多反應監(jiān)測（MRM）在蛋白質定量分析中的應用檢測技術服務詳情介紹

在生命科學研究和生物醫(yī)學領域,，dànbáizhì的定量分析對于理解生物過程、發(fā)現疾病標志物及開發(fā)新型療法具有重要意義,。多反應監(jiān)測（Multiple Reaction Monitoring, MRM）作為基于質譜技術的高特異性,、高靈敏度定量方法，已成為目標dànbáizhì定量分析的重要工具,。

一,、多反應監(jiān)測（MRM）技術概述

1,、什么是多反應監(jiān)測（MRM）？

MRM是一種利用三重四極桿質譜儀（Triple Quadrupole MS）進行特定離子對（母離子→子離子）監(jiān)測的質譜掃描模式,。通過設定特定的離子轉化路徑,，MRM可以在復雜生物樣品中選擇性地檢測目標肽段，實現高靈敏度和高特異性的定量分析,。

2,、MRM的工作原理簡述

MRM模式通常涉及三步篩選過程：dìyī四極桿（Q1）篩選目標母離子，碰撞池（q2）誘導母離子碎裂,，第二四極桿（Q3）篩選特定的子離子,。只有符合預設質量-質量對（mass transition）的離子才被記錄，大幅度降低了背景噪音,，提高了檢測靈敏度和定量準確性,。

二、多反應監(jiān)測（MRM）在dànbáizhì定量分析中的優(yōu)勢

1,、高特異性和高靈敏度

通過選擇性監(jiān)測特定的離子轉化路徑,，MRM能夠有效區(qū)分目標肽段與其他背景分子，實現亞飛摩爾（attomole）級別的檢測限,。這一特性使其尤其適合分析低豐度dànbáizhì和復雜生物基質樣本,。

2、廣泛的動態(tài)范圍

MRM可實現4~5個數量級的動態(tài)檢測范圍,，覆蓋從高豐度到低豐度dànbáizhì的定量需求,，特別適用于血漿、組織提取物等復雜樣品中多靶點分析,。

3,、高重復性和定量準確性

得益于穩(wěn)定的離子監(jiān)測模式和內源性/外源性標準的引入，MRM在多批次實驗中表現出良好的重復性,，且具備juéduì定量的潛力,，為生物標志物驗證和臨床研究提供可靠的數據支持。

三,、多反應監(jiān)測（MRM）在不同dànbáizhì定量應用中的實踐

1,、靶向dànbáizhì組學研究

在探索疾病機制、藥物反應及信號通路調控過程中,，科研人員常常需要驗證篩選出的候選dànbáizhì,。MRM技術因其高通量、定量jīngquè的特點,，已成為驗證階段bùkěhuòquē的工具,。例如，在腫瘤標志物研究中，MRM可以對幾十至上百個候選dànbáizhì進行同步定量,，極大加快了候選分子的驗證速度,。

2、臨床生物標志物驗證

相比Discovery Proteomics,，MRM提供了更具臨床可轉化潛力的定量數據,。在心血管疾病、腫瘤及自身免疫性疾病的標志物開發(fā)中,，MRM被廣泛應用于大規(guī)模隊列樣本的驗證階段,，如jīngquè定量血漿中的低豐度dànbáizhì（如細胞因子、炎癥因子）,。

3,、藥物作用機制研究

在藥物研發(fā)過程中，理解藥物與靶點dànbáizhì之間的相互作用至關重要,。MRM可用于監(jiān)測藥物處理前后靶蛋白水平的變化,，幫助解析藥效機制及耐藥性發(fā)展過程。例如,，通過MRM定量藥物暴露后細胞系中特定信號通路蛋白表達的變化,，可直觀反映藥物的作用效果。

4,、多重靶點同步檢測

MRM能夠同時監(jiān)測多個靶蛋白，且無需依賴抗體資源,，提高了實驗效率和數據通量,。近年來，基于MRM的多靶點蛋白定量方法被廣泛應用于感染性疾病,、多發(fā)病種的綜合診斷與生物標志物面板的開發(fā),。

四、如何優(yōu)化MRMdànbáizhì定量實驗設計,？

1,、合理選擇目標肽段（Surrogate Peptides）

選擇具有代表性、穩(wěn)定性好,、wúxiū飾且易離子化的肽段是成功進行MRM定量的前提,。通常，每個目標蛋白需要篩選2~3個高質量的代表肽段以確保數據可靠性,。

2,、優(yōu)化離子對選擇與參數設置

每個肽段應至少選擇2~3個高響應、低背景的子離子進行監(jiān)測（即transition）,，同時優(yōu)化碰撞能量（Collision Energy）等質譜參數,，以獲得zuì佳的信噪比。

3、使用穩(wěn)定同位素標記內標

引入穩(wěn)定同位素標記肽（SIS peptides）作為內標,，能夠有效糾正樣本處理,、離子化效率及儀器波動等引入的誤差，從而實現更為準確的juéduì定量,。

4,、規(guī)范化樣品前處理流程

樣品制備的標準化直接影響MRM定量的準確性和重復性。統(tǒng)一的dànbáizhì提取,、酶解,、純化和濃縮步驟，結合質量控制樣品（QC sample）的引入,，是確保實驗可靠性的關鍵,。

隨著dànbáizhì定量分析日益精細化和高通量化，多反應監(jiān)測（MRM）以其zhuóyuè的特異性,、靈敏度與穩(wěn)定性,，成為科研人員與生物醫(yī)藥企業(yè)bùkěhuòquē的技術利器。百泰派克生物科技不斷優(yōu)化質譜平臺與定量方法學開發(fā),，為全球科研人員提供高質量,、高可靠性的定量蛋白組分析服務，助力科學發(fā)現與臨床應用的每一步,。

百泰派克生物科技特色項目

一,、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務,，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析,，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務,。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,，對蛋白序列進行分析,。

※服務優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉,，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二,、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,，提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學,、多肽組學,、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務,。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務,，助力微量樣本蛋白組學,、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,，發(fā)現新的生物標記物;

2.體內體外多種dànbáizhì標記方法,，適用于分析組織、細胞,、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高,，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析,，分析更系統(tǒng)準確,。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統(tǒng)進行單細胞質譜流式技術分析,，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內部的分子,，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜,，zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量,。

※服務優(yōu)勢：

1.技術優(yōu)良，*技術空白

采用金屬標記抗體技術,，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題,。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白,。

2.分析數量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制,，所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞,，實現了數量級的提高,，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,，在臨床診斷,、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向,。除常規(guī)蛋白外,，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率,、細胞大小,、mRNA轉錄子表達量,、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四,、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現一站式解決方案包括我們專有的,、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別,。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究,，旨在助力科研工作者尋找癌癥,、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標,。

五,、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術,，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案,，從dànbáizhì、多肽,、抗體,、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產品變異性和純度分析,。旨在提供優(yōu)質生物藥物分析服務,，幫助生物醫(yī)藥生產商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征,，生物質譜多組學優(yōu)質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務,。公司實驗室遵循NMPA、ICH,、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則,，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系,，數據冷熱/異地備份,，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤,，為客戶提供一體化解決方案和技術服務,，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產放行,。

1.公司采用ISO9001質量控制體系,，zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可,，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質量研究服務,；

3.業(yè)務范圍覆蓋dànbáizhì組學,、多肽組學、代謝組學,、生物藥物表征,、單細胞分析、單細胞質譜流式,、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等,；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求,；

5.服務3000+企業(yè),，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質的生物質譜分析服務!

多反應監(jiān)測（MRM）在蛋白質定量分析中的應用檢測技術服務詳情介紹