總腸及腸癌類器官Y-27632Y-27632dihydrochlorideSB-202190A83-01GastrinINicotinamideNAC(N-乙酰-L-半胱氨酸)Prostaglandin(PG)E2前列腺素E2HEPESFreeAcid細(xì)胞培養(yǎng)級L-alanyl-L-glutaminesolution,200mML-丙氨酰-L-谷氨酰胺,,200mMN-2DSSHEPES溶液(1M),,細(xì)胞培養(yǎng)級胃及胃癌類器官Y-27632Y-27632dihydrochloride