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一,、飼料行業(yè)霉菌毒素污染概述

養(yǎng)殖行業(yè)的源頭在飼料,，飼料質(zhì)量的好壞直接影響乳品的優(yōu)劣，因此需從源頭上加以控制,。飼料中最主要的污染物來自霉菌毒素,，不僅會(huì)通過的新陳代新帶入生乳中，產(chǎn)生所謂的“毒奶”,，更要的是霉菌毒素會(huì)危害奶牛的健康并嚴(yán)重影響產(chǎn)奶水平,，造成隱形的重大經(jīng)濟(jì)損失。

霉菌毒素(mycotoxins)是某些真菌在污染的糧食和谷物的生長繁殖過程中,，產(chǎn)生的具有毒害作用的次級代謝產(chǎn)物,，由其引起的中毒癥狀被稱作是霉菌毒素中毒癥狀(mycotoxicoses)。目前,，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)霉菌毒素的種類達(dá)400多種,，其化學(xué)、生物學(xué)和毒理學(xué)性質(zhì)多種多樣,，主要的毒性作用包括致癌作用,、遺傳毒性、致畸作用,、肝細(xì)胞毒性,、中毒性腎損害、生殖紊亂和免疫抑制,。霉菌毒素的存在不僅給人類及牲畜的健康帶來極大的危害,，也造成了相應(yīng)的經(jīng)濟(jì)損失。據(jù)聯(lián)合國糧食與農(nóng)業(yè)組織(Food and Agriculture Organization of the United Nations,FAO)統(tǒng)計(jì),，全球每年約有25%的農(nóng)作物被霉菌毒素污染,，約2%的農(nóng)作物因污染嚴(yán)重而失去營養(yǎng)和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，造成數(shù)千億美元的經(jīng)濟(jì)損失,。

霉菌毒素是飼料的主要污染物之一,，目前為止，全*界已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了300多種結(jié)構(gòu)不同的霉菌毒素,，其中已經(jīng)被分離鑒定的有20多種,。主要有：黃曲霉毒素 B1(Aflatoxin，AFB1),，玉米赤霉烯酮(zearalenone,，ZEN)、嘔吐毒素(deoxynivalenol,，DON)等,。 當(dāng)動(dòng)物采食被霉菌毒素污染的日糧后，健康狀況會(huì)受到影響，表現(xiàn)出來的癥狀可能是多種多樣的 ,，比如采食量下降,、生長速度變慢、抗氧化能力降低,，免疫力受到抑制等,，但無一例外， 最終都會(huì)影響到人畜健康和食品安全,， 帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失,。在霉菌毒素管控上，我國《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》和《寵物飼料衛(wèi)生規(guī)定 》對飼料中霉菌毒素的*做出了明確的要求,， 對保障飼料衛(wèi)生安全,、保護(hù)動(dòng)物健康有重要的作用。

二,、現(xiàn)有檢測方法比較

目前霉菌毒素的檢測方法主要分為兩大類:即確認(rèn)方法和快速方法。確認(rèn)方法主要基于理化儀器設(shè)備,，如薄層色譜法(TLC),、氣相色譜法(GC)、高壓液相色譜法(HPLC)和各種聯(lián)用技術(shù)如氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS),、液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS)等;快速方法主要是基于免疫化學(xué)基礎(chǔ)上的免疫分析方法如免疫親合柱-熒光檢測(IAC-FLD),、酶聯(lián)免疫吸附法(ELlSA)和膠體金免疫層析法等。

結(jié)果準(zhǔn)確,、法定認(rèn)可是理化方法最大的優(yōu)點(diǎn),，但是儀器設(shè)備價(jià)格昂貴，前處理過程復(fù)雜,、操作繁瑣,、效率低，成本*,，因此不適用于大規(guī)模樣本的篩查和日常的內(nèi)控檢測,，一般僅用于最終的確證。酶聯(lián)免疫吸附法ELISA 方法和膠體金快速檢測卡是企業(yè)常用的快速檢測方法,，但也均存在各自的優(yōu)缺點(diǎn):ELISA 方法能靈敏度相對較高,，且能定量檢測，但操作過程相對復(fù)雜,，對環(huán)境和人員要求高,，環(huán)境干擾因素復(fù)雜，重復(fù)性較差;膠體金檢測卡可以滿足現(xiàn)場快速的要求,，能在5-10min內(nèi)快速測定,，但是只能定性，且靈敏度較低，肉眼觀察主觀性較強(qiáng),，重復(fù)性差,。

三、飼料及其原料中嘔吐霉素含量快速檢測解決方案介紹

飼料及其原料中嘔吐霉素含量快速檢測解決方案選用CSY-YG701真菌毒素?zé)晒舛繖z測儀（深圳市芬析儀器制造有限公司）,、電子天平,、離心機(jī)、粉粹機(jī) ,、渦旋振蕩器檢測設(shè)備,，該方法操作簡單，結(jié)果準(zhǔn)確,，整體測試時(shí)間15分鐘左右,。【真菌毒素?zé)晒舛繖z測儀←←點(diǎn)擊此處了解產(chǎn)品信息】

1、實(shí)驗(yàn)所需儀器：

1.CSY-YG701真菌毒素?zé)晒舛繖z測儀（深圳市芬析儀器制造有限公司）

2.電子天平

3.離心機(jī)

4.粉粹機(jī)  

5.渦旋振蕩器

6.可調(diào)移液器1000-5000ul 可調(diào)移液器 20-200ul

2,、樣品處理：

1.樣品提取液配置：取一份體積的提取液加九份體積的蒸餾水,，混勻后即為樣品提取液。

2.樣品處理：準(zhǔn)確稱取2.0g粉碎均勻的谷物樣本,，放入50ml離心管或者錐形瓶中,，加入10ml樣品提取液，用旋渦振蕩器震蕩3分鐘混勻,，混勻后即為樣品液,。

3.混勻后，取1.5ml均勻的樣品液在離心管,，并在3500轉(zhuǎn)以上離心5分鐘,。

4.配待測液：取離心液上清液100ul+300ul樣品提取液震蕩5秒混勻。

3,、樣品檢測：

1.取60ul待測液+60ul熒光標(biāo)記物,放入新的離心管中

2.把移液器刻度調(diào)至90ul,，然后在離心管中吸吐3次液體（避免氣泡出現(xiàn)）

3.混勻之后取90ul滴入檢測卡內(nèi)（本步驟應(yīng)該在30s內(nèi)完成），滴入完成之后,，立即將檢測卡放入CSY-YG701真菌毒素?zé)晒舛繖z測儀中的恒溫孵育器內(nèi)孵育8分鐘后進(jìn)行檢測,。

• 飼料嘔吐毒素?zé)晒舛靠焖贆z測儀

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