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一. 實驗目的及背景
高等動物，高等植物的基因組相當龐大,， 如人類細胞基因組由30億個堿基對組成,，果蠅基因組有1.4×108個堿基對，水稻基因組有1.4×109個堿基對,。真核細胞基因組中,，約1萬－1.5萬個可表達的結構基因，其它大量存在的是調控序列和內含子序列,?？梢哉f某特定物種的基因組，包含了該物種生長,，發(fā)育,，繁殖等各項生理活動的幾乎全部信息量，因而對真核細胞基因組的結構,，組成,，以及表達調控的研究是至關重要的，而研究的起點就是要獲得純度高--不含蛋白質,、糖類,、酚、氯仿等污染,；得率好--以便有足夠量用于分析,；基因組相對完整--斷裂的基因組以便用于以后PCR分析，RFLP分析,，基因文庫的構建,，基因探測等的研究。
真核細胞基因組在提取過程中一般有以下幾步,，首先是機械法破細胞抽提,；然后去除蛋白質，糖類等細胞內雜質污染,；zui后純化出DNA,，由于真核細胞基因組較大，在操作中應注意動作輕柔,，且在低溫下進行,，以zui大限度地減少機械和化學作用對DNA的剪切，從而獲得相對完整的DNA,。
二．實驗試劑及材料
材料：幼嫩的植物材料0.5g左右,。
試劑：液氮
CTAB抽提緩沖液：2%CTAB（cetyl trimethyl ammonium bromide， 十六烷基*基溴化銨）,，1%β-巰基乙醇 1.4mol/L Nacl,，20mmol/L EDTA，100mmol/L Tris-Hcl pH8.0
3M NaAC
50mM Tris-HCl pH8.0
20mM EDTA
氯仿：異戊醇（24:1）
異丙醇 70％乙醇TE buffer
三．實驗方法
1．取0.5g植物材料,，雙蒸水洗凈,，并用濾紙吸干。
2．植物材料剪成1cm左右碎片,，放入預冷的瓷研缽中,。
3．加入液氮速冷，研磨成細粉（越細越好）,。
4．在5ml離心管中加入抽提緩沖液2.5ml,，60℃保溫1小時。
5. 15000rpm,，離心10分鐘,。上清轉入另一個新的離心管中。
6．加入等體積氯仿：異戊醇（24:1）,，混勻抽提至水乳膠融狀,。
7. 15000rpm，離心10分鐘。
8．上清轉入另一個新的離心管中,。
9．加入2/3倍體積預冷異丙醇,，-20℃保溫30min―1hr，緩緩混勻DNA成絮狀折出,。
10．15000rpm,，離心10分鐘，棄上清,。
11．DNA沉淀用 70％乙醇洗2次,。
12．加入400μl TE buffer溶解DNA。
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