大鼠卵泡膜原代細(xì)胞

大鼠卵泡膜細(xì)胞分離自卵巢組織,；卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官,，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化）,，呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡,，卵泡呈黃色,，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān),。大多數(shù)脊椎動(dòng)物有兩個(gè)卵巢,，但是部分魚類的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu)，而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能,。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對(duì)卵圓形的生殖器官,，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結(jié)締組織,。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì),。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,，主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成；髓質(zhì)位于中央,，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,，其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng),。哺乳動(dòng)物的卵巢內(nèi)卵泡的發(fā)育需要相關(guān)激素的調(diào)節(jié)才能完成,，垂體（卵泡刺激素和黃體生成素）使原始卵泡開始發(fā)育，其過程中還產(chǎn)生大量的雌激素,。雌激素是卵巢的顆粒細(xì)胞和卵泡膜細(xì)胞在垂體的作用下協(xié)同合成的,，卵泡膜細(xì)胞合成的雄激素透過基膜進(jìn)入顆粒細(xì)胞，并轉(zhuǎn)變?yōu)榇萍に?。因此,，卵泡膜?xì)胞在生殖內(nèi)分泌調(diào)節(jié)中占有關(guān)鍵的位置，了解其在病理及生理中的作用,，對(duì)于與性激素有關(guān)的婦產(chǎn)科疾?。ㄈ缍嗄衣殉簿C合癥、卵巢癌等）的研究有著重要意義,。在哺乳動(dòng)物卵泡生長發(fā)育的過程中,，卵母細(xì)胞由不斷增加的顆粒細(xì)胞層包裹。卵巢組織中的膜細(xì)胞作為卵泡的外層細(xì)胞可以維持卵泡結(jié)構(gòu)的完整性,，參與構(gòu)成卵母細(xì)胞和顆粒細(xì)胞發(fā)育的微環(huán)境且為類固醇激素的生成提供底物,。在哺乳動(dòng)物中調(diào)節(jié)膜細(xì)胞類固醇激素生成的機(jī)制已見相關(guān)報(bào)道，但是有關(guān)卵泡膜細(xì)胞的聚集,、生長和分化的研究尚不深入,。

產(chǎn)品名稱：大鼠卵泡膜細(xì)胞

組織來源：卵巢組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵泡膜采用膠原酶消化法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵泡膜經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

1,、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。

兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA 試劑盒

Human vascular endothelial cell growth factor B (VEGF-B) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)試劑盒

Humanueinsulin,TIELISAKit 人真胰島素(TI)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanErythropoietieceptor,EPOR試劑盒人紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織RSK2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

Humanosteonectin,，ONELISAKit人骨粘連蛋白(ON)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒 ，英文名： Lebtospira ELISA Kit

Human telomerase (TE) ELISA Kit 人端粒酶(TE)試劑盒

Rabbittumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3ELISAKit 兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforbFGF(Rabbitbasicfibroblastgrowthfactor)ELISAKit兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子

細(xì)菌糖酵解IMViC試劑盒20次

rabbitIerferonγ,IFN-γELISAKit兔子γ干擾素(IFN-γ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human TFR2 (ansferrin Receptor 2) ELISA Kit

人游離睪(F-TESTO)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human F-TESTO (Free Testosterone) ELISA Kit

人轉(zhuǎn)移因子(TF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human TF (ansfer Factor) ELISA Kit

人轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TNPO1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human TNPO1 (anspoin 1) ELISA Kit

CD3D重組食蟹猴 CD3d / CD3 delta 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

MMP-2 基質(zhì)金屬蛋白酶-2(多肽抗原 0.5mgMMP-2 基質(zhì)金屬蛋白酶-2(多肽抗原)

CCL8重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽) Protein

ALOX15B Protein Human 重組人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白

BTLA Protein Mouse 重組小鼠 BTLA 蛋白

CHO-AA8細(xì)胞,，轉(zhuǎn)入Tet-off調(diào)控含EGFP基因的CHO細(xì)胞 H9c2(2-1)(大鼠心肌細(xì)胞) 615小鼠前胃癌瘤株;Fc  人纖維環(huán)細(xì)胞HAFC  SP2/0, 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NEI-H209細(xì)胞 ECV304(人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株) 小鼠原代心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 大鼠原代腹膜間皮細(xì)胞

大鼠卵泡膜原代細(xì)胞凋亡相關(guān)因子(FAS)重組蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis (FAS)

IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白

AIMP1重組小鼠 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 Protein

LTBR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 LTBR / TNFRSF3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

KCNIP3重組人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白 Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。