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小鼠成纖維細胞生長因子10elisa檢測試劑盒雙抗體夾心法:

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-1a0ug/ml,。在反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜,。次日,，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次,。
2,、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時,。然后洗滌(同時做空白孔,，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3,、加酶標抗體：于各反應孔中,，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時,，洗滌,。
4、加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘,。
5,、終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深,，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺,，依據所呈顏色的深淺,，以“+”、“-”號表示,。也可測OD值：在ELISA檢測儀上,，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處,，以空白對照孔調零后測各孔OD值,，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性,。

小鼠成纖維細胞生長因子10elisa檢測試劑盒操作步驟：

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設置標準品孔和樣本孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；

3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加,。

4.除空白孔外,，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。

5.棄去液體，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.每孔加入底物A,、B各50μL,，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL,，15min內,，在450nm波長處測定各孔的OD值,。