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重組人FGF9(重組人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9)背景介紹成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(fibroblastgrowthfactor9,FGF9)是成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子家族(FGFs)的成員之一,。FGF9最初發(fā)現(xiàn)于人類(lèi)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系,其具有神經(jīng)膠原激活因子的活性,,基于其活性最初被命名為膠質(zhì)細(xì)胞激活因子(glia-activatingfactor,,GAF),。FGF9是一種自分泌或旁分泌生長(zhǎng)因子,主要分布于細(xì)胞和組織中,,包括成骨細(xì)胞,、軟骨細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞,、晶狀體上皮細(xì)胞,,以及皮膚、肝,、腎臟,、胃、生殖系統(tǒng),、淋巴組
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重組人白介素4細(xì)胞因子是免疫原,、絲裂原或其他刺激劑誘導(dǎo)多種細(xì)胞產(chǎn)生的低分子量可溶性蛋白質(zhì),,具有調(diào)節(jié)固有免疫和適應(yīng)性免疫、血細(xì)胞生成,、細(xì)胞生長(zhǎng)以及損傷組織修復(fù)等多種功能,。細(xì)胞因子可被分為白細(xì)胞介素、干擾素,、腫瘤壞死因子超家族,、集落刺激因子、趨化因子,、生長(zhǎng)因子等,。眾多細(xì)胞因子在體內(nèi)通過(guò)旁分泌、自分泌或內(nèi)分泌等方式發(fā)揮作用,,具有多效性,、重疊性、拮抗性,、協(xié)同性等多種生理特性,,形成了十分復(fù)雜的細(xì)胞因子調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò),參與人體多種重要的生理功能,。重組人白介素4使用流程:1,、本品低溫取出回溫至室溫,開(kāi)瓶前先短暫離心
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細(xì)胞凍存液使用的原理:細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力,。如今細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷,。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷,。細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特點(diǎn):1.配方明確,,不含血清、不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白,,可減少各類(lèi)細(xì)菌,、病毒和支
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精品推薦|三款無(wú)血清細(xì)胞凍存液,給您提供更多選擇,!
細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長(zhǎng)期保存的常用方法,,其中細(xì)胞凍存液,,作為細(xì)胞凍存時(shí)必須使用的一種溶液,不僅僅是說(shuō)只是用來(lái)進(jìn)行細(xì)胞的保存,,在細(xì)胞的購(gòu)買(mǎi),、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送過(guò)程中也起著關(guān)鍵作用,,因此選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要,。傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液是向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑,一般是10%二甲基亞砜(DMSO)和10%-90%的牛血清,。傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時(shí)遇到的問(wèn)題總結(jié)如下:1.需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),,步驟繁瑣,耗時(shí)耗力,;2.含血清,,細(xì)胞污染(病毒、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高 -
重組人白細(xì)胞介素2主要可以用來(lái)做什么呢,?
