Sepharose 4FF 瓊脂糖凝膠 4FF
參考價 | ¥ 11 |
訂貨量 | ≥1 |
- 公司名稱 北京索萊寶科技有限公司
- 品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2016/11/17 9:40:48
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Sepharose 4FF 瓊脂糖凝膠 4FF
品 牌:solarbio
中文名稱:瓊脂糖凝膠CL-6B
英文名稱:Sepharose CL-6B
貨 號:S9180
供應(yīng)商:北京索萊寶科技有限公司
北京索萊寶做為專業(yè)的生化試劑生產(chǎn)商與供應(yīng)商,,歡迎您咨詢訂購,!
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: :蔡會芳
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Sepharose 4FF 瓊脂糖凝膠 4FF
瓊脂糖凝膠 4FF說明書
瓊脂糖凝膠是在4B瓊脂糖微球的基礎(chǔ)上經(jīng)過兩次交聯(lián)形成的高交聯(lián)基質(zhì),,微球的化學(xué)穩(wěn)定性及物理性能顯著增強(qiáng),,剛性增加,流速更快,,使產(chǎn)品處理時間大大縮短,。可用于生物大分子的凝膠層析,。
- 外觀
Sepharose 4FF 瓊脂糖凝膠 4FF為白色球狀凝膠,,無嗅、無味,、無肉眼可見雜質(zhì),。
- 理化指標(biāo)
項 目 | 指 標(biāo) |
基 質(zhì) | 4% 交聯(lián)瓊脂糖 |
排阻極限 | 60000~20×106 (球蛋白) |
形狀 | 球形 |
粒徑 | 45~165 μm |
高流速 | 300 cm/h* |
耐壓 | 0.3MPa |
pH適用范圍 | 2~14 (短時間,,在位清洗),2~12(長時間) |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 以下溶液中40℃下穩(wěn)定: 2mol/L NaOH,;70%EtOH,;30%異丙醇;30%乙腈,;1%SDS,;6mol/L鹽酸胍;8mol/L尿素 |
*檢測條件: 層析柱10mm×300mm *柱床高15cm,,25℃, 流動相為0.1mol/LNaCl
- 包裝
Sepharose 4FF 瓊脂糖凝膠 4FF以聚胺酯瓶密封包裝,,外貼標(biāo)簽,注明“品名,、體積,、顆粒大小、應(yīng)用”等內(nèi)容,。
- 貯存
Sepharose 4FF 瓊脂糖凝膠 4FF應(yīng)密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20% 乙醇),,通風(fēng)、干燥,、清潔的地方,。不能冷凍。用過的柱子貯存在4℃(20% 乙醇),。
- 注意事項
本品應(yīng)避免與氧化劑接觸,,避免長時間暴露在空氣中。
- 運(yùn)輸
運(yùn)輸中應(yīng)避免日曬,、雨淋、重壓,,嚴(yán)禁與有毒,、有害物品混運(yùn)。
7 保質(zhì)期
5年,。
8 應(yīng)用
Sepharose 4FF 瓊脂糖凝膠 4FF具有很高的化學(xué)穩(wěn)定性,、高流速、較好的機(jī)械性能,、可多次重復(fù)使用等特點,,非特異性吸附低,回收率高,,可用有機(jī)溶劑及1~2mol/L 的NaOH在位清洗,,適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn),廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì),、核酸及多肽的凝膠色譜純化,。
下面簡要介紹介質(zhì)的使用過程,。
8.1 裝柱
凝膠過濾介質(zhì)的使用對裝柱的要求較高,為了保證分離效果,,一般通過柱子上加一個裝柱器來使分離柱裝滿凝膠,,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm,。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進(jìn)行檢驗,。
以下過程為通用介質(zhì)裝填過程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,,可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊,,接好管路。
(1)讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫,。配制緩沖液,。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液,。
(2)選擇一根一定直徑的柱子,,長約30~60cm,根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積的1.15倍),清洗掉20%乙醇,,抽干,,用緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。
(3)將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),,務(wù)必使底端無氣泡,。
(4)用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意勿使產(chǎn)生氣泡,。打開柱子出液口,,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,連結(jié)好柱子頂端柱頭,。
(5)打開蠕動泵,,讓緩沖液用使用時流速的1.33倍的流速流過,使柱床穩(wěn)定,。用緩沖液平衡柱子,,到柱床穩(wěn)定。
(6)好用一個裝柱器輔助裝柱,。裝完后柱床上端輕輕刮平,,上好柱頭。
8.2平衡
讓緩沖液以一定流速流過柱子,,到流出液電導(dǎo)和pH不變,。
8.3 上樣
(1)樣品用緩沖液配制,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣,。含鹽量過大,、濃度過小的樣品要先做處理,,再上樣。
(2)介質(zhì)對樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的,,分子量大的先流出來,。
(3)上樣體積約為柱體積的1~2%,越小分離越好,。
8.4 洗脫
用緩沖液洗脫,,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變,。
8.5 再生
一般用緩沖液洗到平衡,,可再次使用。
8.6 注意
在裝柱,、使用和保存柱子的時候,,始終要避免柱子流干氣泡進(jìn)入。
若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時洗不掉,,可用在位清洗(CIP)除去,。
8.7 在位清洗
(1)對于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白,可以用2M Nacl去除,。
(2)對沉淀蛋白,、對以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類,可用1M NaOH 去除,。
(3)對強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白,、脂類等,用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,,但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,,否則容易產(chǎn)生氣泡。
清洗完畢后,,用至少3倍緩沖液平衡柱子,。
8.8 注意
在裝柱、使用和保存柱子的時候,,要避免柱子流干,氣泡進(jìn)入,。
8.9 去熱源
用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時或用0.1M的氫氧化鈉24小時,。或用以下方法步驟去除:
(1)2倍柱體積的70%乙醇,;
(2)2倍柱體積50mM Tris-Hcl pH7.5,;
(3)1倍柱體積4M尿素;
(4)3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M Nacl,;
以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制,。
8.10 消毒
用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積,,初始緩沖液平衡柱子。