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1. 用蒸餾水將制膠模具和梳子沖洗干凈，放在制膠平板上,，封閉模具邊緣,，架好梳子；
2. 根據(jù)欲分離 DNA 片段大小用凝膠緩沖液配制適宜濃度的瓊脂糖凝膠：準(zhǔn)確稱量瓊脂糖干粉,，加入到配膠用的三角燒瓶內(nèi),，定量加入電泳緩沖液（一般20~30 ml） ；
3. 放入到微波爐內(nèi)加熱熔化,。冷卻片刻,，加入一滴熒光染料，輕輕旋轉(zhuǎn)以充分 混勻凝膠溶液,，倒入電泳槽中,，待其凝固；
4. 室溫下 30~ 45 分鐘后凝膠*凝結(jié),， 小心拔出梳子,， 將凝膠安放在電泳內(nèi)槽；
5. 向電泳槽中倒入電泳緩沖液,，其量以沒過膠面 1mm 為宜,，如樣品孔內(nèi)有氣 泡，應(yīng)設(shè)法除去,；
6. 在 DNA 樣品中加入 10×體積的載樣緩沖液（loading buffer） ,，混勻后，用槍 將樣品混合液緩慢加入被浸沒的凝膠加樣孔內(nèi),；
7. 接通電源,，紅色為正極，黑色為負(fù)極,，切記DNA 樣品由負(fù)極往正極泳動 （ 靠近加樣孔的一端為負(fù)） ,。一般 60～100V 電壓，電泳 20～40min 即可,；
8. 根據(jù)指示劑泳動的位置,，判斷是否終止電泳；
9. 電泳完畢,，關(guān)上電源,，在凝膠成像儀上觀察電泳帶及其位置，并與核酸分子 量標(biāo)準(zhǔn) Marker 比較被擴(kuò)增產(chǎn)物的大小,。
瓊脂糖凝膠濃度與線形 DNA的*分辨范圍
| 瓊脂糖凝膠濃度 | 線形 DNA的*分辨范圍（bp） |
|---|---|
| 0.5% | 1,000～30,000 |
| 0.7% | 800～12,000 |
| 1.0% | 500～10,000 |
| 1.2% | 400～7,000 |
| 1.5% | 200～3,000 |
| 2.0% | 50～2,000 |
編輯： hollyemp
