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1.檢品溶液的制備:
取大黃粉末2克,,加乙醇20ml,,在沸水浴上回流浸提10分鐘,過(guò)濾供鑒別用,。
2.鑒別試驗(yàn):
(1)與堿成鹽顯色反應(yīng)(Borntrager反應(yīng)):取1ml乙醇提取液,,加入1ml 10% NaOH溶液,如產(chǎn)生紅色反應(yīng),,加入少量30%過(guò)氧化氫液,,加熱后紅色不褪,加酸使呈酸性時(shí),,則紅色消褪再堿化又出現(xiàn)紅色,。
注:或取大黃粉末少許,置小試管中,加水1~2ml,,加濃H2SO4 2-3滴,,置水浴中加熱10分鐘,冷卻,,加乙1-2ml振搖,。用吸管吸取醚液(黃色)于另一潔凈試管中,加入NaOH試液1ml振搖,,則醚層應(yīng)褪為無(wú)色,,堿層(下層)為紅色,示有蒽醌類成分存在,,如供試的中草藥在以上試驗(yàn)中堿水層僅現(xiàn)黃色,,可分出堿水溶液,置試管中,,加30%H2O2溶液1~2滴,,在沸水浴中加熱數(shù)分鐘,混液如能轉(zhuǎn)為橙紅色,,說(shuō)明中草藥中可能有蒽酚類成分存在,。
(2)升華試驗(yàn):取大黃粉末少許,置載玻片上,,玻片兩端各放短木棍一小段,,然后另取一潔凈載玻片,放置于小棍上,,注意勿觸及下面粉末,。然后移置在三足架的鐵紗網(wǎng)上小心加熱(勿使粉末炭化)至玻片上有升華物凝結(jié)為止,取下蓋片,,使升華物面向上,,放于顯微鏡下觀察,可見(jiàn)多數(shù)黃色針晶或羽毛狀晶體(蒽醌衍生物),。此晶體遇堿液呈紅色,。
(3)園形濾紙層析:
樣品:大黃醇浸液
顯色:
1)于自然光下觀察色帶
2)于紫外光下觀察熒光環(huán)
3)氨熏,觀察是否出現(xiàn)紅色環(huán),,再置uv下觀察熒光環(huán)
4)噴0.5%MgAC2甲醇液,,于90℃烘5分鐘,是否出現(xiàn)橙紅或紫紅色環(huán),。