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細胞凍存是細胞培養(yǎng)技術(shù)中細胞進行保種并長期保存的常用方法，其中細胞凍存液,，作為細胞凍存時必須使用的一種溶液,，不僅僅是說只是用來進行細胞的保存，在細胞的購買,、寄贈,、交換和運送過程中也起著關(guān)鍵作用，因此選擇一款好的細胞凍存液就尤為重要,。

傳統(tǒng)細胞凍存液是向培養(yǎng)基中加入保護劑,，一般是10%二甲基亞砜（DMSO）和10%-90%的牛血清。

傳統(tǒng)細胞凍存液凍存細胞時遇到的問題總結(jié)如下：

1. 需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮）,，步驟繁瑣,，耗時耗力；

2. 含血清,，細胞污染(病毒,、霉菌和支原體等)的風(fēng)險更高；

3. 血清批次,、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異,；

4. 凍存要求高,，需液氮凍存；

5. 不能微量,、原位（如孔板）凍存,。

賽爾瑞成（CRGEN）開發(fā)了三款無血清細胞凍存液產(chǎn)品，均有不含血清,、非程序降溫的特點,，可直接放置-80℃冰箱長期冷凍保存。公司的CRD10無血清細胞凍存液已經(jīng)得到了市場廣泛認可,，用戶遍布全國科研院所,、大學(xué)、醫(yī)院和企業(yè),。CRD5無血清低DMSO細胞凍存液和CRD0無血清無DMSO細胞凍存液是公司新開發(fā)的更加安全,、高效的凍存液產(chǎn)品，為客戶提供更多選擇,。

一,、CRD10無血清細胞凍存液

產(chǎn)品特色
☆  不含血清及動物來源性蛋白，減少病毒,、霉菌和支原體等的污染,；

☆  特別配方，有效提高細胞凍存存活率及復(fù)蘇率,；

☆  即用型,，無需現(xiàn)配，即開即用 ,；

☆  通用型，適用于凍存各種動物及人的細胞系,、原代細胞,；

☆  成分明確，無批次間差異,；

☆  無需程序降溫,，無需液氮，可直接放置-80℃長期凍存,；

☆  可微量,、原位凍存，例如雜交瘤細胞的凍存,，省時高效

凍存效果

目前已驗證可凍存的細胞類型：

人T淋巴細胞,、人B淋巴細胞、人NK細胞,、人間充質(zhì)干細胞,、人成纖維細胞,、人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC）、人腎上皮細胞系（293T）,、人原代不成熟DC細胞（imDC ）,、人乳腺癌（MCF-7/MDA-MB-231）、GFP標記-人乳腺癌,、人非小細胞肺癌（A549）,、人皮膚角質(zhì)細胞（HACAT）、人胰腺癌（Capan-1/ PANC-1/ AsPC-1）,、人結(jié)腸癌（HT-29）,、人前列腺癌（PC 3）、人肝癌（HepG2）,、人宮頸癌（Hela ）,、人慢性髓原白血病細胞（K562）、小鼠骨髓瘤細胞（Sp2/0）,、中國倉鼠卵巢細胞（CHO）,、小鼠原代精原干細胞、小鼠血管內(nèi)皮瘤細胞（EOMA）,、小鼠胰腺癌（PAN02）,、小鼠乳腺癌（4T1）、小鼠肺癌（LLC）,、小鼠胚胎成纖維細胞(MEF),、大鼠骨髓內(nèi)皮祖細胞、鼠腦微血管內(nèi)皮細胞（bEnd 3）,、鼠源黑色素瘤（B16）,、敲除TSC2-B16、敲除胰島素受體-PANO2,、敲除胰島素受體-Capan-1,、敲除VEGFR-HUVEC、敲除EGFR-231,、敲除雌激素受體MCF7......

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二,、CRD5無血清低DMSO細胞凍存液

產(chǎn)品特點
☆  高安全性，不含血清及動物源成分,，病毒,、霉菌和支原體等污染可能性低，各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性,。

☆  低DMSO,，DMSO的含量為5%（v/v），極大降低了對細胞潛在的毒性作用。

☆  細胞存活率高,，無批次差異,。

☆  *凍存液配方，可直接使用,，方便簡捷,，可直接存放于-80℃冰箱凍存，無需經(jīng)過費時的程序降溫過程（省時,、省力,、省錢）。

☆  可原位凍存,，比如雜交瘤細胞的亞克隆,，可以大規(guī)模減少工作量，避免污染,。

凍存效果

圖1. 小鼠成纖維細胞3T3細胞復(fù)蘇后細胞狀態(tài)對比圖

對照B：存活率89%                             本產(chǎn)品：存活率97%

圖2. 人胚腎細胞293E細胞復(fù)蘇后細胞狀態(tài)對比圖

對照B：存活率89%                       本產(chǎn)品：存活率97%

注：對照A：DMEM培養(yǎng)基+10%血清+10%DMSO,，液氮凍存；

對照B：CRD10無血清細胞凍存液（DMSO 10% v/v）

本品：CRD5無血清低DMSO細胞凍存液（DMSO 5% v/v）

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三,、CRD0無血清無DMSO細胞凍存液

產(chǎn)品特點
☆  高安全性,，不含血清及動物源成分，病毒,、霉菌和支原體等污染可能性低,，各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。

☆  無DMSO,，對細胞無潛在的毒性作用,。

☆  細胞存活率高，無批次差異,。

☆  *凍存液配方,，可直接使用，方便簡捷,。

☆  可直接存放于-80℃冰箱凍存,，無需經(jīng)過費時的程序降溫過程（省時、省力,、省錢），不需要采用☆  程序降溫儀,，更不需要放置在-196℃液氮,。

☆  可原位凍存，比如雜交瘤細胞的亞克隆,，可以大規(guī)模減少工作量,，避免污染。

凍存效果

圖3. 復(fù)蘇后細胞狀態(tài)圖

3T3細胞存活率>90%                    ATDC5存活率>90%

圖4. 小鼠脾臟T細胞復(fù)蘇后細胞凋亡圖

三個批次復(fù)蘇率均>95%，且批次間凍存效果無明顯差異

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通用細胞凍存液與CRGEN三款無血清細胞凍存液的比較