EG15508S LightNing® AscI內(nèi)切酶
- 公司名稱 蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) EG15508S
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2025/4/11 11:39:50
- 訪問(wèn)次數(shù) 51
快速限制性內(nèi)切酶?DNA修復(fù)與重組?基因克隆與載體構(gòu)建PCR產(chǎn)物酶切驗(yàn)證
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蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2008年，位于蘇州園區(qū)生物納米園（Biobay）A5幢301室,。公司管理團(tuán)隊(duì)專注于科學(xué)儀器行業(yè)十三年,，擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)與完善的售后服務(wù)體系，目前已為300余家實(shí)驗(yàn)室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù),，涵蓋各大高校,、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、檢測(cè)中心,、科研機(jī)構(gòu)、制藥企業(yè)等13個(gè)群體,。代理的實(shí)驗(yàn)室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱,，PCR儀，移液器,，生物反應(yīng)器,，發(fā)酵罐，移液器,，超低溫冰箱,，醫(yī)用冰箱，液氮罐,，高壓滅菌器,，超純水機(jī)，天平,，離心機(jī)等,。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器,、朗基、中科美菱,，梅特勒,，樂(lè)楓，搏旅,、NEST,、天根、奧盛在內(nèi)等多家等,。在提供產(chǎn)品的同時(shí)也為您提供生物實(shí)驗(yàn)室常用的耗材試劑,，以及實(shí)驗(yàn)室整體搬遷、第三方檢測(cè),、計(jì)量與校準(zhǔn),，二手儀器調(diào)劑等服務(wù)。完整的實(shí)驗(yàn)室一站式體驗(yàn)使您的選擇更加方便,、快捷,、靈活。
阿爾法性價(jià)比：一級(jí)代理,；一手貨源,；進(jìn)口品質(zhì)，國(guó)產(chǎn)價(jià)格,；
阿爾法交貨期：自有倉(cāng)庫(kù),，標(biāo)準(zhǔn)品有庫(kù)存，常規(guī)試劑耗材備有現(xiàn)貨,；
阿爾法服務(wù)項(xiàng)目：實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)場(chǎng)規(guī)劃,，提供選型建議，合理化配置,；
阿爾法售后服務(wù)：及時(shí)響應(yīng),，2小時(shí)給出解決方案，12小時(shí)內(nèi)響應(yīng)服務(wù),。品牌物流廠商直供,，門對(duì)門服務(wù)。
阿爾法增值服務(wù)：免費(fèi)供樣機(jī)體驗(yàn),，免費(fèi)提供樣品試用,，免費(fèi)安裝指導(dǎo)，免費(fèi)技術(shù)指導(dǎo)
阿爾法質(zhì)保期：終身質(zhì)保,，免費(fèi)更換配件
阿爾法生物,，助力生命科學(xué)研究！讓你的實(shí)驗(yàn),，順利進(jìn)行沒(méi)有后顧之憂,！
實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,儀器,生物反應(yīng)器,發(fā)酵罐,不銹鋼生物反應(yīng)器,實(shí)驗(yàn)耗材,純水機(jī),離心機(jī),顯微鏡,電子天平
| 產(chǎn)地類別 | 國(guó)產(chǎn) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
|---|
LightNing® AscI內(nèi)切酶組成
組分 | 規(guī)格 |
LightNing® AscI | 50 μl |
10× CutOne® Buffer | 1 ml |
10× CutOne® Color Buffer | 1 ml |
特性和用法
LightNing® AscI內(nèi)切酶,，可在5~15 min內(nèi)完成反應(yīng)
