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UElandy PCR 清潔試劑盒：分子生物學研究的得力助手

來源：上海易匯生物科技有限公司 2025年06月19日 14:15

在分子生物學研究領域,，PCR 技術作為核心工具，廣泛應用于基因擴增,、疾病診斷,、法醫(yī)鑒定等諸多方面。然而,，PCR 反應結束后,，產(chǎn)物中往往混雜著未反應的引物、dNTPs,、酶以及鹽離子等雜質(zhì),，這些雜質(zhì)會嚴重干擾后續(xù)實驗的準確性與可靠性，如在測序,、克隆,、酶切等實驗中，可能導致結果偏差甚至實驗失敗,。因此,，高效、精準地純化 PCR 產(chǎn)物成為分子生物學實驗流程中至關重要的環(huán)節(jié),。UElandy PCR 清潔試劑盒應運而生,，憑借其的性能，為科研工作者提供了便捷,、可靠的 PCR 產(chǎn)物純化解決方案。

一,、技術原理

UElandy PCR 清潔試劑盒主要基于硅膠膜吸附技術,。在 PCR 反應液中加入特定的結合緩沖液（Buffer PCR - A）,，其中含有的離液鹽成分可破壞核酸分子的水化層，使 DNA 雙鏈解旋并處于單鏈狀態(tài),，同時降低溶液中各種分子的表面張力,，促使 DNA 與硅膠膜發(fā)生特異性吸附。在合適的條件下,，PCR 產(chǎn)物中的 DNA 片段能夠牢固地結合到硅膠膜上,，而引物、dNTPs,、酶以及鹽離子等雜質(zhì)則隨廢液被去除,。經(jīng)過多次洗滌步驟，使用洗滌緩沖液（Buffer W2）進一步清除殘留雜質(zhì),，最后通過低離子強度的洗脫緩沖液（Eluent）或無菌水,，改變 DNA 與硅膠膜之間的相互作用力，使純化后的 DNA 從硅膠膜上洗脫下來,，從而獲得高純度的 PCR 產(chǎn)物 ,。

二、產(chǎn)品組成與特點

（一）產(chǎn)品組成

Buffer PCR - A：DNA 結合溶液,，其配方能夠有效促使 PCR 產(chǎn)物中的 DNA 與硅膠膜結合,，確保高效捕獲目標 DNA 片段。

Buffer W2 concentrate：去鹽液,，使用前需按試劑瓶上指定體積加入無水乙醇（可用無水乙醇或 95% 乙醇）進行稀釋,。稀釋后的 Buffer W2 可有效去除結合在硅膠膜上的鹽分及其他小分子雜質(zhì)，保證 DNA 的純度,。

Eluent：洗脫液,，成分為 2.5 mM Tris - HCl，pH 8.5,。該洗脫液能夠在不影響 DNA 穩(wěn)定性的前提下,，溫和地將 DNA 從硅膠膜上洗脫下來，為后續(xù)實驗提供純凈的 DNA 樣本 ,。

（二）產(chǎn)品特點

高純度純化：通過優(yōu)化的硅膠膜吸附與洗滌流程,，UElandy PCR 清潔試劑盒能夠高效去除 PCR 產(chǎn)物中的引物、dNTPs,、酶以及鹽離子等雜質(zhì),，使純化后的 DNA A260/A280 比值通常處于 1.7 - 1.9 之間，滿足各種對 DNA 純度要求的下游實驗需求,，如高精度測序,、復雜的克隆實驗等。

高回收率：對于不同長度的 PCR 片段（涵蓋 50 bp - 20 kb 的廣泛范圍），該試劑盒均能實現(xiàn)高回收率,，一般可達 70% - 95%,。即使對于短至 50 bp 的小片段 DNA，也能保證較高的回收效率,，減少珍貴樣本的損失,，確保實驗數(shù)據(jù)的完整性和可靠性。

操作便捷：試劑盒提供了負壓法和離心法兩種操作方式,，用戶可根據(jù)自身實驗設備與操作習慣靈活選擇,。無論是在配備負壓裝置的高通量實驗室，還是主要依靠離心機的常規(guī)實驗室,，都能輕松完成 PCR 產(chǎn)物的純化工作,。整個操作流程簡單明了，無需復雜的技術培訓,，即可快速上手,，顯著提高實驗效率。

