進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒IBL原理：

采用雙抗體夾心法測(cè)定人雄激素結(jié)合蛋白（ABP）水平,。用純化的人雄激素結(jié)合蛋白（ABP）抗體包被微孔板，制成固相載體,，實(shí)驗(yàn)時(shí)依次在微孔板中加入樣本及標(biāo)準(zhǔn)品,，并加入HRP標(biāo)記的ABP抗體，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，反復(fù)洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色，再用硫酸終止反應(yīng),，轉(zhuǎn)變成黃色,。顏色的深淺和樣品中的ABP含量呈正相關(guān)。采用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度（OD值）,，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,，計(jì)算測(cè)試樣品中ABP濃度。 

實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：

儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘）,，微量加液器,、吸頭、蒸餾水或去離子水,，濾紙,。

緩沖液使用：加5ul的緩沖液于50ul的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定,，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。

混勻，靜置1小時(shí)備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿,，此步驟忽略）,。

洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。

樣品收集,、處理及保存：

細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘,，收集上清,。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml左右,，通過(guò)反復(fù)凍融,，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎,，離心取上清液檢測(cè),。

血清：在室溫下，血液自然凝固,，以1000×g離心15分鐘,，取上清待測(cè),。

血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20分鐘后,，以1000×g離心15分鐘,，收集上
清。

體液：包括胸腹水,、腦脊液,，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清。

組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本,，稱取重量0.5mg,，加入500ul的PBS，用手工或勻漿器,，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,，以2000-3000rmp離心20分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè),。

樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性,。

進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒IBL保存：如果樣品不能立即檢測(cè),，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍,。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心,。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。