普魯士藍(lán)染色試劑盒（Perls stain）

普魯士藍(lán)染色試劑盒說明：

含鐵血黃素（Hemosiderin）是一種血紅蛋白源性色素,，為金黃色或棕黃色顆粒,，因其

含鐵、金黃色,，故稱為含鐵血黃素,。當(dāng)紅細(xì)胞被巨噬細(xì)胞吞噬后，在溶酶體酶的作用下,，血

紅蛋白被分解為不含鐵的橙色血質(zhì)和含鐵的含鐵血黃素,。

Perls 普魯士藍(lán)反應(yīng)（Prussian blue reaction）又稱為含鐵血黃素染色，即經(jīng)過亞鐵氰化

鉀和稀酸處理后可以產(chǎn)生藍(lán)色,，常見于吞噬細(xì)胞內(nèi)會(huì)間質(zhì)內(nèi),，主要顯示三價(jià)鐵鹽。Perls 普

魯士藍(lán)是非常經(jīng)典的組織化學(xué)反應(yīng),，是顯示組織內(nèi)三價(jià)鐵的一種敏感,、傳統(tǒng)優(yōu)良的方法，其

染色原理為：亞鐵qing hua jia溶液使三價(jià)鐵離子從蛋白質(zhì)中被稀鹽酸分離出來,，三價(jià)鐵與亞鐵氰

化鉀反應(yīng),，生成一種不溶解的藍(lán)色化合物即三價(jià)鐵的亞鐵氰化物普魯士藍(lán)，所以該反應(yīng)被稱

為普魯士藍(lán)反應(yīng),。三價(jià)鐵的亞鐵氰化物是一種很穩(wěn)定的化合物,，在反應(yīng)后可用紅色染色劑進(jìn)

行復(fù)染，如核固紅,、伊紅,、中性紅等。

Perls stain 常用于顯示局部組織內(nèi)各種出血性病變,，常見于吞噬細(xì)胞內(nèi),。在判斷含鐵血

黃素沉積時(shí)，用Perls 反應(yīng)可以得到證實(shí),，該染色方法可以很好的區(qū)分含鐵血黃素和其他色

素,。該染色液穩(wěn)定性好,、可以*保存、不易產(chǎn)生沉淀,、應(yīng)用范圍廣,、可以進(jìn)行復(fù)染。

普魯士藍(lán)染色試劑盒（Perls stain,，伊紅法）,，其復(fù)染液采用伊紅染色液，也是常用的復(fù)

染液,，該復(fù)染液染色時(shí)間較核固紅染色液要短,。

普魯士藍(lán)染色試劑盒組成：

Perls stain A

Perls stain B

臨用前，取A1,、A2 等量混合,，即為試劑(A)Perls stain，不宜提前配制,。,、

試劑(B): 伊紅染色

液 50ml

使用說明書

主要成分：

試劑(A): 主要由亞鐵qing hua jia、稀酸等組成,。

試劑(B): 主要由伊紅,、防腐劑等組成。

自備材料：

1,、10%的中性福爾馬林

2,、系列乙醇

3、蒸餾水

4,、4%的多聚甲醛

普魯士藍(lán)染色試劑盒操作步驟（僅供參考）：

（一）石蠟切片染色

1、 切片脫蠟至水

① 二甲苯(Ⅰ) 5～10min

② 二甲苯(Ⅱ) 5～10min

③無水乙醇(Ⅰ)（可選） 3～5min

④無水乙醇(Ⅱ)（可選） 3～5min

⑤95%的乙醇 3～5min

⑥90%的乙醇 3～5min

⑦80%的乙醇 3～5min

⑧自來水或蒸餾水沖洗(Ⅰ) 1～3min

⑨自來水或蒸餾水沖洗(Ⅱ) 1～3min

2,、染色

①切片入Perls stain（見注意事項(xiàng)6） 15～30min

②蒸餾水充分沖洗 5～10min

③伊紅染色液淡染細(xì)胞核 15～30s

④自來水沖洗 1～5s

3,、脫水、透明,、封固

①90%乙醇 10～20s

②95%乙醇(Ⅰ) 1～2min

③95%乙醇(Ⅱ) 1～2min

④ 無水乙醇(Ⅰ) 2～3min

⑤無水乙醇(Ⅱ) 2～3min

⑥ 二甲苯(Ⅰ) 2～3min

⑦二甲苯(Ⅱ) 2～3min

⑧ 二甲苯(Ⅲ) 2～3min

⑨中性樹脂封片,。

（二）冰凍切片染色

1、 無需脫蠟,，直接迅速用蒸餾水沖洗2～3min,。

2、 染色,、脫蠟,、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟,。

（三）細(xì)胞染色

1,、4%多聚甲醛固定10～20min,。

2、自來水沖洗2 次,，每次2min,。

3、蒸餾水沖洗2 次,，每次2min,。

4、染色,、脫蠟,、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟,。

染.結(jié)果：

含鐵血黃素或三價(jià)鐵 藍(lán)色

細(xì)胞核,、其他組織 紅色

陰性對照（可選）

取相同連續(xù)切片脫蠟至水。置于5%的草酸中,，孵育2-6h 后,，經(jīng)Perla stain，需要步驟

同上,。結(jié)果為陰性,。

普魯士藍(lán)染色試劑盒注意事項(xiàng)：

1、 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈,。

2,、 組織固定常采用10%的中性福爾馬林，經(jīng)普通福爾馬林*固定后,，組織會(huì)有損傷,。

3、 臨用前取A1,、A2 液等量混合,，即為試劑（A），現(xiàn)配現(xiàn)用,，不可提前配制,。

4、整個(gè)操作過程中容器要干凈,，避免使用金屬鐵制品,，洗切片和容器時(shí)以蒸餾水為宜，因

普通水內(nèi)含鐵質(zhì),。

5,、避免使用酸性固定劑，鉻酸鹽處理也會(huì)妨礙鐵的保存,。

6,、Perls stain 染色時(shí),，應(yīng)根據(jù)樣品情況調(diào)整著色時(shí)間。

7,、 所有檢查切片都應(yīng)使用同一個(gè)陽性對照切片,選擇適合的對照非常重要.尸檢肺組織是一

個(gè)很好的對照,包含相當(dāng)數(shù)量的鐵陽性巨噬細(xì)胞(心衰細(xì)胞).

8,、95%乙醇、90%乙醇應(yīng)經(jīng)常更換新液.

9,、 冰凍切片和細(xì)胞的染色,應(yīng)根據(jù)具體情況摸索實(shí)驗(yàn)條件.

10,、 為了您的健康和安全,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作.

普魯士藍(lán)染色試劑盒有效期：12個(gè)月

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