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土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(SAI)測試盒
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- 上海研生實業(yè)有限公司
- 330 - 600 （具體成交價以合同協(xié)議為準）
- 2024-09-03 09:38:28
- 上海市
- 國產(chǎn)
- 1852
【詳細說明】
商品詳情：
土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(SAI)測試盒測定意義：
S-AI在pH 為4.5~5.0(酸性)條件下催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,，是土壤微生物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一,。
貨號 | 規(guī)格 | 檢測方法 |
YSH3449 | 100管/48樣 | 微量法 |
YSH3449-1 | 50管/24樣 | 可見分光光度法 |
測定原理：
S-AI催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖，進一步與3,5－二硝基水楊酸反應(yīng),，生成棕紅色氨基化合物,，在510nm有特征光吸收，在一定范圍內(nèi)510nm光吸收增加速率與AI活性成正比,。
自備用品：
可見分光光度計/酶標儀,、臺式離心機、水浴鍋,、移液器,、微量石英比色皿/96孔板、研缽,、冰和蒸餾水,。
樣品中AA提取：
1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織,，加入1mL試劑一）進行室溫勻漿,，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min,；自來水冷卻后，8000g,，,，4℃離心10min，上清液置冰上待測,。
2.細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一）,，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴,，功率20％或200W，超聲3s,，間隔10s,，重復(fù)30次）；8000g,，4℃離心10min,，取上清，置冰上待測,。
3.血清等液體：直接檢測,。
計算公式如下：
1,、血清（漿）LAP活力的計算:
單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2,、組織,、細菌或細胞中LAP活力的計算:
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算：
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位,。
LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
（3）按細菌或細胞密度計算：
單位的定義：每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位,。
LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L,；ε：對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑,，1cm,；V樣：加入樣本體積，0.05 mL,；V樣總：加入提取液體積,，1 mL；T：反應(yīng)時間,，2 min,；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL,；W：樣本質(zhì)量,，g；2000：細菌或細胞總數(shù),，2000萬,。
注意事項：
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨用前配制,，且避光保存,，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實驗結(jié)果的準確性,，需先取1-2個樣做預(yù)實驗,，如果測定的吸光值過高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測定,。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,，因此，570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量,。
4．檢出限為100μmol/L,。
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葡萄糖6磷(6PG)測試盒50管/24樣 可見分光光度法
性測試盒100管/48樣 微量法
性測試盒50管/24樣 可見分光光度法
中性測試盒100管/48樣 微量法
中性測試盒50管/24樣 可見分光光度法
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