培養(yǎng)條件

• 培養(yǎng)基：DMEM/F12+1%N2+2%B27
• 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%
• 溫度：37攝氏度

細(xì)胞描述 

細(xì)胞描述：本公司培養(yǎng)出品的神經(jīng)干細(xì)胞（NPC）取自12天EGFP綠色熒光蛋白標(biāo)記C57小鼠胚胎的端腦,，用DMEM/F12+1%N2+2%B27*培養(yǎng)基進(jìn)行原代培養(yǎng)和傳代。
細(xì)胞規(guī)格：10⁶/管
細(xì)胞活力：＞90%
細(xì)胞代數(shù)：原代
細(xì)胞運(yùn)輸：干冰運(yùn)輸（凍存管）/ 常溫運(yùn)輸（T-25培養(yǎng)瓶）

細(xì)胞復(fù)蘇

1. 取出凍存管后,，立刻放入37℃水浴中,，輕輕晃動至*融化。
2. 用70%酒精消毒凍存管壁外側(cè)后,，轉(zhuǎn)入生物安全柜或者超凈臺中,，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至離心管中，慢慢加入9 ml 37℃預(yù)熱的DMEM/F12+10%FBS培養(yǎng)基,。
3. 1000rpm離心5 min,。
4. 去掉上清，再加入5ml DMEM/F12+1%N2+2%B27*培養(yǎng)基,，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),。

細(xì)胞傳代

1. 顯微鏡下觀察，神經(jīng)干細(xì)胞懸浮成“神經(jīng)球”生長,，通常情況下,，每兩天換液一次，每四天傳代一次,。
2. 在生物安全柜或者超凈臺中,，將培養(yǎng)瓶中的含有神經(jīng)球的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到15ml離心管中。
3. 500rpm離心5min,，收集神經(jīng)干細(xì)胞,。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶，在生物安全柜或者超凈臺中輕輕吹打10次,，注意不要消化太久,，消化的目的是縮小神經(jīng)球的體積,，不要消化成單個神經(jīng)干細(xì)胞，那樣會影響其生長速度,。
5. 然后加入5ml DMEM/F12+1%N2+2%B27培養(yǎng)基,，吹打均勻后1000rpm 離心5min。
6. 離心后,，去掉上清,，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，按照1:2-1:3的比例進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng),。

細(xì)胞凍存：本品使用DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO凍存液,。

細(xì)胞圖片：100x熒光顯微鏡照片（綠色：細(xì)胞持續(xù)表達(dá)EGFP）

詳情可聯(lián)絡(luò)；: