柱式RNA純化試劑盒是基于分子排阻層析原理的,、專門用于純化同位素和非同位素標記的核酸探針的試劑盒,。在分子排阻層析過程中，大分子（標記的核酸探針或Oligo 探針）將繞過層析介質,，快速透出層析柱,，小分子（未參入的核苷酸）將進入層析介質中，緩慢穿透出層析柱,。根據這一時間差而將兩者分開,。此過程的示意圖如下：
柱式RNA純化試劑盒具有下列特點：
1. 即開即用，提供純化所需要的所有溶液和介質,，不需要單獨準備每種試劑,，
免去用戶自己摸索條件。
2. 適用于 PCR 標記,、隨機引物標記,、切口平移和填入法標記。
3. 能去掉絕大部分的未標記物,、鹽離子等小分子,。
4. 足夠 10 次純化使用，每次可以純化 50 uL 的標記反應液,。
5. 可用于 DIG,、生物素、Cy3,、Cy5 等非同位素標記的 DNA 和 RNA 探針（由于標記分子帶非極性基團,，容易進入有機相,，因此這些探針不能用傳統(tǒng)的酚氯抽提-乙醇沉淀法純化）。 規(guī)格及成分 成份 編號 10 次小紙盒包裝Sephadex G50 介質 121115A 15 mL0.7 mL 離心柱及管套 121115B 10 套TE 溶液 80934 10 mL使用手冊 1 份
運輸及保存 常溫運輸及保存,，有效期一年,。 自備試劑 自備標記探針
使用方法 注意：由于非同位素標記的探針濃度一般都比較低，非常容易吸附到槍頭或
離心管的表面,，造成探針的損失,，因此使用硅化的離心管和槍頭。
1. 搖晃 Sephadex G50 介質至均勻,，迅速轉移 0.5 mL 到離心柱中,，套上
套管（又叫收集管）。
2. 2000rpm 室溫離心 1 分鐘,，Sephadex G50 介質將壓緊在柱子里面,。
3. 倒掉套管中的穿透液，再加 0.5mL 的搖晃后得到的 Sephadex G50 介
質,，2000rpm 室溫離心 1 分鐘,。
4. 經上述步驟會得到體積約為 0.5mL 壓緊后的 Sephadex G50 介質。如
不足,，再加入少量的 G50 介質離心,，直到體積達到 0.5 mL 左右。倒掉
套管中的穿透液,。
5. 在柱子中 Sephadex G50 界面的上面加入 50 uL TE 緩沖液,，套上套管，
2000rpm 室溫離心 1 分鐘,，測量收集管中穿透液的體積,。
6. 重復上步 3-5 次，直到收集管中穿透液的體積跟加入的體積一樣（50
uL）,。
7. 將 50 uL 的標記探針（必須使用 50 uL 樣品,。如果沒有 50 uL，需要用
TE 緩沖液或水補足到 50 uL）加到柱子中 Sephadex G50 界面的上面,，
套上一個自備的（是硅化的）離心管,。
8. 2000rpm 室溫離心 1 分鐘，離心管中的穿透液將含標記探針,，未參入的
標記物將滯留在介質中,。
9. 電泳或點雜交檢測探針回收效率后直接使用或放-20℃長期保存。

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