白細(xì)胞介素現(xiàn)在是指一類(lèi)分子結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能已基本明確,,具有重要調(diào)節(jié)作用而統(tǒng)一命名的細(xì)胞因子。白細(xì)胞介素在傳遞信息,,激活與調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞,,介導(dǎo)T、B細(xì)胞活化,、增殖與分化及在炎癥反應(yīng)中起重要作用,。重組人白細(xì)胞介素2是由多細(xì)胞來(lái)源,又具有多向性作用的細(xì)胞因子,;對(duì)機(jī)體的免疫應(yīng)答和抗病毒感染等有重要作用,。其主要作用為:刺激免疫系統(tǒng)活性,促進(jìn)免疫細(xì)胞增殖,。刺激自然殺傷細(xì)胞的增殖與活化,、并增強(qiáng)其活性;誘導(dǎo)細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞,,增強(qiáng)其溶細(xì)胞活性,;誘導(dǎo)淋巴因子活化殺傷細(xì)胞,此細(xì)胞具有廣譜的抗腫瘤活性,,可以溶解多種腫瘤細(xì) -
想知道更多的真核表達(dá)細(xì)胞優(yōu)點(diǎn),,來(lái)本文可以看到
真核表達(dá)細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn):重組DNA易轉(zhuǎn)染,,遺傳穩(wěn)定,,可重復(fù);識(shí)別和去除內(nèi)含子,;進(jìn)行翻譯后修飾,;磷酸化、糖基化,、二硫鍵,、寡聚體等的形成、高級(jí)結(jié)構(gòu)的正確折疊,;產(chǎn)品的構(gòu)型正確率高,,可被改造成類(lèi)人體源性,免疫源性好,;可分泌至培養(yǎng)基,,提純工藝簡(jiǎn)單,成本低,;可用于基因治療,。細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)能誘導(dǎo)高效表達(dá),對(duì)表達(dá)的蛋白進(jìn)行正確折疊,,并進(jìn)行復(fù)雜糖基化修飾,,蛋白活性接近于天然蛋白,不需去除內(nèi)毒素,,周期較長(zhǎng),,操作復(fù)雜,需要細(xì)胞房,,無(wú)菌,,成本投入高。真核表達(dá)細(xì)胞載體趨向于既有利于擴(kuò)增目的基因又有利于篩選陽(yáng)性克隆的載體的構(gòu)建,。 -
哺乳動(dòng)物細(xì)胞真核表達(dá)系統(tǒng)的瞬時(shí)表達(dá)是通過(guò)轉(zhuǎn)染試劑完成的
哺乳動(dòng)物細(xì)胞真核表達(dá)系統(tǒng)能表達(dá)天然結(jié)構(gòu)完整的重組蛋白,是廣泛應(yīng)用的人類(lèi)復(fù)雜糖基化蛋白的表達(dá)系統(tǒng),,生物活性接近于天然蛋白質(zhì),,是活性蛋白因子及各類(lèi)受體蛋白的表達(dá)系統(tǒng),在生物制藥領(lǐng)域應(yīng)用較廣,60%以上的的藥用蛋白產(chǎn)品由哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)獲得,。哺乳動(dòng)物細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染能在短期內(nèi)快速表達(dá)高活性蛋白,,滿(mǎn)足蛋白制備的需求。哺乳動(dòng)物細(xì)胞真核表達(dá)系統(tǒng)是通過(guò)脂質(zhì)體或者是PEI的等轉(zhuǎn)染試劑在體外通過(guò)和質(zhì)粒形成復(fù)合體,,將質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞后進(jìn)行瞬時(shí)表達(dá),。稱(chēng)為瞬時(shí)表達(dá)的原因是因?yàn)橘|(zhì)粒在真核細(xì)胞中不能擴(kuò)增。并且不斷被細(xì)胞所降解, -
真核細(xì)胞重組蛋白表達(dá)及純化服務(wù)各種蛋白的純化技巧
真核細(xì)胞重組蛋白表達(dá)及純化服務(wù)各種蛋白的純化技巧:天然大分子蛋白分離純化:結(jié)合待分離的蛋白理化性質(zhì),,適當(dāng)選用適合孔徑的分子篩截留分離純化,配合陰離子柱或陽(yáng)離子柱,,使用HLPC分離設(shè)備,,收取洗脫峰,可以獲得純度95%以上的天然蛋白,。天然小肽分離純化:通過(guò)分子篩初步截留大分子蛋白,,使用大孔樹(shù)脂或反向樹(shù)脂純化小分子化合物,進(jìn)一步通過(guò)HPLC和MS對(duì)小肽分子鑒定,,由于小肽分子一般含量較低,,獲得的蛋白量較少。未知蛋白混合物分離純化:客戶(hù)需告知帶分離蛋白的基本特性,,由鐘鼎分離純化,,最終通過(guò)質(zhì)譜鑒定,活性鑒定