蛋白質(zhì)翻譯后修飾的常見研究策略檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

在真核細(xì)胞中,，dànbáizhì的結(jié)構(gòu)和功能不僅由其氨基酸序列決定,，更受到翻譯后修飾（Post-Translational Modifications, PTMs）的深遠(yuǎn)影響。PTMs 是指dànbáizhì在翻譯完成后通過酶促作用被化學(xué)修飾的過程,，這一機制參與了細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、基因表達(dá)調(diào)控、細(xì)胞周期,、免疫應(yīng)答等多種生物學(xué)過程,。鑒于其在生理和病理狀態(tài)中的核心作用，dànbáizhì翻譯后修飾研究已成為蛋白組學(xué)中的關(guān)鍵領(lǐng)域,。

一,、常見的dànbáizhì翻譯后修飾類型

dànbáizhì可以經(jīng)歷數(shù)百種不同的翻譯后修飾，其中zuì為常見且研究zuì深入的包括：

1,、磷酸化（Phosphorylation）

磷酸化是zuì常見的PTM形式之一,，通常發(fā)生在sīānsuān（Ser）、sūānsuān（Thr）和làoānsuān（Tyr）殘基上,。它在信號傳導(dǎo)通路中發(fā)揮核心作用,，調(diào)控酶活性、dànbáizhì穩(wěn)定性和蛋白互作,。

2,、乙?；ˋcetylation）

乙酰化廣泛存在于組蛋白和非組蛋白中,，對染色質(zhì)結(jié)構(gòu),、基因表達(dá)調(diào)控具有重要意義,。賴氨酸殘基的乙?；梢愿淖僤ànbáizhì的正電荷,，從而影響其結(jié)構(gòu)和功能,。

3,、泛素化（Ubiquitination）

泛素化是通過將小分子dànbáizhì“泛素"連接到目標(biāo)dànbáizhì的賴氨酸殘基上，實現(xiàn)對其降解,、定位或功能調(diào)節(jié),。多泛素鏈的構(gòu)型還可決定不同的細(xì)胞命運。

4,、糖基化（Glycosylation）

糖基化是將糖類基團共價附著到dànbáizhì上,，常見于細(xì)胞膜蛋白和分泌蛋白。其不僅影響dànbáizhì折疊,、穩(wěn)定性和半衰期,，也與癌癥、感染等疾病密切相關(guān),。

5,、甲基化（Methylation）

甲基化可發(fā)生在賴氨酸或jīngānsuān殘基上，常見于組蛋白中,，調(diào)控染色質(zhì)狀態(tài)與基因沉默,。同時也存在于代謝酶、轉(zhuǎn)錄因子等非組蛋白中,。

二,、dànbáizhì翻譯后修飾的研究策略

由于PTMs通常發(fā)生在低豐度、特異性位置且動態(tài)變化明顯,，因此對其研究需要高度靈敏和特異的技術(shù)支持,。以下為目前主流的研究策略。

1,、親和富集策略：提高修飾肽的檢測效率

翻譯后修飾的一個挑戰(zhàn)在于其豐度低,、修飾位點復(fù)雜，直接質(zhì)譜檢測往往難以識別,。為此,，親和富集技術(shù)是研究PTMs的前提步驟。

• 抗體富集：針對特定修飾（如磷酸化,、乙?；╅_發(fā)的單克隆或多克隆抗體可以高效識別目標(biāo)肽段,，例如使用anti-phospho-Ser/Thr/Tyr抗體進(jìn)行磷酸肽富集。

• 金屬氧化物親和層析（MOAC）與IMAC：這兩種方法常用于磷酸肽的非抗體依賴型富集,，TiO?和Fe3?離子可與磷酸基團強烈結(jié)合,，提高磷酸肽的回收率。

• Lectin富集：適用于糖基化研究,，不同凝集素可識別不同類型的糖殘基結(jié)構(gòu),，如ConA、WGA等,。

親和富集后的樣品可顯著提高質(zhì)譜分析中目標(biāo)修飾肽的比例,，增強檢測靈敏度和數(shù)據(jù)質(zhì)量。

2,、高分辨質(zhì)譜分析：定性與定量的核心工具

質(zhì)譜（MS）是研究PTMszuì強大的工具之一,，尤其是Orbitrap、TOF等高分辨平臺,。

• 數(shù)據(jù)依賴采集（DDA）：通過對高強度離子優(yōu)先碎裂,，獲取修飾肽段序列信息，適用于修飾位點鑒定,。

• 數(shù)據(jù)獨立采集（DIA）：全面,、重復(fù)性強，適合多樣本間修飾定量比較,，常與Spectronaut,、DIA-NN等軟件配合分析。

• 平行反應(yīng)監(jiān)測（PRM）與選擇反應(yīng)監(jiān)測（SRM）：用于特定修飾肽的靶向定量分析,，靈敏度高,、定量jīngquè。

