產(chǎn)品描述

蘇木素染色液綜合了多種經(jīng)典的方法配制而成。該溶液無(wú)汞,，可用于免疫組化復(fù)染和H＆E染色,。

訂購(gòu)信息

運(yùn)輸與保存

常溫運(yùn)輸。常溫避光保存,，有效期12個(gè)月,。

使用方法

1.     試劑準(zhǔn)備

酸酒精：在100mL 70%乙醇中加入1mL 鹽酸，室溫保存,。注：冰凍切片后,，各種步驟（干燥，乙醇或甲醇固定,，熱固定,，使用帶電的或有粘性的蓋片）保證組織切片在染色過(guò)程中不脫落。

2.     95%乙醇：在HE染色開(kāi)始前,，組織切片需要固定并水化,。將切片置于95%乙醇中約2min，開(kāi)始水化并固定組織,。注：跳過(guò)使用95%乙醇對(duì)組織進(jìn)行水化和固定,，并不影響形態(tài)學(xué)上的細(xì)節(jié)。

3.     水化：進(jìn)一步對(duì)組織切片進(jìn)行水化3-5min,，并沖掉前一步殘留的乙醇,。

4.     蘇木素：水化后，組織切片用蘇木素染色1-3min,，可根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整染色時(shí)間,。蘇木素是一種基本染料，可以對(duì)細(xì)胞的酸性成分進(jìn)行染色,，包括核酸,、粘多糖,、酸性糖蛋白，將他們?nèi)境伤{(lán)色或藍(lán)紫色,。注：沒(méi)有蘇木素,，伊紅會(huì)將組織染成亮粉紅色；顯而易見(jiàn)的是缺乏細(xì)胞核,。組織結(jié)構(gòu)很難區(qū)分,，細(xì)胞內(nèi)成分幾乎都不存在，難以辨別,。針對(duì)上述問(wèn)題,，可以使用蘇木素進(jìn)行復(fù)染。

(1)  染色較弱是由于：自身溶解或者固定不好,；過(guò)度脫鈣；染色時(shí)間不足,；過(guò)度脫色（酸與醇的比例過(guò)高或者酸乙醇脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)）,；蘇木素的作用較弱（蘇木素氧化過(guò)度（過(guò)老）或水稀釋過(guò)度）；漂洗溶液的污染,；切片過(guò)?。灰掖嫉娜コ蛘呷旧八钠床怀浞?。

(2)  染色過(guò)度是由于：組織切片干燥,；蘇木素濃度過(guò)高；染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng),；載玻片粘合劑過(guò)多,；脫色過(guò)弱或時(shí)間不足；切片過(guò)厚,；熱暴露的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),。

5.     水洗：蘇木素染色后，用水洗組織是非常重要的,。這一步以及隨后的水洗,，可將多余的染料，媒染劑等去除,。適當(dāng)?shù)钠纯梢匀コ砻娼饘俟鉂?，金屬光澤可阻止蘇木素的染色。注：跳過(guò)此步,，將產(chǎn)生不好的結(jié)果,，例如沉淀的形成，染液的稀釋?zhuān)砻娼饘俟鉂傻拇嬖凇?/span>

6.     酸酒精：酸酒精分色劑3-5s,。在蘇木素染色方法中,，組織切片有意過(guò)度染色,，酸酒精將去除多余的染料以及玻片上的背景染色。

注：若省略此步驟,，切片將呈暗紫色,，嗜酸性結(jié)構(gòu)（如膠原）不會(huì)顯現(xiàn)出明亮的粉紅色，導(dǎo)致組織結(jié)構(gòu)之間難以區(qū)分,，從而影響對(duì)切片的準(zhǔn)確判斷,。另外，分色過(guò)度可能是由于：酸濃度過(guò)高,；脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等,。分色不足是由于：酸濃度過(guò)低；脫色時(shí)間不足,；在切片上有多余的蛋白或者明膠等,。

7.     水洗：水洗30s，終止酸酒精反應(yīng),，進(jìn)一步阻止酸酒精從組織切片上將大量蘇木素去除,。注：如果切片沒(méi)有經(jīng)過(guò)漂洗，酸酒精可以過(guò)度脫色,。如果不去除脫色劑,，酸酒精將持續(xù)從組織切片上去除蘇木素。

