柱式探針純化試劑盒是基于分子排阻層析原理的,、專門用于純化同位素和非同位素標(biāo)記的核酸探針的試劑盒。在分子排阻層析過程中,，大分子（標(biāo)記的核酸探針或Oligo 探針）將繞過層析介質(zhì),，快速透出層析柱，小分子（未參入的核苷酸）將進(jìn)入層析介質(zhì)中，緩慢穿透出層析柱,。根據(jù)這一時間差而將兩者分開,。此過程的示意圖如下：
柱式探針純化試劑盒具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，提供純化所需要的所有溶液和介質(zhì),，不需要單獨(dú)準(zhǔn)備每種試劑,，
免去用戶自己摸索條件。
2. 適用于 PCR 標(biāo)記,、隨機(jī)引物標(biāo)記,、切口平移和填入法標(biāo)記。
3. 能去掉絕大部分的未標(biāo)記物,、鹽離子等小分子,。
4. 足夠 10 次純化使用，每次可以純化 50 uL 的標(biāo)記反應(yīng)液,。
5. 可用于 DIG,、生物素、Cy3,、Cy5 等非同位素標(biāo)記的 DNA 和 RNA 探針（由于標(biāo)記分子帶非極性基團(tuán),，容易進(jìn)入有機(jī)相，因此這些探針不能用傳統(tǒng)的酚氯抽提-乙醇沉淀法純化）,。 規(guī)格及成分 成份 編號 10 次小紙盒包裝Sephadex G50 介質(zhì) 121115A 15 mL0.7 mL 離心柱及管套 121115B 10 套TE 溶液 80934 10 mL使用手冊 1 份
運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸及保存,，有效期一年。 自備試劑 自備標(biāo)記探針
使用方法 注意：由于非同位素標(biāo)記的探針濃度一般都比較低,，非常容易吸附到槍頭或
離心管的表面,，造成探針的損失，因此使用硅化的離心管和槍頭,。
1. 搖晃 Sephadex G50 介質(zhì)至均勻,，迅速轉(zhuǎn)移 0.5 mL 到離心柱中，套上
套管（又叫收集管）,。
2. 2000rpm 室溫離心 1 分鐘,，Sephadex G50 介質(zhì)將壓緊在柱子里面。
3. 倒掉套管中的穿透液,，再加 0.5mL 的搖晃后得到的 Sephadex G50 介
質(zhì),，2000rpm 室溫離心 1 分鐘。
4. 經(jīng)上述步驟會得到體積約為 0.5mL 壓緊后的 Sephadex G50 介質(zhì),。如
不足,，再加入少量的 G50 介質(zhì)離心，直到體積達(dá)到 0.5 mL 左右,。倒掉
套管中的穿透液,。
5. 在柱子中 Sephadex G50 界面的上面加入 50 uL TE 緩沖液,，套上套管，
2000rpm 室溫離心 1 分鐘,，測量收集管中穿透液的體積,。
6. 重復(fù)上步 3-5 次，直到收集管中穿透液的體積跟加入的體積一樣（50
uL）,。
7. 將 50 uL 的標(biāo)記探針（必須使用 50 uL 樣品,。如果沒有 50 uL，需要用
TE 緩沖液或水補(bǔ)足到 50 uL）加到柱子中 Sephadex G50 界面的上面,，
套上一個自備的（是硅化的）離心管,。
8. 2000rpm 室溫離心 1 分鐘，離心管中的穿透液將含標(biāo)記探針,，未參入的
標(biāo)記物將滯留在介質(zhì)中,。
9. 電泳或點(diǎn)雜交檢測探針回收效率后直接使用或放-20℃長期保存。

關(guān)聯(lián)產(chǎn)品 DIG 探針標(biāo)記效率檢測試劑盒,，生物素探針標(biāo)記效率檢測試劑盒