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真核細(xì)胞重組蛋白表達(dá)及純化服務(wù)各種蛋白的純化技巧

2022-4-22  閱讀(1285)

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  真核細(xì)胞重組蛋白表達(dá)及純化服務(wù)各種蛋白的純化技巧:
  天然大分子蛋白分離純化:
  結(jié)合待分離的蛋白理化性質(zhì),適當(dāng)選用適合孔徑的分子篩截留分離純化,,配合陰離子柱或陽離子柱,,使用HLPC分離設(shè)備,,收取洗脫峰,,可以獲得純度95%以上的天然蛋白,。
  天然小肽分離純化:
  通過分子篩初步截留大分子蛋白,,使用大孔樹脂或反向樹脂純化小分子化合物,進(jìn)一步通過HPLC和MS對(duì)小肽分子鑒定,,由于小肽分子一般含量較低,,獲得的蛋白量較少。
  未知蛋白混合物分離純化:
  客戶需告知帶分離蛋白的基本特性,,由鐘鼎分離純化,,最終通過質(zhì)譜鑒定,活性鑒定等多種方案確認(rèn)分離產(chǎn)物,。
  真核細(xì)胞重組蛋白表達(dá)及純化服務(wù)對(duì)樣品的要求:
  1.客戶應(yīng)提供準(zhǔn)確的基因序列,,明確蛋白標(biāo)簽及要求,告知蛋白用途,。
  2.客戶提供載體質(zhì)粒,最小量不得低于100ng,,同時(shí)提供原始質(zhì)粒圖譜及序列文件,,插入基因后重組質(zhì)粒的測(cè)序報(bào)告。
  3.委托純化的重組蛋白應(yīng)帶有His-tag或GST-tag,;帶其他標(biāo)簽或無標(biāo)簽的重組蛋白,,需另行商議純化方法。
  4.如實(shí)驗(yàn)需要,,客戶需提供重組蛋白序列,、分子量、等電點(diǎn),、緩沖液成分及pH等信息,。

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