小鼠骨骼肌細(xì)胞 百歐博偉生物 原代細(xì)胞

小鼠骨骼肌細(xì)胞 百歐博偉生物 原代細(xì)胞

一,、細(xì)胞簡介

平臺編號：Bio-53566

規(guī)格：1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

細(xì)胞信息：原代細(xì)胞

細(xì)胞名稱：小鼠骨骼肌細(xì)胞

用途：研究

注意事項：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,，非藥用,，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）

二、細(xì)胞詳述

舌表皮細(xì)胞經(jīng)常輕度教化脫落,，與唾液和食物碎屑混合而形成一層白色薄苔,。表皮細(xì)胞的主要作用是保護(hù)，同時還兼有其他功能,，如分泌角質(zhì)層等,，具有很強(qiáng)的角質(zhì)化特征。

三,、細(xì)胞特性

1) 組織來源于實驗動物的正常舌組織,。

2) 細(xì)胞鑒定：廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽性。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%,。

4) 不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌,。

5) 細(xì)胞生長方式：鋪路石狀細(xì)胞,，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng),。

四,、產(chǎn)品的運(yùn)輸和保存

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸,；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多,，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁

五,、產(chǎn)品使用

1)本產(chǎn)品僅能用于科

2)本產(chǎn)品未通過直接用于活體動物和人的審核

3)本產(chǎn)品未通過用于活體診斷的審核

六、接受后處理

1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們,。

2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長 狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。

3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加 6ml本公司附帶的培養(yǎng)基。

4)如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的培養(yǎng)基,。

5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系,。

七,、培養(yǎng)操作

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2.加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。

3.按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4.將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。

下面 T25 瓶為類;

1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓脫落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。

2.4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識,。

3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。

八,、注意事項

1,、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系,。

2,、收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),，100*，200*各一張）,，觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況,。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。

3,、由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境,、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),，故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,，期間間隔時間不能大于7天,。

4、所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。

5,、客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，有任何技術(shù)問題可以,，我們隨時給予解答,。

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