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EG24512S LightNing® BbsI內(nèi)切酶

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

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蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2008年,,位于蘇州園區(qū)生物納米園(BiobayA5301室。公司管理團(tuán)隊(duì)專注于科學(xué)儀器行業(yè)十三年,,擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)與完善的售后服務(wù)體系,,目前已為300余家實(shí)驗(yàn)室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù),涵蓋各大高校,、醫(yī)療機(jī)構(gòu),、檢測(cè)中心、科研機(jī)構(gòu),、制藥企業(yè)等13個(gè)群體,。代理的實(shí)驗(yàn)室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱,PCR儀,,移液器,,生物反應(yīng)器,發(fā)酵罐,,移液器,,超低溫冰箱,醫(yī)用冰箱,,液氮罐,,高壓滅菌器,超純水機(jī),,天平,,離心機(jī)等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器,、朗基,、中科美菱,梅特勒,,樂楓,,搏旅、NEST、天根,、奧盛在內(nèi)等多家等,。在提供產(chǎn)品的同時(shí)也為您提供生物實(shí)驗(yàn)室常用的耗材試劑,以及實(shí)驗(yàn)室整體搬遷,、第三方檢測(cè),、計(jì)量與校準(zhǔn),二手儀器調(diào)劑等服務(wù),。完整的實(shí)驗(yàn)室一站式體驗(yàn)使您的選擇更加方便,、快捷、靈活,。

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供貨周期 兩周 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥

LightNing® BbsI內(nèi)切酶組成

 

組分

規(guī)格

LightNing® BbsI

25 μl

10× CutOne® Buffer

1 ml

10× CutOne® Color Buffer

1 ml

 


特性和用法

LightNing® BbsI內(nèi)切酶,,可在5~15 min內(nèi)完成反應(yīng)


u建議反應(yīng)條件

1× CutOne®緩沖液,;

37℃溫育;

參照DNA 快速酶切流程”配制反應(yīng)體系,。

u失活條件

80℃溫育20 min

u甲基化敏感性

對(duì) Dam 甲基化不敏感,、對(duì) Dcm 甲基化不敏感、對(duì) CpG 甲基化不敏感。

u存儲(chǔ)條件

-20

 

相關(guān)問答

Q:為什么在CutOne® Buffer中加入HSA,?

A:一些酶在反應(yīng)過程中需要HSA的參與,,我們?cè)?/span>CutOne® Buffer中添加了HSA,避免反應(yīng)中額外添加組分,,使得酶切反應(yīng)更加便捷,。

 

Q:HSA的添加對(duì)于雷霆系列限制性內(nèi)切酶的功能會(huì)產(chǎn)生什么樣的影響,?

A:在我們的測(cè)試中未曾發(fā)現(xiàn)HSA對(duì)于雷霆系列限制性內(nèi)切酶的功能有任何影響,。在有些情況下,對(duì)于部分的酶切反應(yīng)有促進(jìn)作用,。

 

Q:我需要嚴(yán)格遵守5~15 min的酶切時(shí)間嗎,?能夠延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間嗎?

A:雷霆系列限制性內(nèi)切酶經(jīng)過改造可以將酶切時(shí)間縮短至5~15 min,。同樣也消除了限制性內(nèi)切酶的星活性(長(zhǎng)時(shí)間反應(yīng)造成的非特異性消化),,在說明書中告知的星活性出現(xiàn)的時(shí)間范圍內(nèi)可以適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間。

 

Q:我什么時(shí)候應(yīng)當(dāng)考慮星活性對(duì)于酶切反應(yīng)的影響,?

A:如果額外的酶切條帶對(duì)于實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生影響時(shí)我們應(yīng)當(dāng)考慮星活性對(duì)于酶切反應(yīng)的影響,。例如:進(jìn)行基因型、突變型分析或克隆時(shí)我們應(yīng)當(dāng)避免星活性的產(chǎn)生,。避免星活性的有效方法:適當(dāng)擴(kuò)大反應(yīng)體積(較小的反應(yīng)體積容易造成甘油體積達(dá)到或超過總反應(yīng)體積的5%),;不進(jìn)行超長(zhǎng)時(shí)間孵育(過夜消化極易產(chǎn)生星活性)。

 

Q:有哪些關(guān)鍵因素會(huì)導(dǎo)致星活性,?

A:長(zhǎng)時(shí)間孵育,、過量的酶、高甘油含量(通常高于5%),、較小的反應(yīng)體系等因素都會(huì)導(dǎo)致星活性的產(chǎn)生,。

 

 

Q:未經(jīng)純化的PCR產(chǎn)物直接酶切要怎樣設(shè)定體系?

A:反應(yīng)體系推薦由這些內(nèi)容組成:10 μl PCR產(chǎn)物,、2 μl 10×CutOneTM Buffer,、1~2 μl相應(yīng)的限制性內(nèi)切酶、ddH2O補(bǔ)齊到30 μl,。酶的用量根據(jù)PCR產(chǎn)物的濃度而定,,只加入2 μl反應(yīng)緩沖液的原因是PCR反應(yīng)中存在對(duì)應(yīng)的鹽離子和金屬離子,適當(dāng)減少反應(yīng)緩沖液的用量以保證最終反應(yīng)體系中的環(huán)境適宜限制性內(nèi)切酶發(fā)揮功能,。

 

Q:限制性內(nèi)切酶簡(jiǎn)并性識(shí)別位點(diǎn)一定是回文的嗎,?

A:大多數(shù)二型限制性內(nèi)切酶的識(shí)別序列是回文的,而且是特定的堿基序列,。然而有些限制性內(nèi)切酶具有簡(jiǎn)并性識(shí)別位點(diǎn),,也就是說識(shí)別位點(diǎn)中有一個(gè)或以上的堿基對(duì)是非特異的(例如:BsrfI識(shí)別5RCCGGY, R=A/G, Y=C/T)。對(duì)于這樣的具有簡(jiǎn)并性識(shí)別位點(diǎn)的限制性內(nèi)切酶,只要是符合要求的序列皆能被識(shí)別并且被正確地切割(例如5ACCGGC, 5ACCGGT, 5GCCGGC, 5GCCGGT,,其中兩個(gè)并不是回文的,,仍然能被BsrFI識(shí)別并且切割)。




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