細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管,、移液槍,、1ml槍頭、50ml離心管,、T25培養(yǎng)瓶,、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái),，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min,；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái),；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái),；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中,；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min,；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái),；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻,，并做好標(biāo)記,；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

雞胚成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持雞胚成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含雞胚成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,，無(wú)需添加任何成分,，可直接用于雞胚成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞的培養(yǎng)。

成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系          500 ml

產(chǎn)品主要成分

成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基                           440 ml

成纖維細(xì)胞培養(yǎng)添加劑                           5 ml

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃,，避光,，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來(lái)水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞,，迅速放入37℃水浴中解凍,。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布,。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液,。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞,，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片,，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基,。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí),，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,，加入PBS緩沖液漂洗,。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面,。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后,，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化,。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心,。

棄上清,，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基,。

做好標(biāo)記，放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心,，棄上清,。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞,。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中,，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存,。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit 大鼠前列腺素E2(PGE2)試劑盒

Human8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2αELISAKit 人8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanBigEndothelin,BigET試劑盒人大內(nèi)皮素(BigET)試劑盒規(guī)格：96T/48T

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HumanSuperOxidaseDimase,SODELISAKit人超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM1)試劑盒 ，英文名： PECAM1 ELISA Kit

Mouse coagulation (F x) ELISA Kit 小鼠Ⅹ(FⅩ)試劑盒

MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP-4ELISAkit 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumancoagulationfactorIX,FIXELISAKit人Ⅸ

細(xì)胞CDK5/P35激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitCR大鼠鈣結(jié)合蛋白

豚鼠組胺試劑盒   豚鼠組胺試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠組胺試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠組胺試劑盒,、豚鼠組胺eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒   豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒、豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

豚鼠壞死因子α試劑盒   豚鼠壞死因子α試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠壞死因子α試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：豚鼠壞死因子α試劑盒,、豚鼠壞死因子αeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

豚鼠試劑盒   豚鼠試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠試劑盒,、豚鼠eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員C2抗體

自噬相關(guān)蛋白3抗體

HA重組甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

pre S1/S2 protein [HBV] 乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2(抗原 0.5mgpre S1/S2 protein [HBV] 乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2(抗原)

AKT1重組人 AKT1 / PKB / PKBα 蛋白 Protein

CTF1 Protein Human 重組人 Cardiotrophin-1 / CTF1 屬

雞胚成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基MAGE-1 黑色素瘤相關(guān) 0.5mgMAGE-1 黑色素瘤相關(guān)

GABARAPL2 Protein Human 重組人 GATE-16 / GABARAPL2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD83重組食蟹猴 CD83 蛋白  Protein

ITK Protein Mouse 重組小鼠 ITK Kinase 蛋白 (aa 351-619, His & GST 標(biāo)簽)

IL21重組人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白 Protein