慢病毒包裝試劑盒 Lentiviral Packaging Kit

產(chǎn)品介紹

    慢病毒經(jīng)濃縮后,，可以高效地將基因穩(wěn)定地整合到宿主基因組中,，特別適合用于難以通過常規(guī)方法轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，如神經(jīng)細(xì)胞,、干細(xì)胞和免疫細(xì)胞如原代T細(xì)胞等,。IPHASE 慢病毒包裝試劑盒提供了慢病毒包裝所需用到的所有試劑，包含了慢病毒包裝質(zhì)?；旌衔風(fēng)entivirus Packaging Plasmid Mix,、轉(zhuǎn)染試劑Transfect Reagent、對(duì)照質(zhì)粒eGFP Plasmid （AMP+）和慢病毒濃縮液Lentivirus Titer-enhanced Solution,，省去了試驗(yàn)前準(zhǔn)備的繁瑣過程,，可直接使用，通過使用配套的濃縮液可以有效提高病毒滴度,，提高慢病毒轉(zhuǎn)染便利性,。試劑盒中各組成成分經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確,、可靠,、重現(xiàn)性好,。

產(chǎn)品詳情

中文名稱：慢病毒包裝試劑盒 Lentiviral Packaging Kit

英文名稱：Lentiviral Packaging Kit

規(guī)格：10 Test

保質(zhì)期：1年

保存條件：A盒——-15~-25℃，B盒——2~8℃

產(chǎn)品關(guān)鍵詞：慢病毒,、慢病毒包裝,、慢病毒濃縮液、細(xì)胞轉(zhuǎn)染

產(chǎn)品組分：

使用方法

    提前制備轉(zhuǎn)染所需的293T細(xì)胞,，使用Transfect Reagent把包裝質(zhì)粒,、包膜質(zhì)粒和目標(biāo)DNA eGFP 質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染進(jìn)293T細(xì)胞，細(xì)胞轉(zhuǎn)染6h后把培養(yǎng)基更換為完-全培養(yǎng)基,，培養(yǎng)48h-72h,，收集富含慢病毒顆粒的細(xì)胞上清液，并使用lentivirus titer-enhanced solution對(duì)收集的上清液濃縮后得到高滴度的慢病毒濃縮液,，可在293T細(xì)胞或者慢病毒滴度試劑盒中測(cè)定病毒滴度,。在一定滴度范圍內(nèi)的慢病毒顆粒可以滿足大部分體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)需求,。

1 細(xì)胞準(zhǔn)備

1）將處于對(duì)數(shù)增長期的293T細(xì)胞按照6million/皿的兩傳代到100mm培養(yǎng)皿中,，置于5%的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞融合率達(dá)到80%左右時(shí)準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染,。

2）轉(zhuǎn)染前1~2 h按照12mL/皿的量為需要轉(zhuǎn)染的細(xì)胞更換新鮮的DMEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基,。

注：293T細(xì)胞貼壁性不好，更換培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)盡量避免沖起293T細(xì)胞,。

2   轉(zhuǎn)染

1）  請(qǐng)于冰浴條件下解凍Lenti Packaging Plasmid Mix和eGFP Plasmid,，并混合均勻。

注：Lenti Packaging Plasmid Mix和eGFP Plasmid需在-20℃冷凍保存,，切勿反復(fù)凍融,，若一次用不完，可于第一次化凍后按照需求量分裝并凍存,。

2）準(zhǔn)備兩個(gè)1.5ml無菌離心管，分別標(biāo)記為管A和管B,，按照以下表格進(jìn)行體系配制：

3）混合均勻,，并于室溫條件下平衡5min，備用,。

4）將管A和管B的溶液合并,，混合均勻后于室溫放置 18~20min 。

5）將混合液均勻滴加到預(yù)處理好的293T細(xì)胞培養(yǎng)皿中,，放置在 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