兼容性強：適用于多種 PCR 反應體系及不同來源的 PCR 產(chǎn)物,，無論是常規(guī) PCR,、巢式 PCR，還是實時熒光定量 PCR 產(chǎn)生的產(chǎn)物,，都能進行有效的純化,。同時，該試劑盒與后續(xù)多種分子生物學實驗技術高度兼容,，純化后的 DNA 可直接用于限制性酶切,、連接反應、分子雜交以及自動化熒光測序等實驗,，為科研工作者構建了順暢的實驗流程 ,。

高通量處理：采用 96 孔板形式的 DNA 制備板，特別適合高通量實驗需求,。在大規(guī)模的基因篩查,、臨床樣本檢測等實驗中，能夠同時處理大量樣本,，大大縮短實驗時間,，提高實驗通量，降低實驗成本 ,。

三,、操作流程

（一）負壓法操作步驟

準備工作：正確連接負壓裝置，將 96 孔 DNA 制備板置于負壓裝置上,。同時,，確保 Buffer W2 concentrate 已按要求加入無水乙醇并混合均勻 ,。

結合反應：在 PCR、酶切,、酶標或測序反應液中,，加入 3 倍體積的 Buffer PCR - A（若 Buffer PCR - A 不足 100 μl，則需加至 100 μl）,。充分混合均勻后，將混合液轉(zhuǎn)移到 96 孔 DNA 制備板中,。開啟負壓裝置,，并調(diào)節(jié)負壓至 - 25 - 30 英寸汞柱，緩慢吸掉板中的溶液,，使 DNA 牢固結合在硅膠膜上 ,。

洗滌步驟：向 96 孔 DNA 制備板中加入 0.3 ml Buffer W2，再次開啟負壓吸盡管中溶液,。重復此洗滌步驟兩次,，以去除雜質(zhì) 。

干燥處理：保持負壓狀態(tài),，將 96 孔 DNA 制備板抽吸 10 min,，盡量去除殘留液體。然后,，將導流管朝下,，將 96 孔 DNA 制備板在長纖維性紙巾上用力拍擊 6 次，進一步去除可能殘留的液體 ,。

洗脫 DNA：將 96 孔 DNA 制備板置于 96 孔 V 型底板上,，在膜正中央加入 25 - 30 μl 水或 Eluent，室溫靜置 1 min,，使洗脫液充分浸潤硅膠膜,。隨后，以 3000 x g 離心 5 min,，將純化后的 DNA 洗脫到 V 型底板中 ,。

（二）離心法操作步驟

結合反應：在 PCR、酶切,、酶標或測序反應液中,，加入 3 倍體積的 Buffer PCR - A（若 Buffer PCR - A 不足 100 μl，則需加至 100 μl）,，充分混勻,。將混合液轉(zhuǎn)移到 96 孔 DNA 制備板中，然后將 96 孔 DNA 制備板置于 96 孔 1.6 ml 深孔板中,，以 1000 x g 離心 1 min,，棄去濾液,，使 DNA 結合在硅膠膜上。

洗滌步驟：向 96 孔 DNA 制備板中加入 0.3 ml Buffer W2,，以 1000 x g 離心 1 min,，棄去濾液。重復此洗滌步驟一次,，確保雜質(zhì)被充分去除 ,。

干燥處理：將 96 孔 DNA 制備板再次置于 96 孔 1.6 ml 深孔板中，以 3000 x g 離心 10 min,，盡可能去除殘留液體 ,。

洗脫 DNA：將 96 孔 DNA 制備板置于潔凈的 96 孔 V 型底板中，在膜正中央加入 25 - 30 μl 水或 Eluent,，室溫靜置 1 min,。最后，以 3000 x g 離心 5 min,，將純化后的 DNA 洗脫到 V 型底板中 ,。

注意事項：在操作過程中，應嚴格按照試劑盒說明書進行試劑的添加與操作條件的控制,。例如,，Buffer W2 concentrate 在使用前必須準確加入無水乙醇；洗脫時,，若將洗脫液或水加熱至 65℃,，有利于提高洗脫效率；由于 DNA 分子呈酸性,，建議將純化后的 DNA 保存在 2.5 mM Tris - HCl,，pH 8.5 的洗脫液中，以維持 DNA 的穩(wěn)定性 ,。

