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細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長期保存的常用方法,，其中細(xì)胞凍存液,，作為細(xì)胞凍存時(shí)必須使用的一種溶液，不僅僅是說只是用來進(jìn)行細(xì)胞的保存,，在細(xì)胞的購買,、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送過程中也起著關(guān)鍵作用,，因此選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要,。

傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液是向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑,，一般是10%二甲基亞砜（DMSO）和10%-90%的牛血清。

傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時(shí)遇到的問題總結(jié)如下：

1. 需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮）,，步驟繁瑣,，耗時(shí)耗力；

2. 含血清,，細(xì)胞污染(病毒,、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高；

3. 血清批次,、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異,；

4. 凍存要求高，需液氮凍存,；

5. 不能微量,、原位（如孔板）凍存。

賽爾瑞成（CRGEN）開發(fā)了三款無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品,，均有不含血清,、非程序降溫的特點(diǎn)，可直接放置-80℃冰箱長期冷凍保存,。公司的CRD10無血清細(xì)胞凍存液已經(jīng)得到了市場(chǎng)廣泛認(rèn)可,，用戶遍布全國科研院所、大學(xué),、醫(yī)院和企業(yè),。CRD5無血清低DMSO細(xì)胞凍存液和CRD0無血清無DMSO細(xì)胞凍存液是公司新開發(fā)的更加安全、高效的凍存液產(chǎn)品,，為客戶提供更多選擇,。

一、CRD10無血清細(xì)胞凍存液

產(chǎn)品特色
☆  不含血清及動(dòng)物來源性蛋白,，減少病毒,、霉菌和支原體等的污染；

☆  特別配方,，有效提高細(xì)胞凍存存活率及復(fù)蘇率,；

☆  即用型，無需現(xiàn)配,，即開即用 ,；

☆  通用型，適用于凍存各種動(dòng)物及人的細(xì)胞系,、原代細(xì)胞,；

☆  成分明確，無批次間差異,；

☆  無需程序降溫,，無需液氮,，可直接放置-80℃長期凍存；

☆  可微量,、原位凍存,，例如雜交瘤細(xì)胞的凍存,，省時(shí)高效

凍存效果

目前已驗(yàn)證可凍存的細(xì)胞類型：

人T淋巴細(xì)胞,、人B淋巴細(xì)胞、人NK細(xì)胞,、人間充質(zhì)干細(xì)胞,、人成纖維細(xì)胞、人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）,、人腎上皮細(xì)胞系（293T）,、人原代不成熟DC細(xì)胞（imDC ）、人乳腺癌（MCF-7/MDA-MB-231）,、GFP標(biāo)記-人乳腺癌,、人非小細(xì)胞肺癌（A549）、人皮膚角質(zhì)細(xì)胞（HACAT）,、人胰腺癌（Capan-1/ PANC-1/ AsPC-1）,、人結(jié)腸癌（HT-29）、人前列腺癌（PC 3）,、人肝癌（HepG2）,、人宮頸癌（Hela ）、人慢性髓原白血病細(xì)胞（K562）,、小鼠骨髓瘤細(xì)胞（Sp2/0）,、中國倉鼠卵巢細(xì)胞（CHO）、小鼠原代精原干細(xì)胞,、小鼠血管內(nèi)皮瘤細(xì)胞（EOMA）,、小鼠胰腺癌（PAN02）、小鼠乳腺癌（4T1）,、小鼠肺癌（LLC）,、小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)、大鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞,、鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞（bEnd 3）,、鼠源黑色素瘤（B16）、敲除TSC2-B16,、敲除胰島素受體-PANO2,、敲除胰島素受體-Capan-1、敲除VEGFR-HUVEC,、敲除EGFR-231,、敲除雌激素受體MCF7......

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二,、CRD5無血清低DMSO細(xì)胞凍存液

產(chǎn)品特點(diǎn)
☆  高安全性，不含血清及動(dòng)物源成分,，病毒,、霉菌和支原體等污染可能性低，各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性,。

☆  低DMSO,，DMSO的含量為5%（v/v），極大降低了對(duì)細(xì)胞潛在的毒性作用,。

☆  細(xì)胞存活率高,，無批次差異。

☆  *凍存液配方,，可直接使用,，方便簡(jiǎn)捷，可直接存放于-80℃冰箱凍存,，無需經(jīng)過費(fèi)時(shí)的程序降溫過程（省時(shí),、省力、省錢）,。

☆  可原位凍存,，比如雜交瘤細(xì)胞的亞克隆，可以大規(guī)模減少工作量,，避免污染,。

凍存效果

圖1. 小鼠成纖維細(xì)胞3T3細(xì)胞復(fù)蘇后細(xì)胞狀態(tài)對(duì)比圖

對(duì)照B：存活率89%                             本產(chǎn)品：存活率97%

圖2. 人胚腎細(xì)胞293E細(xì)胞復(fù)蘇后細(xì)胞狀態(tài)對(duì)比圖

對(duì)照B：存活率89%                       本產(chǎn)品：存活率97%

注：對(duì)照A：DMEM培養(yǎng)基+10%血清+10%DMSO，液氮凍存,；

對(duì)照B：CRD10無血清細(xì)胞凍存液（DMSO 10% v/v）

本品：CRD5無血清低DMSO細(xì)胞凍存液（DMSO 5% v/v）

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三,、CRD0無血清無DMSO細(xì)胞凍存液

產(chǎn)品特點(diǎn)
☆  高安全性，不含血清及動(dòng)物源成分,，病毒,、霉菌和支原體等污染可能性低，各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性,。

☆  無DMSO,，對(duì)細(xì)胞無潛在的毒性作用。

☆  細(xì)胞存活率高,，無批次差異,。

☆  *凍存液配方，可直接使用,，方便簡(jiǎn)捷,。

☆  可直接存放于-80℃冰箱凍存，無需經(jīng)過費(fèi)時(shí)的程序降溫過程（省時(shí),、省力,、省錢）,，不需要采用☆  程序降溫儀，更不需要放置在-196℃液氮,。

☆  可原位凍存,，比如雜交瘤細(xì)胞的亞克隆，可以大規(guī)模減少工作量,，避免污染,。

凍存效果

圖3. 復(fù)蘇后細(xì)胞狀態(tài)圖

3T3細(xì)胞存活率>90%                    ATDC5存活率>90%

圖4. 小鼠脾臟T細(xì)胞復(fù)蘇后細(xì)胞凋亡圖

三個(gè)批次復(fù)蘇率均>95%，且批次間凍存效果無明顯差異

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通用細(xì)胞凍存液與CRGEN三款無血清細(xì)胞凍存液的比較