Cryo-SFI無血清細(xì)胞凍存液

產(chǎn)品特色

1.無血清，無動物源蛋白,，有效避免病毒和支原體污染,。

2.使用方便，凍存前無需程序降溫,。

3.兼容-80度冰箱和液氮凍存,。

4.兼容孔板（如96孔板、48孔板）和凍存管凍存,。

產(chǎn)品質(zhì)量：凍存周期長,，細(xì)胞存活率高

產(chǎn)品應(yīng)用

1.96孔板大規(guī)模快速微量凍存雜交瘤細(xì)胞株候選克隆

2.無血清凍存293和CHO穩(wěn)定細(xì)胞株

3.常規(guī)凍存?zhèn)鞔?xì)胞系

使用方法

一,、常規(guī)細(xì)胞冷凍保存方法【細(xì)胞凍存管法】

選擇凍存處于對數(shù)生長期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率,。

1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞，置于離心管中,，細(xì)胞計數(shù)

2.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考離心條件：1,000~2,000 rpm,，RT, 3~5 min）

3.于離心管中加入適量的無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞濃度為5×105至5×106 cells/ml,。緩慢地混合均勻,，制成細(xì)胞混合液。

4.將細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示的冷凍保存管中,。

5.直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱，長期冷凍保存,。

6.若研究者需要液氮保存時,，可將凍結(jié)的凍存管（放入-80℃冰箱后至少一晝夜）移至-196℃液氮罐。

二,、凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法【細(xì)胞凍存管法】

1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。

2.待細(xì)胞混合液融化后,，立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基與細(xì)胞混合,，再將細(xì)胞混合液移入含有4倍體積細(xì)胞培養(yǎng)基的離心管中，混合均勻,。

3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考離心條件：1,000~2,000 rpm,，RT, 3~5 min），充分棄除離心上清,。

4.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,，進(jìn)行混合和稀釋。

5.鏡檢后,，研究者可根據(jù)各自方法和需要,，調(diào)整細(xì)胞密度,，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

三,、原位凍存法【孔板凍存法】

對于貼壁細(xì)胞：

1. 孔板中細(xì)胞生長狀態(tài)良好且匯合度達(dá)到50%以上時,，從細(xì)胞培養(yǎng)板中將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈。

2. 加入適量（體積根據(jù)孔板定,，一般96孔板加100 ul, 48孔板加200 ul）無血清細(xì)胞凍存液于培養(yǎng)孔板中,，充分浸潤細(xì)胞。

3. 蓋上蓋板,，做好密封措施,，防止染菌。

4. 直接將含凍存液的細(xì)胞培養(yǎng)板放入-80℃冰箱,，長期冷凍保存,。

對于懸浮細(xì)胞：

1. 孔板中細(xì)胞生長狀態(tài)良好且密度達(dá)到5×105至5×106 cells/ml時，用水平離心機(jī)離心（參考離心條件：1,000~2,000 rpm,，RT, 3~5 min）,，從細(xì)胞培養(yǎng)板中將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈。

2. 加入適量（體積根據(jù)孔板定,，一般96孔板加100 ul, 48孔板加200 ul）無血清細(xì)胞凍存液于培養(yǎng)孔板中,，充分浸潤細(xì)胞。

3. 蓋上蓋板,，做好密封措施,，防止染菌。

4. 直接將含凍存液的細(xì)胞培養(yǎng)板放入-80℃冰箱,，長期冷凍保存,。

四、原位凍存復(fù)蘇方法【孔板凍存法】

對于貼壁細(xì)胞：

1.從冰箱里取出冷凍的細(xì)胞培養(yǎng)板,，立即放入37℃培養(yǎng)箱中解凍,。

2.待細(xì)胞凍存液融化后，將液體小心吸取干凈,，立即加入適量細(xì)胞培養(yǎng)基,。

3.置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱常規(guī)傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞：

1.從冰箱里取出冷凍的細(xì)胞培養(yǎng)板,，立即放入37℃培養(yǎng)箱中解凍。

2.待細(xì)胞凍存液融化后,，用水平離心機(jī)離心（參考離心條件：1,000~2,000 rpm,，RT, 3~5 min），將液體小心吸取干凈,，立即加入適量細(xì)胞培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。

3.置37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱常規(guī)傳代培養(yǎng)。

產(chǎn)品保存

1.質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,，為期1年,。

2.短期保存于2-8℃，長期保存于-20℃,。

3.為避免反復(fù)凍融影響產(chǎn)品性能,，大包裝產(chǎn)品推薦分裝后，存放于-20℃?zhèn)溆?/span>,。