四,、應用案例

（一）基因測序

在二代基因測序?qū)嶒炛校琍CR 擴增是獲取足夠量目標 DNA 片段的常用手段,。然而,，擴增產(chǎn)物中的雜質(zhì)會嚴重影響測序的準確性和讀長。使用 UElandy PCR 清潔試劑盒對 PCR 產(chǎn)物進行純化后,，可有效去除引物二聚體,、未反應的 dNTPs 等雜質(zhì)，為測序反應提供高純度的 DNA 模板,。經(jīng)實際應用驗證,，使用該試劑盒純化后的 PCR 產(chǎn)物進行測序，測序峰圖清晰,，背景噪音低,，讀長顯著提高,，能夠準確解讀基因序列信息，為基因功能研究,、遺傳疾病診斷等提供可靠的數(shù)據(jù)支持 ,。

（二）分子克隆

在構建重組質(zhì)粒的分子克隆實驗中，需要將 PCR 擴增得到的目的基因片段與載體進行連接,。PCR 產(chǎn)物中的雜質(zhì)可能會干擾連接反應的效率,，導致重組質(zhì)粒構建失敗。利用 UElandy PCR 清潔試劑盒對 PCR 產(chǎn)物進行純化,，可確保目的基因片段的高純度,。純化后的基因片段與載體連接效率大幅提升，轉(zhuǎn)化大腸桿菌后,，陽性克隆率顯著增加。通過對陽性克隆的篩選與鑒定,，成功構建了多種重組質(zhì)粒,，為后續(xù)基因表達、蛋白質(zhì)功能研究等實驗奠定了堅實基礎 ,。

（三）SNP 分析

單核苷酸多態(tài)性（SNP）分析在遺傳學研究,、藥物基因組學等領域具有重要意義。在基于 PCR 技術的 SNP 分析實驗中,，PCR 產(chǎn)物的純度直接影響 SNP 位點的準確識別,。UElandy PCR 清潔試劑盒能夠高效去除 PCR 產(chǎn)物中的雜質(zhì)，保證 SNP 分析結果的可靠性,。在對大量樣本進行 SNP 分析時,，該試劑盒的高通量處理能力得以充分發(fā)揮，可同時對 96 個樣本進行 PCR 產(chǎn)物純化,，大大提高了分析效率,，為大規(guī)模遺傳關聯(lián)研究提供了有力工具。

五,、市場競爭優(yōu)勢

在 PCR 清潔試劑盒市場中,，競爭激烈，眾多品牌紛紛推出各自的產(chǎn)品,。然而,，UElandy PCR 清潔試劑盒憑借其優(yōu)勢脫穎而出。與部分競爭對手產(chǎn)品相比,，UElandy 試劑盒在純度和回收率方面表現(xiàn)更為出色,。一些同類產(chǎn)品在去除雜質(zhì)時可能會導致 DNA 的部分損失，使得回收率較低,，且難以有效去除引物二聚體等頑固雜質(zhì),，影響后續(xù)實驗,。而 UElandy PCR 清潔試劑盒通過優(yōu)化的硅膠膜吸附與洗滌體系，在保證高回收率的同時,，實現(xiàn)了更高水平的雜質(zhì)去除,，為用戶提供了質(zhì)量更優(yōu)的純化 DNA 樣本。

在操作便捷性上,，UElandy 提供的負壓法和離心法兩種操作方式,，相比某些僅支持單一操作方式的試劑盒，更能滿足不同實驗室的設備條件和用戶操作習慣,。對于高通量需求的用戶,，其 96 孔板設計以及高效的操作流程，能夠顯著提高實驗通量,，降低時間成本,。此外，UElandy 作為品牌,，背后有專業(yè)的研發(fā)與技術支持團隊,，能夠及時響應用戶在使用過程中遇到的問題，為用戶提供的技術指導與售后服務,，這也是其在市場競爭中的一大優(yōu)勢 ,。

UElandy PCR 清潔試劑盒以其先進的技術原理、的產(chǎn)品性能,、便捷的操作流程以及廣泛的應用范圍,，成為分子生物學研究中的重要工具。無論是在科研院校的基礎研究,，還是在生物技術企業(yè)的產(chǎn)品研發(fā),、臨床診斷機構的樣本檢測等領域,，都能為用戶提供高效,、可靠的 PCR 產(chǎn)物純化解決方案，助力科研工作者突破實驗瓶頸,，推動生命科學研究不斷向前發(fā)展 ,。

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