6）轉(zhuǎn)染6h~8h后，小心吸掉細(xì)胞培養(yǎng)液棄于盛有消毒液的廢液杯中,，然后加15mL完-全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。

注：此時(shí)培養(yǎng)基與所用的移液槍頭等都已含有少量的病毒,，必須經(jīng)消毒液浸泡處理后才能丟棄。

3 收集與濃縮

1）換液48h~72h后,，轉(zhuǎn)移細(xì)胞上清液至50mL離心管,，4℃，500g離心5min,。

2）  收集離心后上清液,，使用0.45μm濾器過濾后至新的離心管中。

3）按1：3比例加入Lentivirus Titer-enhanced Solution進(jìn)離心后的上清液,，2℃~8℃冰箱放置過夜,。

4）4℃，1500g 離心 60min,，棄上清,。

5）加入原1/10或1/100的DMEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基，建議使用轉(zhuǎn)染目標(biāo)細(xì)胞培養(yǎng)基重懸,，于-60℃~-90℃冰箱保存,。

IPHASE其他產(chǎn)品

ADME產(chǎn)品

原代肝細(xì)胞 Hepatocytes :人、猴,、犬,、大鼠、小鼠,、豬等（貼壁/懸?。?/span>

肝微粒體 Liver Microsomes ：人、猴,、犬,、大鼠、小鼠,、豬,、兔、貓,、羊,、牛、雞,、鴨等

腸微粒體  Intestinal Microsomes ：人,、猴、犬,、大鼠,、小鼠、豬等

肺微粒體 Lung  Microsomes ：人,、猴,、犬,、大鼠、小鼠

腎微粒體  Kidney Microsomes ：人,、猴,、犬、大鼠,、小鼠

皮膚微粒體 Skin Microsomes ：人,、猴、犬,、大鼠,、小鼠

S9 Fraction ：肝、腸,、肺,、腎、皮膚（人,、猴,、犬、大鼠,、小鼠等）

胞質(zhì)液/Cytosol ：肝,、腸、肺,、腎,、皮膚（人、猴,、犬,、大鼠、小鼠等）

SLC轉(zhuǎn)運(yùn)體：OATP1B1,、OATP1B3,、OAT1、OAT3,、OCT2,、MATE1、MATE2-K等

ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體：MDR1（P-gp）,、BCRP、BSEP,、MRP1,、MRP2、MRP3,、MRP4等

血漿蛋白結(jié)合試驗(yàn)專用血漿 PPB Plasma ：人,、猴,、犬、大鼠,、小鼠

血漿穩(wěn)定性試驗(yàn)專用血漿 Stability Plasma ：人,、猴、犬,、大鼠,、小鼠

遺傳毒性產(chǎn)品

Ames試劑盒

TK基因突變?cè)噭┖?/span>

染色體畸變?cè)噭┖?/span>

體外微核試驗(yàn)試劑盒

彗星試驗(yàn)試劑盒

誘導(dǎo)SD大鼠肝S9

誘導(dǎo)金黃地鼠肝S9

CGT產(chǎn)品

PBMC、CBMC,、SMC等

CD3+T細(xì)胞,、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞,、CD19+B細(xì)胞,、CD14+單核細(xì)胞、CD56+NK細(xì)胞

CD3+T細(xì)胞陽選/適配體無痕分選試劑盒

CD4+T細(xì)胞陽選/適配體無痕分選試劑盒

CD8+T細(xì)胞陽選/適配體無痕分選試劑盒

CD19+B細(xì)胞陽選/適配體無痕分選試劑盒

CD14+單核細(xì)胞陽選/適配體無痕分選試劑盒

CD56+NK細(xì)胞陽選/適配體無痕分選試劑盒

匯智和源從匯智泰康獨(dú)立而來,，“IPHASE”為核心產(chǎn)品品牌,，公司致力于為創(chuàng)新藥研發(fā)企業(yè)及生命科學(xué)研究機(jī)構(gòu)提供高品質(zhì)的試劑產(chǎn)品，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”,。