通過MS/MS譜圖解讀,，可以確定修飾類型,、修飾位點位置及其變化趨勢。

3,、定量策略：揭示PTMs的動態(tài)調(diào)控機制

在比較不同處理條件（如刺激前后,、突變體與野生型）下PTMs變化時，定量策略尤為關(guān)鍵,。

• TMT/iTRAQ標(biāo)記：適用于多樣本并行定量分析,，配合高通量MS平臺可實現(xiàn)數(shù)十個樣本中修飾變化的系統(tǒng)分析。

• Label-free定量：對樣本處理簡便,，不受標(biāo)簽限制,，適合大規(guī)模探索性研究，但對質(zhì)譜平臺穩(wěn)定性要求高。

• SILAC：通過代謝標(biāo)記將重同位素氨基酸摻入細(xì)胞中,，適合細(xì)胞系的jīngzhǔn定量研究,，尤其在泛素化等動態(tài)變化中表現(xiàn)優(yōu)異。

4,、生物信息學(xué)分析：從“點"到“網(wǎng)"的整合解讀

PTMs的研究不僅止于位點的鑒定,，更需要系統(tǒng)地理解其在生物通路和功能模塊中的作用。

• 位點注釋：如使用PhosphoSitePlus,、UniProt數(shù)據(jù)庫,，識別已知與新發(fā)現(xiàn)的修飾位點。

• 富集分析：GO與KEGG通路富集幫助揭示修飾蛋白的功能傾向與生物學(xué)意義,。

• 互作網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建：結(jié)合STRING,、Cytoscape等工具構(gòu)建蛋白互作網(wǎng)絡(luò)，挖掘核心調(diào)控節(jié)點,。

• 修飾互作分析（Crosstalk）：多個修飾類型之間可能存在協(xié)同或拮抗作用,，如磷酸化-乙?；罢{(diào)控開關(guān)"的關(guān)系,，是PTMs研究的前沿方向。

dànbáizhì翻譯后修飾是解析生命活動精細(xì)調(diào)控的“密碼層",，其研究對于疾病機制揭示,、藥物靶點發(fā)現(xiàn)及生物標(biāo)志物開發(fā)具有bùkětìdài的重要意義。通過整合樣本前處理,、富集技術(shù),、質(zhì)譜分析與生物信息學(xué)解讀，科研人員正不斷拓展dànbáizhì翻譯后修飾的研究,。百泰派克生物科技依托深厚的蛋白組學(xué)技術(shù)積累和gāoduān質(zhì)譜平臺,，持續(xù)為生命科學(xué)研究提供高質(zhì)量的翻譯后修飾蛋白組分析服務(wù)，助力更多科研項目走得更深,、更遠(yuǎn),。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進(jìn)行分析,，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù),，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù,，Cduāncèxù和全序列分析,，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì,，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù),，對蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上先進(jìn)的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉,，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二,、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC,，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué),、多肽組學(xué),、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外,，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù),，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作,。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織,、細(xì)胞,、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白,，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析,，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三,、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個細(xì)胞,，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細(xì)胞的原子質(zhì)量譜,，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)先進(jìn),，填補技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù),，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭?xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時進(jìn)行表征,，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大,，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制,，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞,，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq,。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷,、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景,；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外,，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾,；

③可檢測細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小,、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量,、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四,、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的,、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別,。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析,，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究,，旨在助力科研工作者尋找癌癥,、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo),。

五,、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù),，MALDI TOF,，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案,，從dànbáizhì,、多肽、抗體,、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析,，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù),，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì),。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù),。公司實驗室遵循NMPA,、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則,，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證,，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計量/期間核查,，軟件審計追蹤,，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā),、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行,。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù),；

2.獲國家CNAS實驗室認(rèn)可,，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué),、多肽組學(xué),、代謝組學(xué)、生物藥物表征,、單細(xì)胞分析,、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等,；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè),，10000+客戶的選擇,；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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