為了更好的幫助客戶提供真實(shí)的原代細(xì)胞,，使用免疫熒光鑒定出提取的細(xì)胞類型,，免疫熒光技術(shù)又稱熒光抗體技術(shù),，是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展最早的一種,。它是在免疫學(xué),、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項(xiàng)技術(shù),。該技術(shù)的主要特點(diǎn)是：特異性強(qiáng),、敏感性高,、速度快,。 一下是賽百慷技術(shù)人員提供的免疫熒光細(xì)胞鑒定的步驟，僅做參考：

1.細(xì)胞爬片

取4片玻璃片于24孔板中,，每孔加入培養(yǎng)基1mL,，加入細(xì)胞0.02million個/孔。置培養(yǎng)箱2h或過夜,。
2.固定
細(xì)胞爬片后,，吸出培養(yǎng)基，用PBS洗一遍,，加入4% PFA于4℃固定30min,。用PBS洗3×5min/次,。也可最后一次不吸出PBS，放4℃過夜,。
3.破膜封閉
將玻片除去水分,，置于培養(yǎng)皿支撐物上，
玻璃片封閉液配置：0.5% Trition X-100與PBS 1:1混合,，再加10% 血清,，
取50uL破膜封閉液滴于防水膜上，將玻片上有細(xì)胞的一面蓋上2h,。
4.一抗孵育
一抗配置：抗體與PBS 1:100（200）稀釋
破膜后,，取50uL一抗于防水膜上（濕盒中），將玻片有細(xì)胞的一面蓋上置于4℃（最多可放置一周）
陰性對照組可用PBS代替一抗,。
5.二抗孵育
PBS洗3×5min/次,，
二抗混合液配置：二抗：PBS=1:500
DAPI:PBS=1:1000
防水膜上滴50uL二抗混合液，蓋上玻片,，避光,，室溫放置2h。
6.包埋

PBS洗3×5min/次,，玻片上各滴1滴Fluoromount-G,，將有細(xì)胞的一面蓋上。