進口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒IBL原理：

采用雙抗體夾心法測定人雄激素結(jié)合蛋白（ABP）水平,。用純化的人雄激素結(jié)合蛋白（ABP）抗體包被微孔板,，制成固相載體，實驗時依次在微孔板中加入樣本及標準品,，并加入HRP標記的ABP抗體，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,，反復(fù)洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍色，再用硫酸終止反應(yīng),，轉(zhuǎn)變成黃色,。顏色的深淺和樣品中的ABP含量呈正相關(guān)。采用酶標儀在450nm波長測定吸光度（OD值）,，根據(jù)標準曲線,，計算測試樣品中ABP濃度。 

實驗材料與試劑配制：

儀器與材料：酶標儀（使用前預(yù)熱30分鐘）,，微量加液器,、吸頭、蒸餾水或去離子水,，濾紙,。

緩沖液使用：加5ul的緩沖液于50ul的樣品中,，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。

混勻,，靜置1小時備用（如果標本是血清或者血漿，此步驟忽略）,。

洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用,。

樣品收集、處理及保存：

細胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份,。用無菌管收集細胞上清液,，以1000×g離心15分鐘，收集上清,。
2. 細胞：用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,，調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml左右，通過反復(fù)凍融,，使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,，或者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測,。

血清：在室溫下,，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘,，取上清待測,。

血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20分鐘后,，以1000×g離心15分鐘,，收集上
清。

體液：包括胸腹水,、腦脊液,，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清。

組織標本：切取組織標本,，稱取重量0.5mg,，加入500ul的PBS，用手工或勻漿器,，或超聲破碎儀將標本勻漿,，以2000-3000rmp離心20分鐘，收集上清進行檢測。

樣品中不能含有NaN3,，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。

進口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒IBL保存：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝,，-70 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心,。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。