APEX 蛋白標(biāo)記檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

APEX 蛋白標(biāo)記（ascorbate peroxidase-based proximity labeling）是一種基于抗壞血酸過(guò)氧化物酶的鄰近標(biāo)記技術(shù),。APEX 是一種來(lái)源于植物的過(guò)氧化物酶,，能夠催化shēngwùsù酰胺-酚（biotin-phenol, BP）或其他酚類(lèi)底物在過(guò)氧化氫（H?O?）存在下形成活性自由基,。這些自由基的半衰期極短，僅能擴(kuò)散約 20 nm,，從而能夠在短時(shí)間（秒級(jí)）內(nèi)選擇性地標(biāo)記 APEX 附近的蛋白質(zhì),，而不會(huì)影響遠(yuǎn)離 APEX 的蛋白。隨后,，通過(guò)鏈霉親和素親和純化和質(zhì)譜分析可以高效鑒定鄰近的蛋白質(zhì)組,。APEX 蛋白標(biāo)記的主要作用在于揭示細(xì)胞內(nèi)蛋白的空間分布及動(dòng)態(tài)相互作用。該方法能夠在活細(xì)胞內(nèi)實(shí)現(xiàn)快速標(biāo)記,，不受細(xì)胞固定,、通透性等限制，特別適用于研究特定亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)或短時(shí)相互作用的蛋白質(zhì)網(wǎng)絡(luò),。例如,，在神經(jīng)生物學(xué)研究中,，APEX 蛋白標(biāo)記被用于解析突觸相關(guān)蛋白的組成，以研究神經(jīng)遞質(zhì)傳遞過(guò)程中的關(guān)鍵調(diào)控蛋白,。此外,，在線(xiàn)粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng),、高爾基體等亞細(xì)胞器蛋白組學(xué)研究中,，APEX 也展現(xiàn)出dútè的優(yōu)勢(shì)，能夠在細(xì)胞生理環(huán)境下jīngquè標(biāo)記并富集特定細(xì)胞器的蛋白組,。近年來(lái)，該技術(shù)在病毒學(xué),、癌癥生物學(xué)以及免疫信號(hào)通路研究中也得到了廣泛應(yīng)用,，為解析復(fù)雜的蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)提供了強(qiáng)有力的工具。

APEX 蛋白標(biāo)記的優(yōu)勢(shì)之一在于其標(biāo)記速度快,、空間分辨率高，可在 1 分鐘內(nèi)完成鄰近蛋白的shēngwùsù化,，極大地降低了細(xì)胞狀態(tài)變化對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。同時(shí),，由于shēngwùsù-鏈霉親和素系統(tǒng)的高親和力，APEX 標(biāo)記的蛋白可以高效富集,，提高質(zhì)譜鑒定的靈敏度,。此外,，APEX 可基因編碼并融合到靶蛋白上,，使其能夠靶向特定細(xì)胞器或蛋白復(fù)合物，為解析動(dòng)態(tài)蛋白質(zhì)網(wǎng)絡(luò)提供工具,。

與其他鄰近標(biāo)記技術(shù)（如 BioID）相比,，APEX 蛋白標(biāo)記的時(shí)間分辨率更高，適用于快速發(fā)生的蛋白相互作用事件,，而 BioID 需要較長(zhǎng)的孵育時(shí)間（通常為 18–24 小時(shí)）,。此外,，APEX 可在無(wú)氧環(huán)境下發(fā)揮作用,，使其成為研究線(xiàn)粒體、核孔復(fù)合物等缺氧環(huán)境中的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)的理想選擇,。然而,，APEX 也存在一定局限性，例如可能引入非特異性背景噪音，且 H?O? 處理可能對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生氧化損傷,，因此實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)需優(yōu)化 H?O? 濃度和處理時(shí)間，以確保實(shí)驗(yàn)的特異性和可靠性,。

近年來(lái),，APEX 蛋白標(biāo)記技術(shù)的改進(jìn)不斷推進(jìn)其應(yīng)用邊界。例如,，APEX2 作為 APEX 的改良版本,，具有更高的催化活性和穩(wěn)定性，可在更低濃度的 H?O? 下實(shí)現(xiàn)高效標(biāo)記,，減少細(xì)胞毒性,。此外，結(jié)合 CRISPR-Cas9 介導(dǎo)的基因編輯技術(shù),，APEX 使得細(xì)胞器蛋白組學(xué)研究更加jīngzhǔn,，可在內(nèi)源水平上實(shí)現(xiàn)靶蛋白的特異性標(biāo)記，提高數(shù)據(jù)的生理相關(guān)性,。

百泰派克生物科技依托優(yōu)良的蛋白質(zhì)組學(xué)平臺(tái),，為客戶(hù)提供高質(zhì)量的蛋白分析服務(wù)。我們具備豐富的實(shí)驗(yàn)優(yōu)化經(jīng)驗(yàn),，能夠根據(jù)不同研究需求優(yōu)化標(biāo)記條件,，提高實(shí)驗(yàn)的靈敏度和特異性。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一,、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)蛋白質(zhì)序列進(jìn)行分析,，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)蛋白質(zhì)的氨基酸組成分析,，N端測(cè)序,，C端測(cè)序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白質(zhì)N端序列分析服務(wù),。對(duì)于未知理論序列的蛋白質(zhì),，提供基于從頭測(cè)序法的蛋白質(zhì)從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析,。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液,、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉,，PEC和和糖基化等N端修飾的影響,。

二、蛋白質(zhì)組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC,，提供定量蛋白質(zhì)組學(xué),、靶向蛋白質(zhì)組學(xué),、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種蛋白質(zhì)組學(xué)分析服務(wù),。此外,，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質(zhì)組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué),、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作,。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種蛋白質(zhì)標(biāo)記方法,，適用于分析組織,、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白,，線(xiàn)性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確,。

三,、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子,，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞,，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量,。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)優(yōu)良,，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題,?？稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白,。

2.分析數(shù)量大,，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右,，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞,，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq,。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化,，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景,；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向,。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾,；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率,、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量,、DNA合成速率以及蛋白酶活性等,。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專(zhuān)有的,、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案,。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析,，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量,。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥,、免疫疾病及傳染病的解決方案,，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五,、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù),，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù),，提供一系列完善的生物藥物分析方案,，從蛋白質(zhì)、多肽,、抗體,、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析,。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù),，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征,，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù),。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH,、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則,，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系,，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤,，為客戶(hù)提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù),，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行,。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù),；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶(hù)提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù),；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋蛋白質(zhì)組學(xué),、多肽組學(xué)、代謝組學(xué),、生物藥物表征,、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式,、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等,；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿(mǎn)足您一站式服務(wù)需求,；

5.服務(wù)3000+企業(yè),，10000+客戶(hù)的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

APEX 蛋白標(biāo)記檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