在ELISA試劑盒批發(fā)實驗中加樣一般有3次,，即加標本,，加酶結合物,，加底物,。加樣時應將所加物加在ELISA檢測試劑盒板孔的底部,，避免加在孔壁上部,，并注意不可濺出,，不可產(chǎn)生氣泡,。加標本一般用微量加樣器,，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴,，以免發(fā)生交叉污染,，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣,。  
    
    也可在板孔中加入稀釋液,，再在其中加入血清標本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和,。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器,，使加液過程迅速完成。

     洗滌在ELISA檢測試劑盒過程中雖不是一個反應步驟,，但卻也決定著實驗的成敗,。ELISA檢測試劑盒就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質,，以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質,。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，而在洗滌時又應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來,?？梢哉f在ELISA檢測試劑盒操作中，洗滌是*主要的關鍵技術,，應引起操作者的高度重視,，操作者應嚴格按要求洗滌，不得馬虎,。