詳細介紹
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱:過氧化氫酶(CAT)試劑盒-可見顯色法品牌
規(guī)格:48樣 96樣 96樣 196樣
貨號:AS002
檢測方法:可見分光光度法 微板法 可見分光光度法 微板法
產(chǎn)品分類:氧化應激系列
貯存溫度:2~8℃,。
本試劑盒保質期:6個月
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存,;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,,4℃保存,;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存,;
試劑四:粉劑×2 瓶,,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計,、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm),、低溫離心機、移液器,、研缽,、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,,了解本批樣品情況,,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費,!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),,加入 1mL 提取液,,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,,取上清作為待測液,。
【注】:若增加樣本量,,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清,;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,,超聲 3s,,間隔 10s,重復 30 次),;
12000rpm 4℃離心 10min,,取上清,置冰上待測,。
【注】:若增加樣本量,,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測,;若渾濁,,離心后取上清檢測。
AIPL1 遺傳性失明相關蛋白AIPL1抗體
AIRE 免疫調節(jié)蛋白AIRE抗體
phospho-AKT1 (Ser473) 磷酸化蛋白激酶AKT1抗體
phospho-AKT1 (Thr72) 磷酸化蛋白激酶AKT1抗體
phospho-AKT1 (Tyr326) 磷酸化蛋白激酶AKT1抗體
ALDH1A2 乙醛脫氫酶2型抗體
ALDH9A1 γ-氨基丁酸醛脫氫酶抗體
AGPS 衰老相關蛋白5抗體
phospho-alpha B Crystallin (Ser59) 磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質/α-晶體蛋白b鏈抗體
AMBN 釉基質蛋白抗體
phospho-AMPK alpha 2 (Ser176) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體
phospho-AMPK alpha 2 (Ser491) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體
phospho-Androgen Receptor (Ser515) 磷酸化雄激素受體抗體
phospho-Androgen Receptor (Ser791) 磷酸化雄激素受體抗體
phospho-Androgen Receptor (Ser94) 磷酸化雄激素受體抗體
phospho-Androgen Receptor (Tyr363) 磷酸化雄激素受體抗體
ANKK1 錨定蛋白重復結構域蛋白激酶ANKK1抗體
phospho-alpha Adducin (Thr445) 磷酸化內收蛋白抗體
HB-PET Auto Express Medium
即用型平板培養(yǎng)基
平板計數(shù)瓊脂平板(9cm) 10個/包 國際標準平板計數(shù)瓊脂,,含糖,,用于細菌總數(shù)的測定
Plate Count Agar
營養(yǎng)瓊脂平板(9cm) 10個/包 細菌計數(shù)、不含糖,,可作血瓊脂基礎和傳代用
Nutrient Agar
血平皿(9cm) 10個/包 用于一般細菌的分離,、培養(yǎng)和溶血試驗
Blood Agar Plates
哥倫比亞血瓊脂平板(9cm) 10個/包 用于營養(yǎng)要求高細菌的分離、培養(yǎng)和溶血試驗
Columbia Blood Agar
巧克力瓊脂平板(9cm) 10個/包 用于嗜血桿菌,、奈瑟氏菌分離培養(yǎng)
Chocolate Agar
伊紅美藍瓊脂平板(9cm) 10個/包 弱選擇性培養(yǎng)基,、用于分離腸道致病菌,特別是大腸桿菌
Eosin-Methylene Blue Agar
SS瓊脂平板(9cm) 10個/包 用于沙門氏菌,、志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)
Salmonella Shigella Agar
HE瓊脂平板(9cm) 10個/包 用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng)
Hektoen Enteric Agar
XLD培養(yǎng)基平板(9cm) 10個/包 選擇性培養(yǎng)基,,主要用于分離志賀氏菌屬,亦可用于分離沙門氏菌
Xylose Lysine Desoxycholate Medium
過氧化氫酶(CAT)試劑盒-可見顯色法品牌亞硫酸鉍瓊脂平板(9cm) 10個/包 用于沙門氏菌的選擇性分離
Bismuth Sulfite Agar
中國藍瓊脂平板(9cm) 10個/包 弱選擇性培養(yǎng)基,,用于腸道致病菌的選擇性分離
操作步驟:
實驗開始前,,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,,均需混勻,,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,,如樣品濃度過高時,,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù),。
1. 加樣:分別設空白孔,、標準孔、待測樣品孔,??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘,。為保證實驗結果有效性,,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,,甩干,,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),,酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘,。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,,甩干,,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,,大約400μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘,。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,,甩干,,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,,350μl/每孔,,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,,即可終止),。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,,此時藍色立轉黃色,。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,,底物反應時間到后應盡快加入終止液,。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測,。