8.     自來(lái)水沖洗或用藍(lán)化液藍(lán)化：自來(lái)水沖洗3-5min,，可起到發(fā)藍(lán)處理,，將紫紅色的蘇木素轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)紫色。通常,，發(fā)藍(lán)試劑是pH依賴(lài)性的,，由堿性溶液構(gòu)成。因此,，如果自來(lái)水作為發(fā)藍(lán)試劑,，pH值的每天監(jiān)控是非常重要的，因?yàn)樽詠?lái)水的pH值可能每天都會(huì)波動(dòng),?；蛴盟{(lán)化液藍(lán)化，30s-1min,；流動(dòng)的自來(lái)水沖洗5min,；注：跳過(guò)發(fā)藍(lán)試劑步驟，將會(huì)導(dǎo)致蘇木素染液的顏色發(fā)生微妙的變化,，難以區(qū)分,。代替深藍(lán)色，細(xì)胞核將呈現(xiàn)紫色，有時(shí)甚至是紅色,。細(xì)胞核不可過(guò)度藍(lán)染,。如果組織染色過(guò)藍(lán)，一般是在組織切片上蘇木素過(guò)多所致,。

9.     水洗：為伊紅復(fù)染做準(zhǔn)備,，通過(guò)水洗30sec，將多余的發(fā)藍(lán)試劑去除,。因?yàn)樵趬A性環(huán)境下,，伊紅無(wú)法染色，水洗去除發(fā)藍(lán)試劑將允許伊紅保持其酸性pH值,，使伊紅得以均勻復(fù)染,。注：發(fā)藍(lán)試劑之后，如果沒(méi)有水洗,，組織切片無(wú)法正確使用伊紅染色,。因此，酸性結(jié)構(gòu)將被染為蒼白色并且不均勻,，進(jìn)而導(dǎo)致錯(cuò)誤的判斷,。

10.   伊紅：為了正確區(qū)分胞內(nèi)結(jié)構(gòu)，伊紅是出色的蘇木素復(fù)染劑,。伊紅復(fù)染30-60s，可根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整染色時(shí)間,。伊紅是酸性染料,，可染細(xì)胞質(zhì)，尤其是線(xiàn)粒體,、分泌顆粒和膠原,。它可以區(qū)分細(xì)胞內(nèi)不同的細(xì)胞器以及不同的結(jié)締組織。注：使用伊紅復(fù)染組織切片的失敗,，將導(dǎo)致組織切片的低分化,。

(1)  染色較弱是由于：組織切片過(guò)薄,；染色時(shí)間不足,；隨后95%酒精分化過(guò)度。

(2)  染色過(guò)度是由于：染液濃度較高（可能是由于過(guò)度蒸發(fā)）,；組織切片過(guò)厚,；染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；隨后95%酒精分化不足,。

(3)  伊紅染色未分化（一種顏色）是由于：固定不*底,；過(guò)度染色（染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或染液濃度過(guò)高）。

11.   95%乙醇：95%乙醇處理2s-1min，根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整,；伊紅分化將產(chǎn)生不同的粉色,。注：如果95%乙醇被稀釋?zhuān)ɡ纾瑥那耙徊饺旧袛y帶了伊紅）,，分化的效果較差,。

12.   100%乙醇：通過(guò)100%乙醇使組織切片脫色。100%乙醇處理1min,；再用新的100%乙醇處理1min,。注：這一步很難引起注意，若無(wú)95%乙醇,，難以區(qū)分酸性結(jié)構(gòu),，組織切片成為粉色。若無(wú)100%乙醇脫水,，組織切片不能脫水,，導(dǎo)致在蓋片下形成水珠。這些水珠可與下一步的二甲苯結(jié)合而形成白色混濁物,，這將影響組織切片的質(zhì)量,。

13.   二甲苯：二甲苯處理5min。在充分脫水后,，二甲苯可將組織切片上的酒精去除,。去除酒精后，在載玻片上加蓋玻片時(shí),，二甲苯也可作為包埋劑確?？扇芙狻Ｓ捎谟袧撛诘亩拘?，二甲苯替代品,，例如檸檬烯、環(huán)烷烴也可使用,。替代品可提供相同的組織染色質(zhì)量,，并且他們使用更安全，操作更簡(jiǎn)單,。注：當(dāng)跳過(guò)此步驟時(shí),，不使用二甲苯透明，酒精將會(huì)保存于組織切片上,，導(dǎo)致伊紅從切片上流出,。

14.   封片：中性樹(shù)膠封片，自然風(fēng)干或烤干,，顯微鏡觀(guān)察,。

染色結(jié)果：細(xì)胞核染為藍(lán)色,；細(xì)胞質(zhì)染為紅色。

注意事項(xiàng)

1． 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,，不得用于臨床診斷,、治療等領(lǐng)域。

2． 為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

3． 試劑應(yīng)保存于陰涼、干燥,、通風(fēng)良好的環(huán)境中,。

4． 本產(chǎn)品可與伊紅染色液（貨號(hào)：AS11L031）配合使用。

5． 第一次使用本產(chǎn)品時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn),。

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伊紅染色液（貨號(hào)：AS11L031）

本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域,。