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概述
大黃記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》等許多文獻(xiàn)中,，用于泄下,、健胃、清熱、解毒等,。
自古以來,，大黃在植物性瀉下藥中占有重要位置，是一位很早就被各國藥典所收載的世界性生藥,。大黃的種類繁多,，大黃是蓼科植物掌葉大黃（Rheum palmatclm L），大黃（R. officinale Baill）及唐古特大黃（R. tangutium Maxim.et Regll）的根莖及根,，大黃中含有多種游離的羥基蒽醌類化合物以及它們與糖所形成的苷,。已經(jīng)知道的羥基蒽醌主要有下列五種：
大黃中蒽醌苷元，其結(jié)構(gòu)不同,，因而酸性強(qiáng)弱也不同,。大黃酸連有-COOH，酸性zui強(qiáng),；大黃素連有β-OH,，酸性第二；蘆薈大黃素連有芐醇-OH,，酸性第三,；大黃素甲醚和大黃酚均具有1,8-二酚羥基，前者連有-OCH3和-CH3,，后者只連有-CH3,，因而后者酸性排在第四位。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵?/strong>
1．學(xué)習(xí)緩沖紙色譜的基本操作技術(shù),，并能根據(jù)色譜結(jié)果,，設(shè)計(jì)液液萃取法分離混合物的實(shí)驗(yàn)方案。
2．掌握PH梯度法的原理及操作技術(shù),。
3．通過磷酸氫鈣柱色譜分離大黃酚及大黃素甲醚的試驗(yàn),，進(jìn)一步熟悉柱色譜操作技術(shù)。
4．學(xué)習(xí)蒽醌類化合物鑒定方法,。
實(shí)驗(yàn)方法
1．大黃總蒽醌苷元的提取
注意：①大黃中的蒽醌類成分大部分與糖結(jié)合,，以蒽醌的形式存在于植物組織中。所以要用酸水解使其生成苷元,。蒽醌苷元可溶于氯仿,、苯及乙等有機(jī)溶劑，用苯時(shí)應(yīng)注意苯蒸氣的揮發(fā),，嚴(yán)防中毒,；②所得的氯仿液中如帶有酸水液，應(yīng)該用分液漏斗分出棄去,，并用蒸餾水回洗一次除去酸性以免影響梯度萃取,。氯仿提取液放置中如有沉淀析出，可濾取之,，該沉淀多為大黃素,，余液進(jìn)行下一步分離試驗(yàn)用。
2．總蒽醌苷元分離方案的設(shè)計(jì)
1)大黃總蒽醌苷元的紙色譜
2) 蒽醌類成分的緩沖紙色譜試驗(yàn)
3)*萃取劑及其用量的確定
4)蒽醌類成分各種萃取劑用量的確定
5)新分離方法的設(shè)計(jì)
3．蒽醌類成分的分離與精制
①大黃酸的分離與精制
將含有總游離蒽醌的氯仿液450ml移至1000ml的大分液漏斗中,，加PH8緩沖液275ml振搖萃取,，靜置至*分層，放出氯仿液后,，到出堿水液至置250ml燒杯中,，加HCl酸化至PH=3，待黃色沉淀析出*后,，過濾,、干燥，干燥后的樣品加冰醋酸10ml加熱使溶,，趁熱過濾,，濾液靜置，析出黃色針晶為大黃酸,，過濾即得純品,。
②大黃素的分離與精制
將提過大黃酸的氯仿液繼續(xù)移至分液漏斗中，用PH9.9緩沖液275ml振搖萃取,，*分層后,，分出堿水層，并用HCl酸化至PH=3,，析出棕黃色沉淀,，過濾，沉淀經(jīng)干燥后,，用10ml冰醋酸加熱使溶,，趁熱過濾，析出橙色大針晶,，過濾后,，即得大黃素純品。
③蘆薈大黃素的分離和精制
余下氯仿液移至分液漏斗后,，加5%NaCO3:5%NaOH (9:1) 堿水液540ml或用0.5%KOH540ml振搖萃取,，堿水液加HCl酸化，析出的沉淀過濾干燥,，用10ml乙酸乙酯重結(jié)晶,，得黃色針晶的蘆薈大黃素純品。
④ 大黃酚和大黃素甲醚的分離--磷酸氫鈣柱色譜
4．蒽醌類成分的鑒定
1) 紙色譜鑒定
2) IR光譜解析
本實(shí)驗(yàn)講解要點(diǎn)及注意事項(xiàng)
1) pH梯度萃取的原理及注意事項(xiàng),。
2) 如何設(shè)計(jì)萃取分離方案的程序與方法,。
3) 蒽醌化合物紅外光譜的特點(diǎn)。
4) 分離萃取時(shí)一定注意乳化層的分出，不要混入,，并且每步用新鮮CHCl3,，回洗堿水液。
5) 緩沖液的配制和堿液的配制要準(zhǔn)確,，嚴(yán)格注意檢查,。
6)每步萃取時(shí)，利用紙色譜檢查跟蹤萃取效果,，如未達(dá)到預(yù)想效果應(yīng)及時(shí)糾正,。
