一,、配制時(shí)的質(zhì)量控制

1,、容器：配制和分裝培養(yǎng)基的燒瓶、平皿或試管等器材應(yīng)為中性,，無(wú)酸,、堿抑制物殘留，平皿底部要平,，以免瓊脂厚薄不一,，影響藥敏試驗(yàn)結(jié)果。

2,、成分來(lái)源：各種成分來(lái)源可靠,，不含對(duì)目的菌生長(zhǎng)有抑制的物質(zhì)。特殊要求的培養(yǎng)基,，如葡萄糖氧化發(fā)酵試驗(yàn)（O／F 試驗(yàn)）,，除加入葡萄糖外，不能含有其他糖類,，指示劑不能用乙醇溶液,，避免O／F試驗(yàn)的假陽(yáng)性。培養(yǎng)基配制用水應(yīng)是蒸餾水,。

3,、pH值調(diào)整：根據(jù)培養(yǎng)基的不同要求調(diào)整pH 值，控制在要求范圍的±0.2之內(nèi),。應(yīng)當(dāng)注意,，培養(yǎng)基在高壓滅菌后其pH 值降低0.1～0.2，故矯正時(shí)應(yīng)比實(shí)際需要p H值高0.1～0.2,。

4,、滅菌：根據(jù)培養(yǎng)基所含成分及配制數(shù)量的不同，選擇不同的滅菌方式,，既要達(dá)到滅菌效果,，又不破壞培養(yǎng)基成分,。一般對(duì)穩(wěn)定的培養(yǎng)基,，如MH瓊脂、營(yíng)養(yǎng)瓊脂可用高壓滅菌,，即121℃15min ,；而含糖的培養(yǎng)基則以108℃滅菌為好,，以防止糖類破壞。不耐高熱的物質(zhì)如血清,、牛乳等,，可采用間隙滅菌法滅菌。

5,、分裝：根據(jù)使用的目的和要求決定分裝量,。分裝培養(yǎng)基所用的平皿、試管要求清潔,，不殘留酸堿,；制備平板培養(yǎng)基時(shí)，操作臺(tái)要水平,，以避免瓊脂平板厚薄不一,，同時(shí)確保無(wú)菌操作。

二,、配制后質(zhì)量控制

1,、培養(yǎng)基外觀情況：包括顏色、透明度,、有無(wú)沉淀和凝固,。如發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基表面有裂紋或與培養(yǎng)皿的邊緣分離，說(shuō)明培養(yǎng)基有脫水現(xiàn)象,，必須丟棄,。

2、無(wú)菌試驗(yàn)：每一批配好的培養(yǎng)基均須進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn),。先滅菌后分裝的培養(yǎng)基,，可采用抽樣方法試驗(yàn)，少于100個(gè)樣本通常選取5％～10％的量,，如果配制大量培養(yǎng)基,，則任意選取10 個(gè)培養(yǎng)基；無(wú)菌分裝培養(yǎng)基則需全部做無(wú)菌試驗(yàn),。樣本在35 ℃ 或其他適宜的溫度下隔夜培養(yǎng),，如培養(yǎng)基含有血液，則需再置于室溫1天,，以檢查嗜冷菌,。選擇性培養(yǎng)基因含有抑制物質(zhì)，能抑制許多微生物,，因此,，可加入10倍量的無(wú)菌液體培養(yǎng)基，稀釋抑制物質(zhì)，以利于檢出污染菌,。即使做過(guò)無(wú)菌試驗(yàn),，接種時(shí)，也要檢查每個(gè)平板上的可見(jiàn)菌落,。

3,、性能測(cè)試：每一批新制或新購(gòu)的培養(yǎng)基，使用前均須取已知性質(zhì)的庫(kù)存菌種進(jìn)行性能測(cè)試,。培養(yǎng)基按目的不同可分為增菌培養(yǎng)基,、分離培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。

①增菌培養(yǎng)基：接種少量難以生長(zhǎng)的細(xì)菌,，在一定時(shí)間內(nèi)觀察增菌情況,，細(xì)菌能生長(zhǎng)的最小接種濃度越小，說(shuō)明增菌培養(yǎng)基性能愈好,。

②分離培養(yǎng)基：要求目的菌生長(zhǎng)良好,，非目的菌被抑制。一般要求生長(zhǎng)的目的菌接種量不可過(guò)多,，較好的方法是將測(cè)試菌調(diào)成0．5麥?zhǔn)蠞岫鹊木鷳乙?，再?.001ml的標(biāo)準(zhǔn)接種環(huán)涂劃在培養(yǎng)基上，觀察菌落生長(zhǎng),。

③鑒定培養(yǎng)基：應(yīng)選擇具有典型特征的菌株作性能試驗(yàn),。如三糖鐵瓊脂，須用弗勞地枸櫞酸桿菌,、福氏志賀菌及銅綠假單胞菌3種菌分別接種3支培養(yǎng)基,，若反應(yīng)結(jié)果為斜面產(chǎn)酸／高層產(chǎn)酸、硫化氫陽(yáng)性,，斜面產(chǎn)堿／高層產(chǎn)酸,，斜面產(chǎn)堿／高層產(chǎn)堿，質(zhì)量才算合格,。

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