細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一,、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍,、1ml槍頭,、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶,、酒精燈,、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min,；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基,；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái),；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化,；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái),；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中,；

9.1000r/min,離心5min,；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液,；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻,，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài),；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

大鼠子宮平滑肌細(xì)胞永生化細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,，本產(chǎn)品可保持大鼠子宮平滑肌細(xì)胞永生化細(xì)胞 優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含大鼠子宮平滑肌細(xì)胞永生化細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分,，可直接用于大鼠子宮平滑肌細(xì)胞永生化細(xì)胞的培養(yǎng),。

平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)體系           500 ml

產(chǎn)品主要成分

平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基                             440 ml

平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)添加劑                             5 ml

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光,，保存2個(gè)月,；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來(lái)水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞,，迅速放入37℃水浴中解凍,。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布,。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液,。

加入PBS緩沖液,，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片,，重復(fù)幾次,。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí),，進(jìn)行傳代,。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗,。

加入消化液,，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,，觀察細(xì)胞變化,。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化,。

吹打細(xì)胞使其成為懸液,，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清,，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基,。

做好標(biāo)記,，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存,。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清,。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO）,，輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中,，標(biāo)記后放入程序降溫盒,，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat coagulation factor VIII related aigen (F VIII -Ag) ELISA Kit 大鼠Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)試劑盒

Humancardioophln1,CT-1ELISAKit 人心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanBcellreceptor,BCR試劑盒人B細(xì)胞受體(BCR)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物蔗糖合成酶(sucrosesyhase)活性比色法定量試劑盒20次

Humahioredoxieductase,xRELISAKit人硫氧還蛋白還原酶(xR)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠血小板因子4(PF4)試劑盒 ,，英文名： PF4 ELISA Kit

Mouse coagulation factor VIII related aigen (F VIII -Ag) ELISA Kit 小鼠Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)試劑盒

Mousebasicfibroblastgrowthfactor9,bFGF-9ELISAKit 小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanCollagenaseIELISAKit人膠原酶I

細(xì)胞CDK2/CYCLINE激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitHGF大鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子

兔子脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子組織因子(TF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子組織多肽抗原(TPA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

橋粒斑菲素蛋白3抗體

轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1γ抗體

NRP2重組人 Neuropilin-2 / NRP2 蛋白 Protein

微管關(guān)聯(lián)蛋白1A(MAP1A)重組蛋白 Recombinant Microtubule Associated Protein 1A (MAP1A)

CDNF重組人 CDNF / ARMETL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CTLA4 Protein Human 重組人 CTLA4 / CD152 蛋白

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/goose/Guiyang/337/2006) 血凝素H屬

大鼠子宮平滑肌細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基天冬轉(zhuǎn)氨酶(AST)重組蛋白 Recombinant Aspartate Aminotransferase (AST)

CPM Protein Human 重組人 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白

MCAM重組人 CD146 / MCAM 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H5N2 重組甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

PEBP1重組人 PEBP1 / Phosphatidylethanolamine binding protein 1 蛋白 Protein