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如何收集ELISA的樣本和前期準(zhǔn)備

來源:北京索萊寶科技有限公司   2016年08月16日 13:22  
收集ELISA的樣本和前期準(zhǔn)備:

利用ELISA進(jìn)行臨床檢驗(yàn)常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),,尿,,糞便,腦脊液,,胸腹水,,前列腺液,精液,,陰道分泌物等,,這些樣本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求,。 (一) 臨床樣本的收集 A,、血液樣本     有些生理因素,如吸煙,、進(jìn)食,、運(yùn)動(dòng)、情緒波動(dòng),、妊娠,、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化,。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,,以條件一致為宜,如無法避免,,應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素,。
1.外周血     一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無凍瘡,,炎癥,,水腫,破損,。如該部位不符合要求,,以其他手指部位代替。對(duì)燒傷病人,,可選擇皮膚完整處采血,。由于部分血液常規(guī)檢測(cè)(如白細(xì)胞計(jì)數(shù),、分類等)受生理因素影響波動(dòng)過大,比較時(shí)宜使條件盡量一致,。涉及到體內(nèi)出,、凝血功能的檢測(cè)項(xiàng)目(如血小板計(jì)數(shù),出血時(shí)間或凝血時(shí)間等)的檢測(cè),,一定要注意了解患者是否用過抗凝,、促凝藥物,以便在減少或避免干擾因素的影響,。
2.靜脈血     除涉及各種止血和血栓檢測(cè)等項(xiàng)目需采用抗凝靜脈血血漿外,,目前絕大多數(shù)檢測(cè)項(xiàng)目的分析檢測(cè)可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測(cè)項(xiàng)目中,,有些(如血糖,,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,一般以清晨空腹血標(biāo)本為宜,;有些在血中衰變較快(血清酶活性測(cè)定如ACP活性等),,0~4℃貯存活性減弱也不一,這些項(xiàng)目的檢測(cè)必須及時(shí)而快速,;有些(如肌酸激酶等)受運(yùn)動(dòng)等因素影響較大,。抽血時(shí)避免溶血的發(fā)生也十分重要,尤其涉及血鉀,,LDH等的測(cè)定,。   B、尿液樣本     同血標(biāo)本一樣,,尿液標(biāo)本受飲食,、運(yùn)動(dòng)、藥物量等因素的影響也較大,,特別是飲食的影響,,故一般來說晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿。晨尿是指清晨起床后的*次尿標(biāo)本,,較濃縮和酸化,,有形成分(如血細(xì)胞,上皮細(xì)胞,,管形)相對(duì)集中便于觀察,。隨機(jī)尿即隨意一次尿,留取方便,,但受飲食,、運(yùn)動(dòng)、藥物影響較甚,易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果,,如飲食性蛋白尿,,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結(jié)果等,。餐后尿(午餐后2小時(shí)收集的患者尿液)適用于尿糖,,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時(shí)的尿標(biāo)本可增加試驗(yàn)敏感性,,檢出較輕微的病變,。12小時(shí)尿細(xì)胞計(jì)數(shù)即Addis計(jì)數(shù)(前晚8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液),因時(shí)間較長,,細(xì)菌易繁殖,須加入防腐劑甲醛,。24小時(shí)尿(*天晨8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液)中化學(xué)物質(zhì)的定量,,包括蛋白,糖,,尿17-酮,、17-羥類固醇,兒茶酚胺,,Ca2+等,,檢測(cè)不同的物質(zhì),選擇不同的防腐劑防腐,。清潔中段尿多用于尿細(xì)菌培養(yǎng),,要求無菌,沖洗外陰后留取標(biāo)本,。所有尿標(biāo)本的收集都應(yīng)足量,,少12 ml,好50 ml,,定時(shí)尿須全部收集,,對(duì)女性患者應(yīng)避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標(biāo)本,。   C,、糞便樣本     糞便標(biāo)本的檢測(cè)對(duì)判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價(jià)值。采集時(shí)要求用干凈的竹簽選取含有粘液,、膿血等異常病變成分的糞便,,對(duì)外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材,。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計(jì)數(shù)應(yīng)收集24小時(shí)糞便,。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查,從有膿血和稀軟處取材,,保溫送檢,。查日本血吸蟲蟲卵時(shí)應(yīng)取粘液,、膿血部分,孵化毛蚴時(shí)至少留取30g糞便,,且需盡快處理,。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時(shí)或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢。隱血試驗(yàn)(化學(xué)法),,試驗(yàn)前3日禁食肉類及含動(dòng)物血食物并禁服鐵劑,,維生素C等。所有糞便標(biāo)本采集后1小時(shí)內(nèi)應(yīng)檢查完畢,,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞,。以上針對(duì)臨床樣本指標(biāo)檢測(cè)。   D,、腦脊液樣本     腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢,,放置過久將影響檢驗(yàn)結(jié)果:如細(xì)胞變性,破壞,,導(dǎo)致計(jì)數(shù)和分類不準(zhǔn),;有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少;細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率,。腦脊液抽取后一般分裝三個(gè)無菌管,,*管作細(xì)菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查,,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,,三管的順序不宜顛倒。因標(biāo)本采集較難,,全部送檢和檢測(cè)過程應(yīng)注意安全,。   E、胸腹水樣本     與腦脊液標(biāo)本一樣,,采集后的標(biāo)本注意安全,,及時(shí)送檢。一般也分裝三管,,一管作常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查,,一管生化檢查,一管細(xì)菌培養(yǎng),,順序以與腦脊液相同為宜,。   F、前列腺液樣本     前列腺液標(biāo)本由前列腺按摩后采集,,液量少時(shí)直接滴在載玻片上及時(shí)送檢,,須注意防止標(biāo)本蒸干,量多時(shí)收集在潔凈干燥的試管中。若按摩不出前列腺液,,可檢查按摩后的尿液沉渣,。   G、精液樣本     精液標(biāo)本采集前應(yīng)禁欲3~7天,,排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中,,保溫并及時(shí)送檢。由于精子生成日間變動(dòng)較大,,一般應(yīng)檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷,。   H、陰道分泌物樣本     陰道標(biāo)本采集前24小時(shí)應(yīng)禁止房事,、盆浴,、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等,,取材所用器械需清潔,。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管口等處取材,,制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標(biāo)本,經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標(biāo)本
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