豬瘟病毒抗體ELISA檢測試劑盒
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 公司名稱 安諾倫（北京）生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2025/2/8 13:38:56
- 訪問次數(shù) 17
產(chǎn)品標簽
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 96T/盒 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | AK00004 | 應用領域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
一,、簡介
試劑盒用于直接檢測豬血清和血漿中豬瘟病毒抗體，評估豬瘟疫苗免疫狀況,，感染豬的血清學診斷,，是一種快速、
簡單,、特異的檢測方法,。
二、實驗原理
豬瘟病毒抗體阻斷 ELISA 是將重組 E2 糖蛋白包被在酶標板上,，加入樣品后,，樣品中如果存在抗 E2 糖蛋白的抗體，
在加入辣根過氧化物酶標記的抗 E2 糖蛋白抗體以及顯色底物后,，因抗體阻斷了抗 E2 糖蛋白抗體的結(jié)合,，所以導致顏色
將不會加深。顏色的深淺與血清樣品中的抗 E2 糖蛋白特異抗體的量呈負相關,。樣品的 OD 值同陽性對照以及陰性對照
比較后可得出血清樣品的阻斷率,。
三、試劑盒內(nèi)容
四,、自備材料
微量移液器(0.5-10uL,、2-20uL、20-200uL、200-1000uL),、一次性移液器吸頭,、試管、蒸餾水或去離子水,，酶標儀,，手
動或自動洗滌設備。
五,、實驗準備
1. 試劑盒各個組分在使用前均須恢復至室溫（21℃±5℃）,，試劑應輕輕旋轉(zhuǎn)或振蕩均勻。
2. 用去離子水將濃縮洗滌液(10X),、濃縮稀釋液(10X),，進行 10 倍稀釋。
3. 取出包被的微量酶標板,，并做好陰,、陽性對照品和樣品的加樣位置的標記,。
4. 準備動物全血,，按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮,，無溶血,。
六、實驗過程
1.取準備好的血清按照以下方式進行加樣,。
? 50 uL 陰性對照（NC）加入孔 A1 和 B1,。
? 50 uL 陽性對照（PC）加入孔 C1 和 D1。
? 50 uL 待測樣本加入剩余其他孔,。
2.輕輕振勻孔中樣品(注意勿溢出),，貼上封板膜，室溫（21℃±5℃）下孵育 2 h,。
3.小心揭掉封板膜,，棄去孔中液體，300uL 洗滌液清洗 2 次,。每一次洗滌后,，棄去孔中液體，最后一次清洗完
后,，在吸干材料上用力拍干孔內(nèi)液體,。在每一次洗滌和加入下一個試劑之前，避免孔壁變干,，影響實驗結(jié)果,。
4.濃縮酶標記抗體（10X）用稀釋緩沖液（1X）進行 10 稀釋（1 份濃縮液+9 份稀釋緩沖液），吸取 100 uL 稀
釋好的酶標抗體，加入孔中,。
5.室溫(21℃±5℃)下孵育 30 min,，倒掉孔中液體，300 uL 洗滌液清洗 3 次,。
6.將底物 A 與底物 B 按照體積比例 1:1 混合,，輕輕旋轉(zhuǎn)或振蕩均勻后吸取 100 uL 配置好的底物溶液，加入孔
中,，避光孵育 20 min,。(底物溶液需現(xiàn)配現(xiàn)用)
7.吸取 50 uL 終止液加入孔中，終止反應,。
8.酶標儀檢測條件設置成波長 450nm 進行讀數(shù),。
七、實驗有效性判斷
在下列情況下,，即可判斷實驗有效：
?陰性對照平均 OD 大于 0.7 ODNC>0.7
?陽性對照平均 OD 小于陰性對照平均 OD 的 30% ODPC/ODNC<0.3
八,、實驗結(jié)果判定
對每個樣品，進行阻斷率的計算：
九,、注意事項
1.試劑盒各組分使用前,，應平衡至室溫，使用后放回各自保存溫度進行保存,。
2.試劑盒開封后應盡快使用,，-20℃保存樣品應避免進行反復凍融。
3.吸取液體時,，應盡量準確,，防止產(chǎn)生氣泡。
4.應嚴格按照各操作步驟規(guī)定的時間和溫度進行操作,。
5.終止液可導致嚴重燒傷,。若接觸皮膚或眼睛，請立即用大量清水沖洗并就醫(yī),。
6.底物避免接觸光照和任何氧化劑
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