豬衣原體抗體檢測(cè)試劑盒
- 公司名稱(chēng) 上海加科生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
- 更新時(shí)間 2018/4/8 13:33:33
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四、試劑盒原理
本試劑盒系由預(yù)包被鸚鵡熱衣原體抗原的酶標(biāo)板,、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測(cè)豬血清、血漿樣本中豬鸚鵡熱衣原體抗體,。實(shí)驗(yàn)時(shí)在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和待檢樣本,,經(jīng)溫育后若樣品中含有鸚鵡熱衣原體抗體,則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后,;再加入酶標(biāo)記物,與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合,;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物,,在孔中加TMB底物液,與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān),;加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色,;用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值,,即可知樣品是否含有豬鸚鵡熱衣原體抗體。
四,、試劑盒原理
本試劑盒系由預(yù)包被弓形蟲(chóng)(TOX)重組抗原的酶標(biāo)板,、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測(cè)豬血清,、血漿樣本中弓形蟲(chóng)抗體,。實(shí)驗(yàn)時(shí)在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有弓形蟲(chóng)抗體,,則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標(biāo)記物,,與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合,;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物,,在孔中加TMB底物液,與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān),;加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色,;用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值,,即可知樣品是否含有弓形蟲(chóng)抗體。
五,、試劑盒組成
酶標(biāo)板,、酶標(biāo)記物、樣品稀釋液,、濃縮洗滌液,、底物液A、底物液B,、陽(yáng)性對(duì)照,、陰性對(duì)照
六、儲(chǔ)存及有效期
于2~8℃避光保存,,有效期為12個(gè)月,。
包被板開(kāi)封后請(qǐng)于2~8℃避光保存,避免受潮,。使用期限為2個(gè)月,。
七、適用儀器 含450nm,、630nm波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀,,37℃恒溫設(shè)備,可調(diào)微量移液器,。
操作步驟
一,、樣品準(zhǔn)備
1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,,無(wú)溶血,、無(wú)污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,,*需置-20℃保存,。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋?zhuān)ㄈ?μl血清加入195μl樣品稀釋液中,混勻),。陰,、陽(yáng)性對(duì)照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋,。
二,、檢驗(yàn)方法
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫,。
2.取所需用量酶標(biāo)板條,,設(shè)空白對(duì)照1孔、陰性/陽(yáng)性對(duì)照各2孔,,未用的板條盡快密封,,2~8℃保存。
3.空白對(duì)照孔加樣品稀釋液100μl,;陰,、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰、陽(yáng)性對(duì)照100μl,;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl,。
4.混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘,。
5.扣去孔內(nèi)液體,,每孔加滿(mǎn)洗滌液,,靜置30秒后棄去,,重復(fù)洗滌5次,拍干,。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外),。置37℃反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌,,同步驟5,。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,,混勻,,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,,混勻,,用空白孔調(diào)零,于450nm(可用630nm作參比波長(zhǎng))測(cè)定各孔吸光值(A值),。
結(jié)果分析
一,、參考值
實(shí)驗(yàn)正常的情況下,陰性對(duì)照≤0.10,,陽(yáng)性對(duì)照≥0.6,。
二、檢驗(yàn)結(jié)果的解釋
1.樣品A值≥0.38為陽(yáng)性,;樣品A值在0.2到0.38之間為可疑,;樣品A值<0.2為陰性,。
2.本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性或可疑時(shí)表明豬只抗體水平不足,建議補(bǔ)打相應(yīng)疫苗,。