磁珠質(zhì)粒提取試劑盒
- 公司名稱 安諾倫（北京）生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2023/12/28 16:15:35
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
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使用步驟
1、取 5-10 mL 過夜培養(yǎng)菌液加入離心管中,，12000 rpm 離心 2 min 收集菌體沉淀,，盡量吸棄上清。
2,、向留有菌體沉淀的離心管中加入 250 uL Buffer PI (已加入 RNase A),，使用移液槍或渦旋振蕩器充分混勻，懸浮菌體沉淀,，確保無菌塊,。37C靜置 15 min，以除去 RNA,。
3,、向離心管中加入 250 L Buffer P2，溫和上下顛倒混勻 4-6 次,，充分混勻使菌體裂解,，此時溶液應(yīng)變得清亮粘稠。
注意:溫和地混勻,，不要劇烈震蕩,，以免打斷基因組 DNA,。所用時間不應(yīng)超過 5 min，以免質(zhì)粒受到破壞,。
4,、向離心管中加入 350 L Buffer P3，立即溫和上下顛倒混勻 8-10 次,，充分混勻,，此時應(yīng)出現(xiàn)白色絮狀沉淀，12000 rpm 離心 10 min,。注意:P3 加入后立即混合,，避免產(chǎn)生局部沉淀。如果離心完仍有沉淀漂浮,，可延長離心時間取上清,。
5、將步驟 4 中的上清液轉(zhuǎn)移到新的 2 mL 滅菌離心管中,，加入等體積異丙醇,，混勻，加入50 uL 輕基磁珠,，顛倒混勻 1 min,，室溫放置 2 min。
6,、將步驟 5 中的離心管放在磁力架上靜置,，磁珠吸附后，小心吸去液體,。
7,、將離心管從將離心管從磁力架上取下，加入 600 L Buffer Pw (請確認(rèn)是否加入無水Z醇),，混勻 2 min,。
注意:加入漂洗液 PW 后，室溫靜置 2 min,，有助于更好的去除雜質(zhì),。
8、將離心管放置于磁力架上靜置,，磁珠吸附后,，小心吸去液體。
9,、將離心管從磁力架上取下,，加入 600 uL Bufer PW，混勻2 min,。
10,、將離心管放置于磁力架上靜置,，磁珠吸附后，棄廢液,，吸盡管底管蓋的液體,。
11、將離心管置于磁力架上,，室溫晾干 15 min,。注意:乙醇?xì)埩魰种坪罄m(xù)的酶反應(yīng)，所以晾于時要確保乙醇揮發(fā)干凈,。但也不要干燥太長時間,，以免難以洗脫質(zhì)粒 DNA。
12,、將離心管從磁力架上取下,，加入 100-200 L 洗脫緩沖液 TB 或 ddHO (洗脫液可在水浴鍋中預(yù)熱)，振蕩混勻,，置于 56C水浴鍋中,，孵育 10 min，期間每隔2 min 顛倒混勻,。
13,、將離心管放置于磁力架上，磁珠吸附后,，小心將質(zhì)粒 DNA 溶液轉(zhuǎn)移至一個新離心管中，并于-20C保存,。
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