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生物化學技術專題:秦皮中七葉苷,、七葉內(nèi)酯的提取,、分離和鑒定

2014-1-9  閱讀(3260)

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 秦皮為本樨科白蠟樹屬植物白蠟樹(Fraxinus Chinensis Poxb)或苦瀝白蠟樹(F.rhynchophylla Hance)或小葉白蠟樹(F.bungeana DC)的樹皮,味苦,,性微寒。具有清熱,、燥濕,、收澀作用。主治溫熱痢疾,、目赤腫瘤等癥,。

 

秦皮中含有多種內(nèi)酯類成分及皂苷、鞣質等,,其中主要有七葉苷,、七葉內(nèi)酯、秦皮苷及秦皮素等,。多有抗菌消炎的生理活性,,七葉內(nèi)酯對細菌性痢疾,、急性腸炎有較好治療效果,兼有退熱作用,,毒付作用小,,幾無苦味。適于小兒服用,。

 

秦皮中主要成分的結構及性質

1.七葉苷(esculin),,又叫馬粟樹皮苷:白色粉末狀結晶,mp205~206℃,。易溶于熱水(1:15),,可溶于乙醇(1:24),微溶于冷水(1:610),,難溶于乙酸乙酯,,不溶于、氯仿,。在稀酸中可水解,。水溶液中有藍色熒光。

 

2.七葉內(nèi)酯(esculetin):黃色針狀結晶,,mp276℃,。易溶于沸乙醇及氫氧化鈉溶液,可溶于乙酸乙酯,,稍溶于沸水,,幾不溶于,、氯仿,。

 

3.秦皮苷(fraxin):mp205℃。

 

4.秦皮素(fraxetin):mp227~228℃,。

 

實驗原理

七葉苷,、七葉內(nèi)酯均能溶于沸乙醇,可用沸乙醇將二者提取出來,,再利用二者在乙酸乙酯中的溶解性不同而分離之,。

 

實驗方法

(一)提取:取秦皮粗粉150g于索氏提取器中,,加400ml乙醇回流10-12小時,,得乙醇提取液,減壓回收溶劑至浸膏狀,,即得總提取物,。

(二)分離:在上述浸膏中加40ml水加熱溶之。移于分液漏斗中,,以等體積氯仿萃取二次,,將氯仿萃取過的水層蒸去殘留氯仿后加等積乙酸乙酯萃取二次,,合并乙酸乙酯液,以無水硫酸鈉脫水,,減壓回收溶劑至干,,殘留物溶于溫熱甲醇中,濃縮至適量,,放置析晶,,即有黃色針狀結晶析出。濾出結晶,。甲醇,、水反復重結晶,即得七葉內(nèi)酯,。

 

將乙酸乙酯萃取過的水層濃縮至適量,,放置析晶,即有微黃色晶體析出,。濾出結晶,。以甲醇,水反復重結晶,,即得七葉苷,。

 

(三)鑒定:

1.化學檢識:取七葉苷、七葉內(nèi)酯各少許分別置試管中,,加乙醇1ml溶解,。加1%FeCl3溶液2-3滴,顯暗綠色,,再滴加濃氨水3滴,,加水6ml,日光下觀察顯深紅色,。

2.薄層鑒定:

   吸附劑:硅膠G

樣品:七葉苷,、七葉內(nèi)酯標準品及自制七葉苷﹑七葉內(nèi)酯的醇溶液。

展開劑:甲醇-甲酸乙酯-甲苯(1:4:5)

顯色:1)UV254燈下觀察,,七葉苷為灰色熒光,,七葉內(nèi)酯為灰褐色。

 

2)以重氮化對硝基苯胺噴霧顯色,,七葉苷和七葉內(nèi)酯均呈瑪瑙色,。

結果:七葉苷Rf=0. 04,七葉內(nèi)酯Rf=0.28

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