u建議反應(yīng)條件
1× CutOne®緩沖液；
37℃溫育,；
參照“DNA 快速酶切流程”配制反應(yīng)體系,。
u失活條件
80℃溫育20 min。
u甲基化敏感性
對(duì)于被 CpG 甲基化的 DNA,，剪切可能受阻,。
u存儲(chǔ)條件
-20℃
相關(guān)問(wèn)答
Q:為什么在CutOne® Buffer中加入HSA？
A:一些酶在反應(yīng)過(guò)程中需要HSA的參與,，我們?cè)?/span>CutOne® Buffer中添加了HSA,，避免反應(yīng)中額外添加組分，使得酶切反應(yīng)更加便捷,。
Q:HSA的添加對(duì)于雷霆系列限制性內(nèi)切酶的功能會(huì)產(chǎn)生什么樣的影響,？
A:在我們的測(cè)試中未曾發(fā)現(xiàn)HSA對(duì)于雷霆系列限制性內(nèi)切酶的功能有任何影響。在有些情況下,，對(duì)于部分的酶切反應(yīng)有促進(jìn)作用,。
Q:我需要嚴(yán)格遵守5~15 min的酶切時(shí)間嗎？能夠延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間嗎,？
A:雷霆系列限制性內(nèi)切酶經(jīng)過(guò)改造可以將酶切時(shí)間縮短至5~15 min,。同樣也消除了限制性內(nèi)切酶的星活性（長(zhǎng)時(shí)間反應(yīng)造成的非特異性消化），在說(shuō)明書中告知的星活性出現(xiàn)的時(shí)間范圍內(nèi)可以適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,。
Q:我什么時(shí)候應(yīng)當(dāng)考慮星活性對(duì)于酶切反應(yīng)的影響,？
A:如果額外的酶切條帶對(duì)于實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生影響時(shí)我們應(yīng)當(dāng)考慮星活性對(duì)于酶切反應(yīng)的影響。例如：進(jìn)行基因型,、突變型分析或克隆時(shí)我們應(yīng)當(dāng)避免星活性的產(chǎn)生,。避免星活性的有效方法：適當(dāng)擴(kuò)大反應(yīng)體積（較小的反應(yīng)體積容易造成甘油體積達(dá)到或超過(guò)總反應(yīng)體積的5%）；不進(jìn)行超長(zhǎng)時(shí)間孵育（過(guò)夜消化極易產(chǎn)生星活性）,。
Q:有哪些關(guān)鍵因素會(huì)導(dǎo)致星活性,？
A:長(zhǎng)時(shí)間孵育、過(guò)量的酶,、高甘油含量（通常高于5%）、較小的反應(yīng)體系等因素都會(huì)導(dǎo)致星活性的產(chǎn)生,。
Q:未經(jīng)純化的PCR產(chǎn)物直接酶切要怎樣設(shè)定體系,？
A:反應(yīng)體系推薦由這些內(nèi)容組成：10 μl PCR產(chǎn)物、2 μl 10×CutOneTM Buffer,、1~2 μl相應(yīng)的限制性內(nèi)切酶,、ddH2O補(bǔ)齊到30 μl。酶的用量根據(jù)PCR產(chǎn)物的濃度而定,，只加入2 μl反應(yīng)緩沖液的原因是PCR反應(yīng)中存在對(duì)應(yīng)的鹽離子和金屬離子,，適當(dāng)減少反應(yīng)緩沖液的用量以保證最終反應(yīng)體系中的環(huán)境適宜限制性內(nèi)切酶發(fā)揮功能,。
Q:限制性內(nèi)切酶簡(jiǎn)并性識(shí)別位點(diǎn)一定是回文的嗎？
A:大多數(shù)二型限制性內(nèi)切酶的識(shí)別序列是回文的,，而且是特定的堿基序列,。然而有些限制性內(nèi)切酶具有簡(jiǎn)并性識(shí)別位點(diǎn)，也就是說(shuō)識(shí)別位點(diǎn)中有一個(gè)或以上的堿基對(duì)是非特異的（例如：BsrfI識(shí)別5’RCCGGY, R=A/G, Y=C/T）,。對(duì)于這樣的具有簡(jiǎn)并性識(shí)別位點(diǎn)的限制性內(nèi)切酶,，只要是符合要求的序列皆能被識(shí)別并且被正確地切割（例如5’ ACCGGC, 5’ ACCGGT, 5’ GCCGGC, 和5’ GCCGGT，其中兩個(gè)并不是回文的,，仍然能被BsrFI識(shí)別并且切割）,。
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