土壤硝態(tài)氮測試盒
【簡單介紹】
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | YSH3455 |
---|---|---|---|
規(guī)格 | 50管/48樣,、100管/96樣 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
【詳細說明】
商品詳情:
土壤硝態(tài)氮測試盒測定意義
硝態(tài)氮是指硝酸鹽中所含有的氮元素,土壤中的有機物分解生成銨鹽,,被氧化后變?yōu)橄鯌B(tài)氮,。土壤中硝態(tài)氮是高等植物吸收氮的主要形式之一,其含量直接關系到作物的產(chǎn)量與品質(zhì)。
貨號 | 規(guī)格 | 檢測方法 |
YSH3455 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3455-1 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 |
測定原理
在濃酸條件下,,NO3-與水楊酸反應,,生成硝基水楊酸,硝基水楊酸在堿性條件下(PH>12)呈黃色,,在一定范圍內(nèi),,其顏色深淺與含量成正比,可比色測定計算得硝態(tài)氮含量,。
自備實驗用品及儀器
蒸餾水,、天平、常溫離心機,、可見分光光度計/酶標儀,、微量石英比色皿/96孔板、振蕩儀,。
樣品中AA提?。?/span>
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行室溫勻漿,,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,,8000g,,,4℃離心10min,,上清液置冰上待測,。
2.細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清,;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,重復30次),;8000g,,4℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。
3.血清等液體:直接檢測。
計算公式如下:
1,、血清(漿)LAP活力的計算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2,、組織,、細菌或細胞中LAP活力的計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位,。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細菌或細胞密度計算:
單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位,。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應體系總體積,,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),,9.72×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,1cm,;V樣:加入樣本體積,,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,,1 mL,;T:反應時間,2 min,;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,,g,;2000:細菌或細胞總數(shù),2000萬,。
注意事項:
1. 試劑盒中試劑三,、試劑四和標準品均需臨用前配制,且避光保存,,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢,。
2. 為保證實驗結(jié)果的準確性,需先取1-2個樣做預實驗,,如果測定的吸光值過高(高于2.5),,用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應在570nm處無吸收峰,,因此,,570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L,。
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