近紫外圓二色性（CD）光譜分析檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

在結(jié)構(gòu)生物學(xué)領(lǐng)域,，jīngquè解析dànbáizhì的gāojí結(jié)構(gòu)是理解其功能和機制的關(guān)鍵一步,。近紫外圓二色性（Near-UV CD）光譜分析作為一種無損、高效,、適用于溶液體系的技術(shù),，正被廣泛應(yīng)用于蛋白構(gòu)象研究、藥物篩選及生物制劑的質(zhì)量控制中,。本文將系統(tǒng)介紹近紫外CD光譜的基本原理,、應(yīng)用優(yōu)勢及其在dànbáizhì研究中的關(guān)鍵價值。

一,、什么是近紫外圓二色性（CD）光譜分析,？

圓二色性（Circular Dichroism, CD）是一種基于手性分子對左右旋圓偏振光吸收差異的光譜技術(shù)。其測量結(jié)果通常表現(xiàn)為不同波長處的光吸收差異,，以Δε（摩爾消光系數(shù)差）表示,。CD光譜按照測量波段的不同，可分為遠紫外（190–250 nm）,、近紫外（250–320 nm）和可見區(qū)。其中,，近紫外CD光譜分析專注于250–320 nm波段,，主要反映dànbáizhì分子中芳香族氨基酸（如làoānsuān、sèānsuān,、苯bǐngānsuān）及二硫鍵等環(huán)境的構(gòu)象變化,。因此，該技術(shù)尤為適用于研究蛋白的三級結(jié)構(gòu)和構(gòu)象穩(wěn)定性,。

二,、近紫外CD與蛋白三級結(jié)構(gòu)的關(guān)聯(lián)

dànbáizhì的三級結(jié)構(gòu)是由氨基酸側(cè)鏈間的非共價相互作用（如氫鍵、疏水作用,、范德華力等）形成的三維構(gòu)象,。近紫外CD光譜可以提供以下幾方面的信息：

• 芳香族殘基環(huán)境的對稱性：不同構(gòu)象下芳香族側(cè)鏈對圓偏振光的響應(yīng)不同，從而產(chǎn)生特征峰,。

• 構(gòu)象變化的敏感監(jiān)測：即便是輕微的環(huán)境變化（如pH,、離子強度、配體結(jié)合）,，也可能引起明顯的CD信號變化,。

• 構(gòu)象穩(wěn)定性的評估：通過變溫CD實驗，可判斷蛋白熱穩(wěn)定性與變性溫度,。

這些特征使得近紫外CD成為生物制藥行業(yè)中bùkěhuòquē的質(zhì)量控制工具,。

三、與遠紫外CD的互補性分析

雖然遠紫外CD廣泛用于二級結(jié)構(gòu)分析（如α-螺旋,、β-折疊的含量評估）,，但其對于三級結(jié)構(gòu)信息的解析能力有限。而近紫外CD則提供更高層次的結(jié)構(gòu)信息，特別適合下列應(yīng)用場景：

因此,，二者結(jié)合使用,，可實現(xiàn)dànbáizhì結(jié)構(gòu)從初級到gāojí的quánfāngwèi監(jiān)測。

四,、典型應(yīng)用場景

1,、蛋白構(gòu)象變化監(jiān)測

近紫外CD可實時監(jiān)測蛋白因pH、溫度或配體作用引起的微小構(gòu)象變化,。例如,，在蛋白-配體篩選實驗中，該技術(shù)可輔助判斷結(jié)合是否誘導(dǎo)構(gòu)象重排,，從而篩選出潛在活性分子,。

2、生物制劑穩(wěn)定性分析

單克隆抗體和重組蛋白在開發(fā)過程中需評估其穩(wěn)定性和批間一致性,。近紫外CD光譜作為一種快速,、非破壞性手段，廣泛用于批次一致性,、貯存條件優(yōu)化等環(huán)節(jié),。

3、藥物與靶標(biāo)相互作用驗證

與差示掃描量熱法（DSC）或表面等離子共振（SPR）不同,，近紫外CD可直接從結(jié)構(gòu)層面判斷藥物是否結(jié)合靶蛋白,，是否誘導(dǎo)構(gòu)象變化，適用于高通量篩選早期驗證,。

五,、技術(shù)優(yōu)勢與局限性

1、優(yōu)勢：

• 非破壞性：無需標(biāo)記或修飾,，即可在天然狀態(tài)下獲得結(jié)構(gòu)信息,；

• 高靈敏度：對構(gòu)象變化高度敏感，適用于微小結(jié)構(gòu)擾動監(jiān)測,；

• 操作簡便：樣品制備簡單,，實驗周期短，適合常規(guī)質(zhì)控流程,。

2,、局限性：

• 需較高蛋白濃度（通常>0.2 mg/mL）；

• 不適合強吸光緩沖體系（如含高濃度鹽或芳香化合物）,；

• 不能直接解析原子級別結(jié)構(gòu),，需與其他技術(shù)（如X-ray、NMR）結(jié)合使用,。

六,、數(shù)據(jù)解析與定量分析

近紫外CD光譜通常呈現(xiàn)3個典型區(qū)域：

• 255–270 nm：苯bǐngānsuān信號,；

• 275–282 nm：làoānsuān信號；

• 285–305 nm：sèānsuān信號,。

通過多組分解析,、譜線擬合等方法，可進一步量化不同芳香族殘基的信號強度與構(gòu)象狀態(tài),。這一過程要求高質(zhì)量光譜數(shù)據(jù)和zhuānyè的分析經(jīng)驗,。

在蛋白結(jié)構(gòu)與功能研究日益重要的jīntiān，近紫外圓二色性光譜技術(shù)以其dútè的靈敏性和結(jié)構(gòu)解析能力,，正成為構(gòu)象研究的主力工具之一,。無論是基礎(chǔ)研究，還是藥物開發(fā)與生物制劑質(zhì)控,，它都能為科學(xué)家提供bùkětìdài的參考信息,。百泰派克生物科技依托成熟的質(zhì)譜平臺與dànbáizhì結(jié)構(gòu)表征體系，提供高質(zhì)量的dànbáizhì圓二色譜分析服務(wù),。

百泰派克生物科技特色項目

一,、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù),，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析,，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì,，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù),，對蛋白序列進行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上先進的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液,、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響,。

二,、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué),、靶向dànbáizhì組學(xué),、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù),。此外,，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué),、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作,。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織,、細胞,、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白,，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析,，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三,、單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞,，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質(zhì)量譜,，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)先進,，填補技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù),，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標(biāo)同時進行表征,，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大,，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制,，所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞,，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化,，在臨床診斷,、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向,。除常規(guī)蛋白外,，質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率,、細胞大小,、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等,。

四,、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案,。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別,。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進行免疫肽組學(xué)分析,，可從zuì小的樣品材料中進行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究,，旨在助力科研工作者尋找癌癥,、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo),。

五,、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF,，高效色譜分離技術(shù),，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì,、多肽,、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析,，到產(chǎn)品變異性和純度分析,。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì),。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征,，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA,、ICH,、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證,，建立了完備的質(zhì)量體系,，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計量/期間核查,，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù),，支持新藥研發(fā),、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù),；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù),；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué),、多肽組學(xué)、代謝組學(xué),、生物藥物表征,、單細胞分析,、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等,；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè),，10000+客戶的選擇,；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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